一种长效微粒Ⅰ型与III型胶原蛋白复合植入剂制造技术

本发明专利技术揭示了一种性能改善的微粒I型与III型胶原蛋白复合植入剂及其制备方法。该胶原蛋白复合植入剂包括：使用巯基氧化酶交联的I型与III型胶原蛋白复合微粒。上述植入剂具有长效且效期一致长(波动小)、通针性好等优势。通针性好等优势。

【技术实现步骤摘要】
一种长效微粒Ⅰ型与III型胶原蛋白复合植入剂


[0001]本专利技术涉及一种注射植入剂。具体来说，涉及一种性能优异的一种长效微粒I型与III型胶原蛋白复合植入剂。
[0002]技术背景I型胶原蛋白是人体中最丰富的胶原蛋白。它形成大的嗜酸性纤维，称为胶原纤维。它存在于疤痕组织，最终产品时组织愈合通过修复、以及腱、韧带、所述内膜的肌原纤维的有机部分骨，所述真皮中、牙质和器官胶囊。
[0003]Ⅲ型胶原蛋白，是人体皮肤、筋膜、肌腱中主要的胶原蛋白，与I型胶原蛋白比例为4比1。Ⅲ型胶原蛋白较细小，存在于表皮层和真皮层之间，称之为“婴儿胶原蛋白”。微胶原层（Cushion Network）主要由Ⅲ型胶原蛋白构成，是指于表皮层与真皮层之间的组织结构，是撑起表皮的关键，也是肌肤塌陷的第一步。III型胶原不成熟、不稳定，弹性张力较低。
[0004]I型与III型胶原蛋白的组合，可原位补充缺失胶原蛋白，I型给凹陷部位支撑、III型修复肌肤弹性；填充后可以作为细胞生长的依附与支架，诱导产生与宿主相同的胶原组织，刺激胶原再生。
[0005]I型、III型胶原蛋白在炎症和抗原反应中引起的作用最小，其组合已被中国、美国的食品和药品管理部门批准用于许多类型的医疗应用，包括伤口辅料和人工皮肤。
[0006]然而，I型、III型胶原蛋白体内存留时间短等重大不足。
[0007]虽然，现有一些长效胶原蛋白技术，例如：CN 101648989（长效型胶原蛋白及其制造方法）：本专利技术公开了一种长效型胶原蛋白及其制造方法，是将一猪皮经过刮除多余组织、 去除油脂、膨润、消化、离心分离、盐析、收集下层沉淀物、冷冻干燥后即可得一胶 原蛋白，再将该胶原蛋白与γ
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聚麸胺酸(γ
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PGA)混合，同时加入一戊二醛溶液并搅拌均 匀，进行第一交联，再重复加入该戊二醛溶液搅拌均匀，进行第二次交联后，即可得 该长效型胶原蛋白，其可解决习用胶原蛋白的存留时间过短、必须常常补充施打，以 及会残留高浓度的戊二醛，具有生物毒性会危害人体健康等缺点；CN102924731A（一种三重交联的胶原蛋白及制造方法和用途）：一种三重交联胶原蛋白的制造方法，包括：提供一可溶性的胶原蛋白样品；混合该胶原蛋白样品与一第一交联剂，以形成一重交联的胶原蛋白；混合该一重交联的胶原蛋白与一第二交联剂，以形成二重交联的胶原蛋白；以及混合该二重交联的胶原蛋白与一第三交联剂，以形成三重交联的胶原蛋白。其中，第一交联剂、第二交联剂、及第三交联剂分别选自由：醛类交联剂、亚胺类交联剂及环氧化物交联剂所组成的群组，且第一交联剂异于第二交联剂，第三交联剂异于第一交联剂及第二交联剂；但是，上述技术使用化学改性方法，虽然效果显著，但是存在化学试剂残留与改性过程中形成有害物质的风险, 此外，还有反应条件不温和、产生副产物、特异性差、催化效率和产率低及工过程中胶原蛋白有损失等不足。
[0008]更重要的是，上述胶原蛋白是在均相中整体交联的，或者交联成一个巨大的粒子，
不是很小的微粒，更不是大小基本均匀的微粒，然而，使用时却是较小的粒子，因而，其表观疗效不一致，如疗效期一不致长。
[0009]此外，其制剂基本为凝胶剂，因其水分散体系粘度高在生产使用中造成诸多不便，如剂量分装不准，注射时通针性不好。
[0010]因此，现实中需要一种I型与III型胶原蛋白复合植入剂，其有长效且效期一致长(波动小)，通针性好等优势。

