一种混合培养包皮获得间充质干细胞的方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种混合培养包皮获得间充质干细胞的方法及其应用。本发明专利技术的混合培养包皮获得间充质干细胞的方法包括将N份不同来源的包皮与培养基混合，培养，得到P0代间充质干细胞；所述N大于等于2。采用本发明专利技术的方法能够获得功能稳定、均一，且适合临床使用的间充质干细胞。干细胞。干细胞。

【技术实现步骤摘要】
一种混合培养包皮获得间充质干细胞的方法及其应用


[0001]本专利技术涉及干细胞培养
，尤其是涉及一种混合培养包皮获得间充质干细胞的方法及其应用。

技术介绍

[0002]间充质干细胞(Mesenchymal stem cells，MSCs)是存在于多种组织中的多潜能的基质细胞，能够分化为不同类型的细胞，包括成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞、肌细胞、神经细胞等，间充质干细胞由于其巨大的组织再生潜能、免疫调节特性、多项分化能力、旁分泌功能及医美保健等功能，使其成为临床细胞疗法的热点。而包皮(FSK)是一种生物废物，主要是从婴幼儿和儿童包皮环切术等手术后的生物废弃物，既往、现在都作为生物垃圾抛弃，由医院集中做无害化处理。
[0003]相关研究表明，包皮来源的间充质干细胞具有间充质干细胞的表型和多向分化潜能，符合国际细胞治疗学会(ISCT)标准，并且包皮来源的间充质干细胞具有更强的免疫调控能力，更适合于临床免疫性疾病和脓毒症等的治疗。包皮来源间充质干细胞除可以个体保存，以备自己及家人需求外，还可能是工业化间充质干细胞的来源。然而单份包皮来源的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种混合培养包皮获得间充质干细胞的方法，其特征在于，包括将N份不同来源的包皮与培养基混合，培养，得到P0代间充质干细胞；所述N大于等于2。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述包皮为包皮真皮组织；优选地，所述包皮真皮组织的获取方法为：步骤S1、将包皮环切术后的包皮依次用碘伏浸泡、酒精消毒和磷酸盐缓冲盐水清洗后备用；步骤S2、对所述包皮进行纵向切片以扩散组织，分离表皮和真皮，然后将所述真皮切成小块形成组织匀浆即得。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤S1中，所述碘伏浸泡时间为1min～3min；优选地，所述酒精消毒的时间为30s～90s。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述培养基为含有FBS的DMEM/f12培养基或间充质干细胞无血清培养基；优选地，所述DMEM/f12培养基中的FBS的浓度为8～12％；优选地，所述间充质干细胞无血清培养基中的青霉素/链霉素的浓度为45U/mL～55U/mL；优选地，所述培养的条件为37
±
1℃、体积分数为4％～6％CO2的恒温恒湿培养箱。5.根据权利要求1～4任一项所述的方法，其特征在于，所述方法还包括扩大培养，具体包括：将P0代间充质干细胞悬液与微载体培养液混合培养，沉淀微载体和间充质干细胞，加入胰蛋白酶消化，消化完成后收集上清液中的间充质干细胞即可。6.根据权利要求5所述的方法，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：马廉，
申请(专利权)人：深圳市儿童医院，
类型：发明
国别省市：