【技术实现步骤摘要】
非动物源性重组酶消化Vero细胞的应用
[0001]本专利技术涉及生物
,具体涉及非动物源性重组酶消化Vero细胞的应用。
技术介绍
[0002]胰蛋白酶属于丝氨酸蛋白酶类,能特异性地作用于肽链Lys或Arg残基的羧基端。在生理上参与了动物体内的新陈代谢、消化、凝血等功能的重要过程。在细胞生物学领域,胰蛋白酶能使细胞膜与培养皿结合处蛋白降解,使得两者分离。并且由于细胞自身内部细胞骨架的张力以及培养液表面张力的作用下成为球形,从而实现细胞的消化。
[0003]当前使用最广泛的胰酶原料主要来自牛或猪的胰脏,其主要是由动物胰脏浸出液提纯冻干后制备而成,有冻干粉和液体两个形式。未改造的胰蛋白酶一般通过冻干的形式储存,复溶后使用,这样保证了酶的活性,使用中,Ca
2+
有保护和激活作用。为了满足液体制剂的需求,胰蛋白酶通常也会经过特殊处理消除乳糜蛋白酶活性和甲基化或者突变以防止自切。
[0004]尽管胰酶制备要经过适当的纯化工艺,但由于动物本身可能携带多种病毒(如疯牛病病毒、朊病毒、猪瘟病毒等), ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.0.028% Sheffield
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rTrypsin ACF溶液和/或TrypLE
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)在消化细胞的应用。2.消化细胞的方法,其特征在于,包括:取细胞采用0.028% Sheffield
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rTrypsin ACF溶液和/或TrypLE
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)消化。3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述消化的时间为5~8分钟。4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述0.028% Sheffield
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rTrypsin ACF溶液消化的时间为6~8分钟;所述TrypLE
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Select(1
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)消化的时间为5~8分钟。5.如权利要求4所述方法,其特征在于,所述0.028% Sheffield
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rTrypsin A...
【专利技术属性】
技术研发人员:王晓丽,徐秀芝,刘利国,李研宇,何伟,李玥,
申请(专利权)人:长春卓谊生物股份有限公司,
类型:发明
国别省市:
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