【技术实现步骤摘要】
一种预处理间充质干细胞调理液的制备方法和用途
[0001]本专利技术属于生物化学领域,涉及一种细胞液,具体来说是一种预处理间充质干细胞调理液的制备方法和用途。
技术介绍
[0002]全身性系统炎症的基本病理变化是机体内促炎—抗炎自稳失衡所致的、伴有免疫防御功能下降的、持续不受控制的炎症反应。其中,神经系统炎症的影响尤为重要。炎症可通过不同途径激活炎症细胞,释放TNF
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α、IL
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1等促炎介质,参与机体防御反应。海马和大脑皮层区域的炎症因子基因表达升高,包括TNFα、IFNγ、IL6、IL10、CXCL12等。炎症作为机体免疫应答的重要机制之一,成为生命科学领域的研究热点之一。
[0003]MSCs因其低免疫原性、多向分化潜能和强大的免疫调节作用,成为再生医学临床治疗的潜在细胞来源。MSCs具有极强的迁移能力,能够靶向迁移到损伤组织,发挥抗炎和免疫调控的作用,通过旁分泌细胞因子促进损伤组织的修复。MSCs作为组织工程的种子细胞,用于修复多种组织和器官,如骨、软骨、韧带、肌腱、皮肤以 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种预处理间充质干细胞调理液的制备方法,其特征在于包括如下步骤1)一个配制间充质干细胞完全培养液的步骤,所述的间充质干细胞完全培养液由高糖DMEM培养基、血清替代物、肝素钠溶液组成;2)配制IFN
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γ、TNF
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α小分子组合物储存液;3)一个配制间充质干细胞预处理液的步骤,在步骤1)的间充质干细胞完全培养液中加入步骤2)的小分子组合物储存液,使得IFN
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γ、TNF
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α的终浓度分别为8~12ng/ml。4)一个培养步骤3)的间充质干细胞预处理液的步骤:当细胞长至汇合度为90
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100%时,胰酶消化细胞,计数,将1*10^5细胞接种于6孔板中或者1*10^6细胞接种于10cm细胞培养皿,培养18
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24小时;弃掉原有培养基,更换间充质干细胞预处理液,继续培养24小时;弃掉含有小分子组合物的培养基,PBS缓冲液洗涤至少两次,继续培养36小时以上;5)一个浓缩收集间充质干细胞调理液的步骤:收集步骤4)的细胞上清,离心,去除死细胞和细胞碎片;6)...
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