一种体内细胞捕获线和捕获器制造技术

本发明专利技术医疗器械领域，具体涉及一种体内细胞捕获线和捕获器。该体内细胞捕获线，包括蛋白丝线，修饰在所述蛋白丝线表面的类小肽支架，接枝在所述类小肽支架顶端的氨基上的多羧基大分子，以及固载在所述多羧基大分子上的若干细胞捕获配体；所述类小肽支架是由类氨基酸修饰在所述蛋白丝线表面构建而成的支架结构，所述类氨基酸由有机二酸和有机二胺缩合形成。本发明专利技术捕获器通过类小肽支架的构建，既实现了捕获丝结构的良好稳定性，又实现了肿瘤细胞捕获效率的显著提升。获效率的显著提升。获效率的显著提升。

【技术实现步骤摘要】
一种体内细胞捕获线和捕获器


[0001]本专利技术医疗器械领域，具体涉及一种体内细胞捕获线和捕获器。

技术介绍

[0002]丝素纤维作为高分子天然蛋白材料，具有良好的生物相容性和承载力，是最为理想的生物材料之一。丝素纤维直径约为10μm，与循环肿瘤细胞(CTC)直径10
‑
50μm相当，甚至还小于一些CTC。CTC捕获是通过固载在载体丝上的捕获配体(如核酸适体APT、抗体)与CTC表面受体形成“配体
‑
受体”复合物而实现的。相对于配体或者受体这类分子的尺度，丝素纤维直径(约10μm)仍然是极其大的，对“配体
‑
受体”复合物的形成仍然具有较大的空间位阻，通常需要在载体丝上接枝大分子(如聚丙烯酸PAA、肝素HPR、透明质酸等多羧基大分子)作为间臂Spacer来降低空间位阻。众所周知，丝素纤维的活性基团和接枝大分子的活性基团之间的连接，因大分子较大的分子量和纤维极大的直径而造成的较大空间位阻，大分子的接枝效率也就极低。为了提高大分子的接枝效率，必须降低来自于纤维的空间位阻。
[0003]申请号为CN201810321288.0的专利技术专利公开了一种以功能化蛋白丝线为载体的体内细胞捕获器，该功能化蛋白丝线包括蛋白丝线以及与蛋白丝线表面固定连接的功能物质，并具体公开了分别用二缩水甘油醚(包括聚乙二醇二缩水甘油醚或1,4
‑
丁二醇二缩水甘油醚)和聚丙烯酸(PAA)，或者分别用二缩水甘油醚(包括聚乙二醇二缩水甘油醚或1,4
‑
丁二醇二缩水甘油醚)、多胺化合物(乙二胺、丙二胺、丁二胺或PEI)和PAA在60℃的水浴中反应6小时。之后，用蒸馏水清洗多次，得到表面功能化的蛋白丝。第二种方式中，二缩水甘油醚与多胺化合物发生缩合反应，在纤维表面也就构建了α
‑
羟基胺缩合物支架，再在支架上接枝大分子PAA，最后在PAA上固载CTC的捕获配体，从而实现CTC捕获。利用此α
‑
羟基胺缩合物支架构建的体内细胞捕获线存在2方面的缺陷：第一，在纤维表面首先接枝二缩水甘油醚时，其中一端的环氧基既可以接枝到纤维表面的氨基残基上，又可以接枝到羧基残基上，前者形成α
‑
羟基胺，后者形成α
‑
羟基酯，即α
‑
羟基胺缩合物支架分别以C
‑
N键、和酯键固载到纤维表面。众所周知，酯键容易水解，因此，支架结构也就不很稳定，自然也就导致了体内细胞捕获线的结构不很稳定。第二，α
‑
羟基胺缩合物支架仅仅由1个α
‑
羟基胺缩合物构成，支架高度较低，这就导致了基于支架去降低空间位阻的能力非常有限，从而导致了CTC捕获效率的提升率被限制。

