血清中茶碱和多索茶碱的检测方法技术

本发明专利技术提供了一种血清中茶碱和多索茶碱的检测方法，涉及色谱检测分析技术领域。所述方法首先配置茶碱和多索茶碱标准品混合溶液，并进行前处理，随后采用反相高效液相色谱进行分析检测，建立标准曲线；然后将待测血清样品溶液进行色谱法分析检测，采用外标法计算得到待测血清样品中茶碱和多索茶碱的含量。其中，前处理包括：将标准品混合溶液或待测血清样品与蛋白沉淀剂混匀后固液分离，随后洗涤上清的步骤。上述方法采用茶碱和多索茶碱标准品对血清中的茶碱和多索茶碱浓度进行检测，具有准确、高效的优势。经验证，能够充分满足方法验证过程中对检出限、精密度、准确度和基质效应等方面的要求。方面的要求。方面的要求。

【技术实现步骤摘要】
血清中茶碱和多索茶碱的检测方法


[0001]本专利技术涉及色谱检测分析
，尤其是涉及一种血清中茶碱和多索茶碱的检测方法。

技术介绍

[0002]茶碱是临床上治疗支气管哮喘的经典药物，其通过抑制磷酸二酯酶，使细胞内环磷酸腺苷含量增高而发挥药理作用。茶碱的有效血药浓度与中毒浓度非常接近，因此临床应用需要检测其血药浓度。多索茶碱是新型的甲基黄嘌呤衍生物，其支气管平滑松弛作用是茶碱的10～15倍，并有镇咳作用。多索茶碱的毒副作用较茶碱少，但是大剂量仍可引起血压下降等不良反应。茶碱和多索茶碱互为补充，临床上存在着两者交替使用甚至合并使用的情况。
[0003]目前已有多种方法用于血清中茶碱和多索茶碱的测定。如：免疫法、荧光偏振免疫法、高效液相串联质谱法、吖啶酯直接化学发光法、酶增强化学发光法、酶扩大免疫法、微粒子酶免疫分析法等用于检测茶碱浓度。然而上述方法均存在一定的缺陷，其中，免疫学原理测定茶碱由于采用抗原
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抗体免疫反应，这种检测方法无法直接检测茶碱本身，其底物检测必须依赖一系列的免疫反应，使得它易受血清内源性物质的干扰本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种血清中茶碱和多索茶碱的检测方法，其特征在于，所述方法包括：(a)将茶碱和多索茶碱标准品溶解于稀释液中，随后按不同浓度配置标准品混合溶液，进行样品前处理，然后采用反相高效液相色谱进行分析检测，建立标准曲线；(b)将待测血清样品溶液进行与步骤(a)相同的前处理，随后采用相同的色谱法进行分析检测，采用外标法计算得到待测血清样品中茶碱和多索茶碱的含量；所述前处理包括：将标准品混合溶液或待测血清样品与蛋白沉淀剂混匀后固液分离，随后洗涤上清，完成前处理；所述蛋白沉淀剂包括甲醇和/或乙腈，优选为甲醇和乙腈。2.根据权利要求1所述的血清中茶碱和多索茶碱的检测方法，其特征在于，所述甲醇和乙腈的质量比为0.3～1：0.7～1，优选为1：1。3.根据权利要求1所述的血清中茶碱和多索茶碱的检测方法，其特征在于，所述步骤(a)中的稀释液为牛血清或人血清。4.根据权利要求1所述的血清中茶碱和多索茶碱的检测方法，其特征在于，所述反相高效液相色谱法进行检测的色谱条件如下：色谱柱：Shim
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pack GIST C18,4.6
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150mm,5μm；流动相组成：名称制备方法流动相A水流动相B甲醇洗针液50％甲醇...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑佳，薛元强，栗琳，周继福，周立，张新星，丁沛瑜，苏营雪，应洪波，
申请(专利权)人：江苏豪思睦可生物科技有限公司湖南豪思生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：