IDH2乙酰化修饰及应用制造技术

本发明专利技术公开IDH2乙酰化修饰及应用，IDH2在第280位点赖氨酸残基(K280)发生乙酰化修饰，作为肺癌发生发展的标志物和靶点的应用，本发明专利技术提供的IDH2乙酰化修饰影响IDH2稳定性和活性，乙酰化的IDH2促进肺癌细胞生长和迁移，为临床在分子水平上诊断非小细胞肺癌提供了新的诊断方法，同时为非小细胞肺癌的治疗提供了新的药物靶点。新的药物靶点。

【技术实现步骤摘要】
IDH2乙酰化修饰及应用


[0001]本专利技术涉及生物医学
具体地说是IDH2乙酰化修饰及应用。

技术介绍

[0002]IDH2可催化异柠檬酸脱羧生产CO2和α
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酮戊二酸(α
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KG)，同时将NADP还原为NADPH，涉及细胞多种代谢过程，包括谷氨酰胺代谢、脂肪生成、线粒体氧化磷酸化等，IDH2不仅可催化异柠檬酸生成α
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KG，NADPH和CO2，还可以逆向催化NADPH、α
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KG和CO2生成异柠檬酸。癌细胞主要以谷氨酰胺分解代谢产生α
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KG和NADPH供应细胞生长，也为IDH2催化合成异柠檬酸提供原料，因此IDH2催化的逆向生成异柠檬酸反应可维持和平衡三羧酸循环，在为癌细胞生长供应脂质、核酸、蛋白质等大分子前体物质及细胞能量调节中扮演着重要角色；IDH2高表达有助于癌细胞的生存并可作为治疗癌的靶点，现有研究表明IDH2表达增加，有助于肺癌细胞增殖和转移，IDH2在肺癌的突变率很低，只有0.69％，可见IDH2突变可能不是肺腺癌发生发展的主要因素，IDH2翻译后修饰可能是影响IDH2在肺腺癌中功能调节的重要方式。
[0003]中国专利了CN201610389698X一种肺癌血清标志物及其应用中公开了标志物为IDH2，其主要通过查询kmplot数据库中IDH2表达与生存期数据，采用cox函数分析生存期数据，绘制IDH2表达与Kaplan
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Meier生存期曲线，并进行统计学分析，结果表明该标志物可用于制备诊断肺癌的药物、治疗肺癌的药物、诊断肺癌的试剂盒以及肺癌诊断芯片，但并未公开IDH是否被乙酰化，也未公开乙酰化修饰是否具有增强非小细胞肺癌发生和发展进展的风险及非小细胞肺癌转移的几率预示，申请人用分析非吸烟女性肺腺癌标本发现肺腺癌标本中异柠檬酸脱氢酶2即IDH2于K280位点乙酰化修饰显著增加，这提示了IDH2可能通过乙酰化修饰在肺腺癌的发生发展中起作用，用制备的K280位点乙酰化IDH2抗体检测显示，肺腺癌的IDH2的K280位点乙酰化水平增加，并与肺腺癌预后相关。

