一种长效微粒Ⅰ型胶原蛋白植入剂制造技术

本发明专利技术揭示了一种性能改善的微粒Ⅰ型胶原蛋白植入剂及其制备方法。该胶原蛋白植入剂包括：使用酪氨酸酶交联的Ⅰ型胶原蛋白微粒。上述植入剂具有长效且效期一致长(波动小)、通针性好优势。好优势。

【技术实现步骤摘要】
一种长效微粒Ⅰ型胶原蛋白植入剂


[0001]本专利技术涉及一种注射植入剂。具体来说，涉及一种性能优异的一种长效微粒Ⅰ型胶原蛋白植入剂。
[0002]技术背景I型胶原蛋白是人体中最丰富的胶原蛋白。它形成大的嗜酸性纤维，称为胶原纤维。它存在于疤痕组织，最终产品时组织愈合通过修复、以及腱、韧带、所述内膜的肌原纤维的有机部分骨，所述真皮中、牙质和器官胶囊。
[0003]I型胶原蛋白在炎症和抗原反应中引起的作用最小，已被中国、美国的食品和药品管理部门批准用于许多类型的医疗应用，包括伤口辅料和人工皮肤。
[0004]然而，I型胶原蛋白体内存留时间短等重大不足。
[0005]虽然，现有一些长效胶原蛋白技术，例如：CN 101648989（长效型胶原蛋白及其制造方法）：本专利技术公开了一种长效型胶原蛋白及其制造方法，是将一猪皮经过刮除多余组织、 去除油脂、膨润、消化、离心分离、盐析、收集下层沉淀物、冷冻干燥后即可得一胶 原蛋白，再将该胶原蛋白与γ
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聚麸胺酸(γ
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PGA)混合，同时加入一戊二醛溶液并搅拌均 匀，进行第一交联，再重复加入该戊二醛溶液搅拌均匀，进行第二次交联后，即可得 该长效型胶原蛋白，其可解决习用胶原蛋白的存留时间过短、必须常常补充施打，以 及会残留高浓度的戊二醛，具有生物毒性会危害人体健康等缺点；CN102924731A（一种三重交联的胶原蛋白及制造方法和用途）：一种三重交联胶原蛋白的制造方法，包括：提供一可溶性的胶原蛋白样品；混合该胶原蛋白样品与一第一交联剂，以形成一重交联的胶原蛋白；混合该一重交联的胶原蛋白与一第二交联剂，以形成二重交联的胶原蛋白；以及混合该二重交联的胶原蛋白与一第三交联剂，以形成三重交联的胶原蛋白。其中，第一交联剂、第二交联剂、及第三交联剂分别选自由：醛类交联剂、亚胺类交联剂及环氧化物交联剂所组成的群组，且第一交联剂异于第二交联剂，第三交联剂异于第一交联剂及第二交联剂；但是，上述技术使用化学改性方法，虽然效果显著，但是存在化学试剂残留与改性过程中形成有害物质的风险, 此外，还有反应条件不温和、产生副产物、特异性差、催化效率和产率低及工过程中胶原蛋白有损失等不足。
[0006]更重要的是，上述胶原蛋白是在均相中整体交联的，或者交联成一个巨大的粒子，不是很小的微粒，更不是大小基本均匀的微粒，然而，使用时却是较小的粒子，因而，其表观疗效不一致，如疗效期一不致长。
[0007]此外，其制剂基本为凝胶剂，因其水分散体系粘度高在生产使用中造成诸多不便，如剂量分装不准，注射时通针性不好。
[0008]因此，现实中需要一种I型胶原蛋白植入剂，其有长效且效期一致长(波动小)，通针性好等优势。

