一种检测吊白块含量的方法及其应用技术

本发明专利技术涉及食品检测技术领域，尤其涉及一种检测吊白块含量的方法及其应用。所述方法包括：包括：混合多巴胺、间苯二酚和待测样品得到混合溶液，充分反应后检测所述混合溶液的荧光强度，将检测结果和吊白块标准曲线对比得到所述待测样品中吊白块含量。本发明专利技术基于多巴胺和间苯二酚的反应原理提供了一种检测食品中吊白块含量的方法，其样品处理简单、基质耐受性强、准确性高，对于粉丝、面粉、米粉以及多种其他食品中吊白块的检测具有重要意义。他食品中吊白块的检测具有重要意义。他食品中吊白块的检测具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
一种检测吊白块含量的方法及其应用


[0001]本专利技术涉及食品检测
，尤其涉及一种检测吊白块含量的方法及其应用。

技术介绍

[0002]吊白块学名为甲醛次硫酸钠，通常被用作工业漂白剂以及有机合成过程中的绿色试剂。吊白块与甲醛和亚硫酸氢钠的化学性质较为相似，具有强还原性，因而被非法用于食品漂白和保鲜。但吊白块是一种强致癌物质，对人体的肺、肝脏和肾脏损害极大，普通人经口摄入量为10g时即可导致中毒死亡。因此，在食品加工中吊白块被严禁使用。然而在利益的驱使下，吊白块被非法用作食品添加剂用于漂白和改善小麦粉、米粉、豆腐、粉丝和其他食品的漂白及保鲜的情况仍然存在，这对消费者的健康造成了严重威胁。因此，如何准确地检测食品中吊白块是保障食品安全的重要举措之一。
[0003]吊白块化学性质不稳定，在在酸性溶液和加热条件下会等摩尔分解成甲醛和亚硫酸氢钠。因此，常规的高效液相色谱、高效液相串联质谱等仪器分析方法难以直接测定吊白块。目前，间接法是较为常用的检测吊白块含量的方法，即在酸性条件下将吊白块分解为甲醛、二氧化硫或亚硫酸氢钠，然后通过测定分解产物的含量进而实现吊白块的间接检测。已报道的间接法包括变色酸法、乙酰丙酮法和盐酸苯肼比色法等分析技术。但间接法存在操作复杂、步骤繁琐、准确性低等问题，而且通过间接法无法辨别测得的甲醛是吊白块的分解产物还是本身存在的添加剂，导致检测结果假阳性率高。因此，迫切需要开发一种可靠、快速、灵敏的检测方法并应用于食品样品中吊白块的定量检测。