技术实现思路

[0004]本专利技术旨在解决现有技术中α
‑
羟基胺缩合物支架结构不稳定，捕获效率的提升率被限制，从而导致了体内细胞捕获线的结构不很稳定、以及CTC捕获效率的提升率被限制的问题，提供了一种体内细胞捕获线和捕获器，在蛋白丝线的表面构建类小肽支架结构，可以根据需要在丝素纤维表面构建不同高度的支架，这种支架既有良好的稳定性，又有捕获效率的显著提升。
[0005]按照本专利技术的技术方案，所述体内细胞捕获线，其特征在于，包括蛋白丝线，修饰
在所述蛋白丝线表面的类小肽支架，接枝在所述类小肽支架顶端的氨基上的多羧基大分子，以及固载在所述多羧基大分子上的若干细胞捕获配体；所述类小肽支架是由若干类氨基酸依次修饰在所述蛋白丝线表面构建而成的支架结构，所述类氨基酸由有机二酸和有机二胺缩合形成。
[0006]进一步的，所述蛋白丝线来源于桑蚕丝、柞蚕丝或蜘蛛丝。
[0007]进一步的，所述类小肽支架由1
‑
5个类氨基酸依次修饰在所述蛋白丝线表面构建而成，优选为2
‑
5个，进一步优选为2
‑
3个。
[0008]进一步的，所述有机二酸选自乙二酸、丙二酸、丁二酸、戊二酸及其同分异构体、己二酸及其同分异构体、庚二酸及其同分异构体中的一种或多种；所述有机二胺选自乙二胺、1,3
‑
丙二胺及其同分异构体、1,4
‑
丁二胺及其同分异构体、1,5
‑
戊二胺及其同分异构体中的一种或多种。
[0009]进一步的，所述类氨基酸在依次修饰到蛋白丝线表面时，有机二酸和有机二胺的修饰顺序不限。具体来说，类氨基酸在依次修饰到蛋白丝线表面时，可以先有机二酸后有机二胺、或者先有机二胺后有机二酸，即类氨基酸利用有机二酸或有机二胺修饰在所述蛋白丝线表面。
[0010]具体的，修饰1个类氨基酸形成类单肽支架，修饰2个类氨基酸形成类二肽支架，修饰3个类氨基酸形成类三肽支架，以此类推。
[0011]进一步的，所述类小肽支架顶端的氨基为顶端类氨基酸自身的氨基、或修饰在顶端类氨基酸的羧基上的有机二胺的氨基。
[0012]进一步的，所述类小肽支架的修饰在水相或非水相中进行。
[0013]进一步的，非水相中时，有机二酸和有机二胺的修饰均在羧基活化剂的作用下进行，所述羧基活化剂为N,N
‑
二异丙基碳二亚胺(DIC)或二环己基碳二亚胺等。
[0014]进一步的，水相中时，有机二酸和有机二胺的修饰均在羧基活化剂和活化稳定剂的作用下进行，所述羧基活化剂为1
‑
(3
‑
二甲基氨基丙基)
‑3‑
乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC
·
HCl)、1
‑
(3
‑
二甲基氨丙基)
‑3‑
乙基碳二亚胺甲碘盐、1
‑
(3
‑
二甲基氨基丙基)
‑3‑
乙基碳二亚胺(EDC)等，所述活化稳定剂为N
‑
羟基丁二酰亚胺(NHS)或N
‑
羟基硫代琥珀酰亚胺等。
[0015]具体的，以乙二酸(DA)和乙二胺(ED)为例，构建类单肽，乙二酸的用量为7
‑
35mg/80根
×
2cm长的蛋白丝线，优选为28
‑
35mg/80根
×
2cm长的蛋白丝线；乙二胺的用量为35
‑
175μL/80根
×
2cm长的蛋白丝线，优选为140
‑
175μL/80根
×
2cm长的蛋白丝线；
[0016]构建类小肽支架中第二及以上类氨基酸时，乙二酸的用量为14
‑
42mg/80根
×
2cm长的蛋白丝线，优选为14
‑
35mg/80根
×
2cm长的蛋白丝线；乙二胺的用量为35
‑
175μL/80根
×
2cm长的蛋白丝线，优选为140
‑
175μL/80根...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种体内细胞捕获线，其特征在于，包括蛋白丝线，修饰在所述蛋白丝线表面的类小肽支架，接枝在所述类小肽支架顶端的氨基上的多羧基大分子，以及固载在所述多羧基大分子上的若干细胞捕获配体；所述类小肽支架是由若干类氨基酸依次修饰在所述蛋白丝线表面构建而成的支架结构，所述类氨基酸由有机二酸和有机二胺缩合形成。2.如权利要求1所述的体内细胞捕获线，其特征在于，所述蛋白丝线来源于桑蚕丝、柞蚕丝或蜘蛛丝。3.如权利要求1所述的体内细胞捕获线，其特征在于，所述类小肽支架由1
‑
5个类氨基酸依次修饰在所述蛋白丝线表面构建而成。4.如权利要求1或3所述的体内细胞捕获线，其特征在于，所述有机二酸选自乙二酸、丙二酸、丁二酸、戊二酸及其同分异构体、己二酸及其同分异构体、庚二酸及其同分异构体中的一种或多种；所述有机二胺选自乙二胺、1,3
‑
丙二胺及其同分异构体、1,4
‑
丁二胺及其...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢洪平，
申请(专利权)人：苏州大学，
类型：发明
国别省市：