技术实现思路

[0009]本专利技术的目的就是提供一种性能改善的长效且效期一致长(波动小)、通针性好的微粒Ⅰ型胶原蛋白植入剂及其制备方法。
[0010]本专利技术人发现，通过酪氨酸酶把普通Ⅰ型胶原蛋白改性成大小基本均匀的微粒交联胶原蛋白，不仅可以延长其在体内的作用时间，而且效期一致长(波动小)，还使其水分散体系的粘度下降，解决其在生产使用中造成诸多问题，如准确分装剂量，使注射时通针性较好；此外，还可以减少有害物质的混入、使反应条件温和、降低工过程中胶原蛋白的损失、提高特异性、不产生副产物、提高催化效率和提高产率等。
[0011]酪氨酸酶具有独特的双重催化功能，其能够催化一元酚氧化成邻位的二元酚，并进一步将二元酚氧化成邻苯醌。在整个催化过程中，氧分子作为电子受体，被还原为水而不是形成过氧化氢，且氧化1 mol/L 一元酚需要1 mol/L 氧分子，而氧化1 mol/L 二元酚需要0.5 mol/L 氧分子。这2 种催化过程中最终释放的产物都是醌，它是构成黑色素的前体。因此，酪氨酸酶可将蛋白质侧链中的酪氨酸氧化为醌，从而进一步与蛋白质中存在的赖氨酸、酪氨酸和半胱氨酸残基交联。
[0012]基于此，完成了本专利技术。
[0013]本专利技术涉及一种（性能改善的）长效且效期一致长(波动小)、通针性好的微粒Ⅰ型胶原蛋白植入剂，该胶原蛋白植入剂包括：使用酪氨酸酶交联的Ⅰ型胶原蛋白微粒。
[0014]本专利技术涉及一种（性能改善的）长效且效期一致长(波动小)、通针性好的微粒Ⅰ型胶原蛋白植入剂的制备方法，该方法包括：（1）、制备温度不高于4℃的包括表面活性剂及挥发性的不完全溶于水的有机溶剂的溶液，即油相；（2）、制备温度不高于4℃的包括Ⅰ型胶原蛋白和酪氨酸酶及糖醇的水溶液，即水相；（3）、上述水溶液制备完成后30分钟内把上述水溶液与上述有机溶剂的溶液混合，并使它们形成油包水型乳液，温度保持4℃至
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4℃24小时以上，较佳地48小时以内，使胶原蛋白基本交联；（4）、上述胶原蛋白基本交联后过滤上述乳液获取微粒，用10
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40%乙醇水溶液洗涤上述微粒，除去其中上述表面活性剂、上述有机溶剂、上述糖醇及上述酶等残余物；（5）、低温冷冻法除去微粒中残余溶剂。
具体实施方式
[0015]上述微粒胶原蛋白植入剂中的微粒的粒径大小，较佳地，位于5μm至25μm之间，更佳地，位于10μm至25μm之间或5μm至15μm之间。
[0016]上述糖醇包括但限于山梨糖醇、甘露糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇、乳糖醇、木糖醇，及其组合。上述糖醇用于保护Ⅰ型胶原蛋白和酪氨酸酶的活性。
[0017]较佳地，上述水性溶液，即水相中Ⅰ型胶原蛋白的质量浓度为0.1%
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10%，更佳地0.5%
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5%；较佳地，上述酪氨酸酶的用量与上述Ⅰ型胶原蛋白的用量的比例为1
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10U/g，较佳地4
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8U/g，更佳地5
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6U/g。
[0018]上述有机溶剂包括但不限于C1～C6酸与C1～C6醇形成的酯，如乙酸乙酯、乙酸甲
酯、丙酸乙酯、乙酸丁酯、戊酸戊酯、异戊酸异戊酯等；C1～C6醇与C1～C6醇形成的醚，如乙醚，甲乙醚；C3～C6酮，如丙酮。
[0019]上述表面活性剂包括但不限于亲油性表面活性剂，特别是HLB值为3～8的亲油性表面活性剂，其实例如司盘类表面活性剂，如span20 、40、60或 80，糖酯类表面活性剂，如C12～C18酸葡萄糖酯；C12～C18酸丙二醇酯；C12～C18酸丙三醇（甘油）酯；以共它们的组合。
[0020]上述亲油性表面活性剂可与其重量比0.1～5%的亲水性表面活性剂合用，如TWEEN 80。
[0021]酪氨酸酶应在油包水型乳液形成前加入水相中，不应在油包水型乳液形成前或后加入油相中，否则Ⅰ型胶原蛋白植入剂性能下降或消失。
[0022]上述油相与上述水相的体积比为2.5～10，较佳为3～6。
[0023]上述水性溶液制备完成后应在30分钟内把上述水性溶液与油性溶液混合，较佳10分钟内，最佳地5分钟内。
[0024]较佳地，过滤上述乳液获取微粒过程中，滤去粒径大于25μm及小本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种长效且效期波动小、通针性好的微粒Ⅰ型胶原蛋白植入剂的制备方法，该方法包括：（1）、制备温度不高于4℃的包括表面活性剂及挥发性的不完全溶于水的有机溶剂的溶液，即油相；（2）、制备温度不高于4℃的包括Ⅰ型胶原蛋白和酪氨酸酶及糖醇的水溶液，即水相；（3）、上述水溶液制备完成后30分钟内把上述水溶液与上述有机溶剂的溶液混合，并使它们形成油包水型乳液，温度保持4℃至
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4℃24小时以上，使胶原蛋白交联；（4）、上述胶原蛋白交联后过滤上述乳液获取微粒，滤去粒径大于25μm及小于0.5μm的微粒，保留粒径位于0.5μm与25μm间的微粒，用10
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40%乙醇水溶液洗涤上述微粒，除去其中上述表面活性剂、上述有机溶剂、上述糖醇及上述酶等残余物；（5）、低温冷冻法除去微粒中残余溶剂。2.根据权利要求1的制备方法，其特征在于所述糖醇选自山梨糖醇、甘露糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇、乳糖醇、木糖醇，及其组合。3.根据权利要求1的制备方法，其特征在于所述水性溶液中Ⅰ型胶原蛋白的质量浓度为0.1%
‑
10%。...

【专利技术属性】
技术研发人员：付劼，周文虎，韩淑萍，陈文洁，李贤明，
申请(专利权)人：江苏东方妍美生物技术发展有限公司，
类型：发明
国别省市：