技术实现思路

[0004]为此，本专利技术所要解决的技术问题在于提供一种IDH2乙酰化修饰及应用，IDH2在第280位点赖氨酸残基(K280)发生乙酰化修饰，该位点乙酰化影响IDH2稳定性和活性，乙酰化的IDH2促进肺癌细胞生长和迁移，为临床在分子水平上诊断非小细胞肺癌提供了新的诊断方法，同时为非小细胞肺癌的治疗提供了新的药物靶点。
[0005]为解决上述技术问题，本专利技术提供如下技术方案：
[0006]IDH2乙酰化修饰，所述IDH2在第280位点赖氨酸残基发生乙酰化。
[0007]IDH2在第280位点赖氨酸残基发生乙酰化修饰作为肺癌发生发展的标志物和靶点的应用。
[0008]更进一步的，所述的肺癌为肺腺癌和/或非小细胞肺癌。
[0009]IDH2在第280位点赖氨酸残基发生乙酰化修饰在非小细胞肺癌药物靶点中的应用。
[0010]IDH2在第280位点赖氨酸残基发生乙酰化修饰在制备具有下述(1)
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(4)中至少一种功能的产品中的应用：
[0011](1)促进肺癌细胞生长和迁移；(2)预判非小细胞肺癌发生和发展进展的风险；(3)增加预示非小细胞肺癌转移的几率，预后不良；(4)提供治疗非小细胞肺癌的药物靶点。
[0012]一种产品，所述产品的活性成分包括有在第280位点赖氨酸残基发生乙酰化的IDH2乙酰化修饰，所述产品具有下述(1)
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(4)中至少一种功能：
[0013](1)促进肺癌细胞生长和迁移；(2)预判非小细胞肺癌发生和发展进展的风险；(3)增加预示非小细胞肺癌转移的几率，预后不良；(4)提供治疗非小细胞肺癌的药物靶点。
[0014]本专利技术的技术方案取得了如下有益的技术效果：
[0015]IDH2在第280位点赖氨酸残基发生乙酰化修饰与非小细胞肺癌的发生发展密切相关，IDH2在第280位点赖氨酸残基发生乙酰化可预判非小细胞肺癌发生和发展进展的风险，预示非小细胞肺癌转移的几率增加，预后不良，用作为治疗非小细胞肺癌的靶点，并进一步推广应用到其他肿瘤细胞的防治和预后，为临床在分子水平上诊断非小细胞肺癌提供了新的诊断方法，同时为非小细胞肺癌的治疗提供了新的药物靶点。
附图说明
[0016]图1是本专利技术癌组织和癌旁组织中IDH2乙酰化的差异分析表达示意图；
[0017]图2是本专利技术肺癌组织和癌旁组织的IDH2乙酰化表达示意图；
[0018]图3是本专利技术IDH2乙酰化分析表达和临床病理特征之间的相关性示意图；
[0019]图4是本专利技术IDH2乙酰化水平和患者预后的相关性分析示意图。
具体实施方式
[0020]实施例1
[0021]鉴于IDH2乙酰化修饰尚未有公开，本专利技术提供一种细胞内IDH2修饰的新方式，即IDH2在第280位点赖氨酸残基K280发生乙酰化，IDH2由452个氨基酸残基组成，用免疫共沉淀技术结合LC
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MS/MS技术分析发现IDH2在第280位点赖氨酸残基(K280)发生乙酰化，该位点乙酰化影响IDH2稳定性和活性，乙酰化的IDH2促进肺癌细胞生长和迁移，该位点乙酰化水平增加可作为肺癌发生发展的标志物和靶点。
[0022]癌组织高表达于癌旁组织，蛋白表达水平与N分期，TNM分期呈正相关，高表达提示肺腺癌预后不良，因此IDH2在第280位点赖氨酸残基(K280)发生乙酰化可预判非小细胞肺癌发生和发展进展的风险，IDH2在第280位点赖氨酸残基(K280)发生乙酰化增加预示非小细胞肺癌转移的几率增加，预后不良，在此基础上，IDH2在第280位点赖氨酸残基(K280)乙酰化还可以用作为治疗非小细胞肺癌的靶点，并进一步推广应用到其他肿瘤细胞的防治和预后，本申请为临床在分子水平上诊断非小细胞肺癌提供了新的诊断方法，同时为非小细胞肺癌的治疗提供了新的药物靶点。
[0023]实施例2
[0024]下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到，以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。
[0025]一、用免疫共沉淀技术结合LC
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MS/MS技术检测与IDH2在第280位点赖氨酸残基
(K280)乙酰化的相互作用蛋白，检测过程如下：
[0026]S1、收集处于对数生长期的细胞，细胞采用非吸烟女性肺腺癌标本的细胞，为群体细胞，细胞周期是动态的，以20
×
105个/孔接种于10cm的培养皿中，待细胞贴壁后弃去培养基，PBS缓冲液冲洗三遍后，收集细胞，提取总蛋白，整个过程均在冰上操作；
[0027]S2、取900μL混合蛋白酶抑制剂配制的NP
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40细胞裂解液，加入100L苯甲基磺酰氟，1μLβ
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.IDH2乙酰化修饰，其特征在于，所述IDH2在第280位点赖氨酸残基发生乙酰化。2.如权利要求1所述的IDH2乙酰化修饰作为肺癌发生发展的标志物和靶点的应用。3.根据权利要求2所述的IDH2乙酰化修饰作为肺癌发生发展的标志物和靶点的应用，其特征在于，所述的肺癌为肺腺癌和/或非小细胞肺癌。4.如权利要求1所述的IDH2乙酰化修饰在非小细胞肺癌药物靶点中的应用。5.如权利要求1所述的IDH2乙酰化修饰在制备具有下述(1)
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(4)中至少一种功能的产品中的应用：(1)促进肺...

【专利技术属性】
技术研发人员：伍俊，张海涛，
申请(专利权)人：广东医科大学，
类型：发明
国别省市：