一株普陀条孢牛肝菌菌株LD-0312及应用制造技术

本发明专利技术公开了一株普陀条孢牛肝菌菌株LD

【技术实现步骤摘要】
一株普陀条孢牛肝菌菌株LD
‑
0312及应用


[0001]本专利技术属于微生物
，具体涉及一株普陀条孢牛肝菌菌株LD
‑
0312及应用。

技术介绍

[0002]在自然界森林系统中，植物只能从枯枝落叶层中获取到有限的氮(N)和磷(P)，外生菌根共生体的生物学功能是将真菌吸收的矿质营养物质交换为植物来源的碳水化合物。通过散发有机酸，真菌菌丝可以从枯枝落叶层中甚至能够进入固化的矿物并利用矿物营养物质。吸收的元素在真菌菌丝体中被转运到哈氏网中进行代谢和储存，在哈氏网中，真菌氮(N)和磷(P)被交换为植物碳(C)。因此，外生菌根植物往比非菌根植物具有更高的氮(N)和磷(P)含量。从学者们大量的盆栽试验及田间试验表明，外生菌根真菌能够满足其共生植物80％的氮需求。氮对植物来说是一种十分重要的元素，它可以对植物的组织结构及生物量产生直接的影响。外生菌根真菌在土壤中含氮化合物转化和其共生植物氮营养中的作用的研究引起了许多研究者的关注。
[0003]牛肝菌作为我国分布最广的菌根型野生食用菌森林资源，它除了具有非常显著的生态意义，其子实体味道鲜美还具有较高的经济价值。由此可见，牛肝菌类外生菌根真菌在自然资源保护及生态修复方面具有广阔的开发利用前景。为了充分开发牛肝菌的生态功能，有必要进一步在丰富外生菌根真菌种质资源中筛选获得更多优异的菌株，为其开发利用提供保障。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一株普陀条孢牛肝菌菌株LD
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0312(Boletellus putuoensis)。
[0005]本专利技术所述菌株LD
‑
0312是从浙江省嘉兴市海盐县胡家湾采集的子实体分离获得，对其进行了形态学、生理生化性质和ITS测序鉴定，鉴定为条孢牛肝菌属Boletellus属的一个新种，该菌株的分类地位是Boletellus sp.，根据命名方法将其命名为Boletellus putuoensis。
[0006]该菌株已于2022年9月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC NO.40300，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，邮编100101。
[0007]进一步的，所述菌株是从普陀条孢牛肝菌子实体中分离所得。
[0008]本专利技术还公开了上述普陀条孢牛肝菌菌株LD
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0312的培养方法为：
[0009](1)将牛肝菌菌种于GPY固体培养基中活化，22℃，暗培养30天，备用；
[0010](2)使用8mm打孔器在长好牛肝菌菌丝体的固体培养基中打孔，取大小一致的菌种块接种于GPY(葡萄糖20g/L，蛋白胨5g/L，酵母膏10g/L)培养基的三角瓶中，装液量为100/200mL，置于22℃，150r/min的摇床中进行暗培养20d。
[0011]本专利技术还包括上述菌株普陀条孢牛肝菌菌株LD
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0312在促进共生植物生长上的应
用。
[0012]进一步的，上述共生植物为黑松。具体地，所述普陀条孢牛肝菌菌株能够促进黑松植株增高、提高鲜重、增长根长、提高光合作用。其中，所述根长包括总根长和侧根长。
[0013]本专利技术还包括一种应用上述新种菌株Boletellus putuoensis LD
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0312对促进黑松生长的方法，所述方法为：将菌株LD
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0312接种到黑松组培苗和/或实生苗中；所述接种方法为：将黑松组培苗和/或实生苗接种于培养LD
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0312的培养基中和/或将LD
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0312的液体菌种浇灌到黑松组培苗和/或实生苗的根系。
[0014]本专利技术的优点：
[0015]本专利技术的菌株是首次从牛肝菌中分离出来的新种普陀条孢牛肝菌(Boletellusputuoensis)LD
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0312菌株，属于条孢牛肝菌属Boletellus，为该属新种，该菌株属于首次分离得到，该新种的发现和利用丰富了外生菌根真菌的可利用微生物资源。
[0016]本专利技术还对其应用进行了研究，结果发现，其可以促进共生植物的生长，具体包括促进黑松植株增高、提高鲜重、增长根长、提高光合作用，因此可在生态修复等领域提供优异的种质资源。
附图说明
[0017]图1为本专利技术菌株LD
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0312的形态及显微结构图；
[0018]图2为本专利技术菌株LD
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0312的系统发育树图；
[0019]图3为本专利技术菌株LD
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0312接种黑松幼苗生长图；图中，A为未接种LD
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0312菌株的CK组；B为接种LD
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0312菌株的黑松幼苗。
具体实施方式
[0020]下面结合具体实施例来进一步描述本专利技术，本专利技术的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但下述实施例中所涉及的具体实验方法如无特殊说明，均为常规方法或按照制造厂商说明书建议的条件实施。
[0021]若未特别指明，实施例中所用技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。下述实施例中的试验方法，如无特别说明，均为常规方法。如无特殊说明，所采用的试剂及材料，均可以从市场中购买获得。
[0022]除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本专利技术中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。
[0023]实施例1普陀条孢牛肝菌菌株LD
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0312的分离及鉴定。
[0024]1.菌株的获得
[0025]本专利技术的菌株是从浙江省嘉兴市海盐县胡家湾采集的子实体分离获得。
[0026]2.平板固体培养基和GPY培养基(葡萄糖20g/L，蛋白胨5g/L，酵母膏10g/L)的配制：按照常规操作方法即可。
[0027]3.菌种的分离
[0028](1)将牛肝菌菌种于平板固体培养基中活化，22℃，暗培养30天，备用；
[0029](2)使用8mm打孔器在长好牛肝菌菌丝体的固体培养基中打孔，取大小一致的菌种
块接种于GPY培养基的三角瓶中，装液量为100/200mL，置于22℃，150r/min的摇床中进行暗培养20d，得到普陀条孢牛肝菌菌株。
[0030]4.菌株LD
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0312生物学特性鉴定：
[0031]该菌株在GPY固体培养基中菌落呈圆形或近似圆形，褐色至深棕色。菌落不呈现放射状，生长前期多为气生菌丝，后期多为基内菌丝。菌丝直径3.2
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3.8μm，表面光滑，局部膨大，无锁状联合。
[0032]5.分子生物学鉴定
[0033]用测序得到的28S、TEF1、RPB2序列使用RAxML法与GenBank数据库中的亲缘关系相近种的已知序列构建系本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株普陀条孢牛肝菌菌株LD
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0312，其特征在于，所述菌株为普陀条孢牛肝菌(Boletellus putuoensis)，所述菌株于2022年9月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.40300。2.根据权利要求1所述的普陀条孢牛肝菌菌株，其特征在于，所述普陀条孢牛肝菌菌株LD
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0312从Boletellus putuoensis子实体中分离获得。3.权利要求1所述的普陀条孢牛肝菌菌株LD
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0312的液体菌种的培养方法，其特征在于，所述方法为：(1)将牛肝菌菌种于GPY固体培养基中活化，22℃，暗培养30天，备用；(2)使...

【专利技术属性】
技术研发人员：王建瑞，谭钤文，穆春凤，郝宸，陈雪芳，
申请(专利权)人：鲁东大学，
类型：发明
国别省市：