技术实现思路

[0004]为了解决现有技术存在的问题，本专利技术提供一种检测吊白块的方法及其应用。
[0005]第一方面，本专利技术提供一种检测吊白块含量的方法，包括：
[0006]混合多巴胺、间苯二酚和待测样品得到混合溶液，充分反应后检测所述混合溶液的荧光强度，将检测结果和吊白块标准曲线对比得到所述待测样品中吊白块含量。
[0007]如图1所示，本专利技术的检测原理为：多巴胺和间苯二酚在碱性条件下可以生成蓝色荧光分子(azamonardine)；当在多巴胺和间苯二酚的混合溶液中加入吊白块，蓝色荧光分子的生成量降低，即荧光强度降低(图1)。因此，吊白块的浓度与azamonardine荧光强度呈反比，进而实现样品中吊白块的定量检测。
[0008]其中，多巴胺和间苯二酚为商用化学试剂，可直接购买获得，作为原位荧光反应的底物。
[0009]进一步地，所述吊白块标准曲线的制备方法如下：
[0010]将不同浓度吊白块和多巴胺、间苯二酚混合后得到不同浓度的吊白检测溶液，并检测其荧光强度；
[0011]后根据所述不同浓度的吊白检测溶液的浓度和所述荧光强度得到所述吊白块标准曲线。
[0012]进一步地，所述多巴胺和所述间苯二酚的浓度比为(1～60)：(1～60)，优选为(1～3)：(1～3)。
[0013]进一步地，所述多巴胺的浓度为4～6μM；和/或，所述间苯二酚的浓度为8～12μM。
[0014]进一步地，所述待测样品在检测前通过如下方法预处理：
[0015]将所述待测样品溶解于碳酸盐溶液中，超声提取、离心后过滤。
[0016]进一步地，所述碳酸盐溶液的浓度为1～3mM；和/或，所述超声提取为在27℃～35℃条件下提取5～15分钟；和/或，所述离心为在8000～12000rpm转速下离去10～20分钟；和/或，所述过滤为通过0.4～0.5μm的过滤器进行过滤。
[0017]进一步地，所述荧光强度为在420nm
‑
465nm范围内的荧光强度。
[0018]进一步地，所述充分反应为在碱性条件下反应20分钟以上。
[0019]第二方面，本专利技术提供一种吊白块检测试剂盒，包括：
[0020]多巴胺溶液、间苯二酚溶液、吊白块标准品溶液和样品提取液。
[0021]其中，多巴胺溶液的浓度为4～6μM，间苯二酚溶液的弄懂度为8～12μM。
[0022]本专利技术进一步提供所述方法在检测食品中的吊白块中的应用。
[0023]进一步地，所述食品包括粉丝、面粉、米粉、腐竹或豆腐中的一种或多种。
[0024]本专利技术具备如下有益效果：
[0025]本专利技术提供了一种基于多巴胺和间苯二酚在碱性条件下的反应生产蓝色荧光分子的原理，提供了一种检测吊白块的方法，通过荧光强度即可反应吊白块的含量。本专利技术提供的方法具有样品前处理简单、基质耐受性强、灵敏度高、准确性高、成本低等特点。本专利技术提供的方法以粉丝、面粉和米粉等食品为检测样本，方法的检测限为0.28
‑
0.38μg/g，在测定食品中吊白块残留时具有良好的应用前景。
附图说明
[0026]图1为本专利技术实施例1提供的检测吊白块的原理示意图。
[0027]图2为本专利技术实施例1提供的缓冲体系中荧光强度随吊白块浓度变化对应的变化图。
[0028]图3为本专利技术实施例1提供的缓冲体系中吊白块的标准曲线图。
[0029]图4为本专利技术实施例3提供的荧光检测方法的特异性测定图。
具体实施方式
[0030]以下实施例用于说明本专利技术，但不用来限制本专利技术的范围。
[0031]实施例1
[0032]本实施例提供一种检测吊白块的方法，其流程如图1所示，其中吊白块标准曲线的建立方法的流程如下：
[0033]1、取0.76g多巴胺溶解于超纯水中，并用10mL容量瓶定容，制备获得浓度为500μM的多巴胺溶液。取浓度为50μM的多巴胺溶液稀释100倍，并于100mL容量瓶中定容，即可获得浓度为5.0μM的多巴胺溶液。
[0034]2、取1.1g间苯二酚溶解于超纯水中，并用10mL容量瓶定容，制备获得浓度为1mM的间苯二酚溶液。取浓度为1mM的间苯二酚溶液稀释100倍，并于100mL容量瓶中定容，即可获
得浓度为10μM的间苯二酚溶液。
[0035]3、取吊白块11.8mg溶解于碳酸盐缓冲溶液(2mM，pH 10)中定容至10mL，配置浓度为10mg/mL的吊白块标准品溶液。将吊白块标准品溶液分别稀释为0，0.01，0.03，0.09，0.27，0.81，1.30和2.43μg/mL。
[0036]4、取5.0μM多巴胺溶液(30μL/孔)、10μM的间苯二酚溶液(30μL/孔)、不同浓度吊白块标准品溶液(200μL/孔)于不透明96孔酶标板中(每个条件做5个平行)。
[0037]5、混合溶液振荡混合均匀，室温条件下反应20min。
[0038]6、设定荧光分光光度计或多功能酶标仪的激发和发射波长分别为420nm和465nm，最终测定混合溶液荧光强度。
[0039]7、将所测得的数据以
‑
log10(吊白块浓度)值为横坐标，以荧光强度为纵坐标，利用Origin 8.0的四参数方程进行拟合，建立标准曲线获得半数抑制浓度(IC
50
)值及线性范围。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测吊白块含量的方法，其特征在于，包括：混合多巴胺、间苯二酚和待测样品得到混合溶液，充分反应后检测所述混合溶液的荧光强度，将检测结果和吊白块标准曲线对比得到所述待测样品中吊白块含量。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述吊白块标准曲线的制备方法如下：将不同浓度吊白块和多巴胺、间苯二酚混合后得到不同浓度的吊白检测溶液，并检测其荧光强度；后根据所述不同浓度的吊白检测溶液的浓度和所述荧光强度得到所述吊白块标准曲线。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述多巴胺和所述间苯二酚的浓度比为(1～60)：(1～60)。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述待测样品在检测前通过如下方法预处理：将所述待测样品溶解于碳酸盐溶液中，超声提取、离心后过滤。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述碳酸盐溶...

【专利技术属性】
技术研发人员：李红芳，侯如燕，蔡荟梅，彭传燚，徐彦辉，
申请(专利权)人：安徽农业大学，
类型：发明
国别省市：