技术实现思路

[0011]本专利技术的目的就是提供一种性能改善的长效且效期一致长(波动小)、通针性好的微粒I型与III型胶原蛋白复合植入剂及其制备方法。
[0012]本专利技术人发现，通过巯基氧化酶把普通I型与III型胶原蛋白的组合改性成大小基本均匀的微粒交联胶原蛋白，不仅可以延长其在体内的作用时间，而且效期一致长(波动小)，还使其水分散体系的粘度下降，解决其在生产使用中造成诸多问题，如准确分装剂量，使注射时通针性较好；此外，还可以减少有害物质的混入、使反应条件温和、降低工过程中胶原蛋白的损失、提高特异性、不产生副产物、提高催化效率和提高产率等。
[0013]巯基氧化酶 (sulfhydryl oxidase, EC 1.8.3.3)是一类由一条多肽链结合一个辅基构成的黄素蛋白。该类酶结合的辅基通常为维生素B2的衍生物黄素腺嘌呤二核苷酸 (flavin adenine dinucleotide, FAD) 或核黄素
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磷酸 (flavin mononucleotide, FMN)。巯基氧化酶的催化机理与葡萄糖氧化酶大致相同。在分子氧的存在下，巯基氧化酶特异性地将二硫苏糖醇 (dithiothreitol, DTT)、谷胱甘肽或多肽链的半胱氨酸残基的巯基 (
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SH)氧化为二硫键 (
‑
S
‑
S
‑
)，同时产生过氧化氢。过氧化氢作为一种强氧化剂，可继续氧化剩余的巯基 (
‑
SH) 转化为二硫键 (
‑
S
‑
S
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)。
[0014]基于此，完成了本专利技术。
[0015]本专利技术涉及一种（性能改善的）长效且效期一致长(波动小)、通针性好的微粒I型与III型胶原蛋白复合植入剂，该胶原蛋白复合植入剂包括：使用巯基氧化酶交联的I型与III型胶原蛋白复合微粒。
[0016]本专利技术涉及一种（性能改善的）长效且效期一致长(波动小)、通针性好的微粒I型与III型胶原蛋白复合植入剂的制备方法，该方法包括：（1）、制备温度不高于4℃的包括表面活性剂及挥发性的不完全溶于水的有机溶剂的溶液，即油相；（2）、制备温度不高于4℃的包括I型与III型胶原蛋白和巯基氧化酶及蛋白活性保护剂的水溶液，即水相；（3）、上述水溶液制备完成后30分钟内把上述水溶液与上述有机溶剂的溶液混合，并使它们形成油包水型乳液，温度保持4℃至
‑
4℃24小时以上，较佳地48小时以内，使上述胶原蛋白基本交联；（4）、上述胶原蛋白基本交联后过滤上述乳液获取微粒，用10
‑
40%乙醇水溶液洗涤上述微粒，除去其中上述表面活性剂、上述有机溶剂、上述蛋白活性保护剂及上述酶等残余物；（5）、低温冷冻法除去微粒中残余溶剂。
[0017]上文中的“复合”的含义相当于“组合”，二者意思等同。
具体实施方式
[0018]较佳地，过滤上述乳液获取微粒过程中，滤去粒径大于25μm及小于0.5μm的微粒，保留粒径位于0.5μm与25μm间的微粒；更佳地，滤去粒径大于25μm及小于5μm的微粒，保留粒径位于5μm与25μm间的微粒；最佳地，滤去粒径大于25μm及小于10μm的微粒或滤去粒径大于15μm及小于5μm的微粒，保留粒径位于10μm与25μm间的微粒或保留粒径位于5μm与15μm间的微粒。
[0019]上述蛋白活性保护剂包括但限于山梨糖醇、甘露糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇、乳本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种长效且效期波动小、通针性好的微粒I型与III型胶原蛋白复合植入剂，该胶原蛋白复合植入剂包括：使用巯基氧化酶交联的I型与III型胶原蛋白复合微粒。2.一种长效且效期波动小、通针性好的微粒I型与III型胶原蛋白复合植入剂的制备方法，该方法包括：（1）、制备温度不高于4℃的包括表面活性剂及挥发性的不完全溶于水的有机溶剂的溶液，即油相；（2）、制备温度不高于4℃的包括I型与III型胶原蛋白和巯基氧化酶及蛋白活性保护剂的水溶液，即水相；（3）、上述水溶液制备完成后30分钟内把上述水溶液与上述有机溶剂的溶液混合，并使它们形成油包水型乳液，温度保持4℃至
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4℃24小时以上，使上述胶原蛋白交联；（4）、上述胶原蛋白交联后过滤上述乳液获取微粒，用乙醇水溶液洗涤上述微粒，除去其中上述表面活性剂、上述有机溶剂、上述蛋白活性保护剂及上述酶等残余物；（5）、低温冷冻法除去微粒中残余溶剂。3.根据权利要求2的制备方法，其特征在于所述蛋白活性保护剂选自山梨糖醇、甘露糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇、乳糖醇、木糖醇，及其组合。4.根据权利要求2的制备方法，其特征在于所述乙醇水溶液的浓度为10
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40%，该浓度浓度为体积比。5.根据权利要求2的制备方法，其特征在于所述水性溶液中I型与III型胶原蛋白的总质量浓度为0.1%

【专利技术属性】
技术研发人员：付劼，韩淑萍，李贤明，王雪，陈文洁，
申请(专利权)人：江苏西宏生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：