丹参药材的质量双标可视化质量控制技术制造技术

本发明专利技术公开了一种丹参药材的质

【技术实现步骤摘要】
丹参药材的质量双标可视化质量控制技术


[0001]本专利技术属于中药质量控制
，具体涉及以丹参对照药材为基准物质，建立一套不依赖于对照品，较为全面控制药材质量的方法，该方法稳定性、精密度良好，可以弥补目前丹参药材质量控制的不足，能够为丹参药材质量提升提供新思路。

技术介绍

[0002]丹参为唇形科鼠尾草属植物丹参的干燥根及根茎 （Salvia miltiorrhizaBge.）。丹参药材广泛分布于华北、华东、中南和西北诸省，各地气候条件及生长环境不同，导致各地丹参药材在质量上存在着很大差异。
[0003]随着现代中药分析手段的进步，丹参药材质量控制方法主要包括单指标含量测定法、多指标含量测定法和指纹图谱与含量测定结合法，以上方法具有灵敏度高、重复性好的优点，能够为控制丹参药材提供量化数据，但存在着单一指标不能反映药材整体特征、多指标含量测定依赖于多种对照品且某些指标成分不能反映药效、指纹图谱只能模糊地评价药材相似性不能清晰地判断供试品真伪优劣的不足。

技术实现思路

[0004]针对上述问题，本专利技术提供一种丹参药材质
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量双标控制方法。以丹参对照药材为定性、定量的基准物质，采用高效液相色谱结合Q
‑
TOF
‑
MS技术，建立一套不依赖于对照品，较为全面科学地控制药材质量的方法。
[0005]为了实现上述目的，本专利技术提供了如下技术方案。
[0006]本专利技术提供了一种丹参药材质量控制标准的建立方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：步骤1 基于对照药材的丹参药材定性研究；步骤2 基于内标物质的特征峰化学成分相对定量研究；步骤3 方法学考察。
[0007]进一步地，所述步骤1的具体步骤包括：（1）溶液的制备：取丹参对照药材及供试药材粉末，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50倍量的80%甲醇，称定重量，加热回流1 h，放冷，补足失重，摇匀，滤过；续滤液挥干，80%甲醇定容，摇匀，过0.22 μm滤膜，即得；（2）色谱条件与系统适用性试验：采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的Agilent EC
‑
C18色谱柱，色谱柱规格为3.0
×
100 mm，2.7
‑
Micron；以0.1%甲酸水为流动相A，以乙腈为流动相B，进行梯度洗脱；流速1.0 mL/min；柱温30℃；DAD检测器在波长280 nm下进行检测；进样量5 μL；（3）特征图谱的建立：每份样品平行2次，按色谱条件依次进样检测，将280 nm波长下的图谱数据由分析检测仪器中导出获得10批供试药材的HPLC叠加图谱；10批供试药材使用中位数进行自动匹配，加以多点校正，生成共有模式R，与对照药材特征图谱进行比对；
（4）相似度评价：以特征峰的相似度明确丹参药材真伪。供试药材与对照药材的相似度均大于0.96；（5）特征峰化学成分解析：采用Q
‑
TOF
‑
MS技术，通过分析化合物的保留时间、一级离子质荷比以及二级离子碎片信息，并与相关文献报道信息进行匹配，共鉴定出6个化学成分；（6）中药材（饮片）可视化的质
‑
量双标质量控制方法程序：利用Visual Basic编程语言设计包含1个OEL控件和4个Command控件的适用于丹参药材（饮片）可视化的质
‑
量双标质量控制程序。
[0008]更进一步地，所述（5）中鉴定出6个化学成分分别为：（5）号峰为迷迭香酸、（6）号峰为紫草酸、（7）号峰为丹酚酸B、（16）号峰为隐丹参酮、（17）号峰为丹参酮I和（18）号峰为丹参酮IIA。
[0009]进一步地，所述步骤2的具体步骤包括：以步骤1中确定的（7）号峰丹酚酸B作为内标物质，通过内标物质化学成分准确定量，计算供试药材特征峰化学成分的相对含量；取“中位数
‑
标准差”作为特征峰化学成分相对于内标物质化学成分的相对含量下限。
[0010]进一步地，所述步骤2的特征峰均为丹参发挥其功效及药理作用的特征活性化学成分。
[0011]进一步地，所述步骤3的具体步骤包括：（1）精密度实验：精密吸取同一供试品溶液，按色谱条件测定，连续进样6次，测定各色谱峰相对保留时间、相对峰面积，计算相对标准偏差；各色谱峰相对保留时间、相对峰面积RSD值均小于1.0%，表明仪器精密度良好；（2）稳定性试验：精密吸取同一供试品溶液，按色谱条件，分别在0、2、4、8、12、24 h进样6次检测，测定各色谱峰相对保留时间、相对峰面积，计算相对标准偏差；各色谱峰相对保留时间、相对峰面积RSD值均小于2.3 %，表明供试品溶液在24 h内稳定；（3）重复性实验：按供试品溶液制备方法制备6份供试样品，按色谱条件，分别进样检测，测定各色谱峰相对保留时间、相对峰面积，计算相对标准偏差；各色谱峰相对保留时间、相对峰面积RSD值均小于1.7 %，表明方法重复性良好；（4）线性关系考察：配制“丹酚酸B”的6个质量浓度溶液，按色谱条件，分别进样检测，以质量（X）为横坐标，峰面积（Y）为纵坐标，绘制标准曲线并进行线性回归，得到线性回归方程（Y=1220.5X
‑
33.17）、相关系数（r=0.999 8）。结果表明“丹酚酸B”在0.500~3.400mg
·
mL
‑1范围内与峰面积呈良好的线性关系。
[0012]进一步地，所述方法通过丹参药材特征图谱中的特征峰作为丹参药材的定性标准，能够明确鉴定药材的真伪。
[0013]进一步地，所述方法通过建立的特征峰相对含量的计算方法确定的各特征峰相对含量的下限，能够区分丹参的优劣。
[0014]进一步地，所述方法通过Visual Basic编程语言设计的可视化的质
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量双标质量控制程序适用于丹参药材（饮片）。
[0015]与现有技术相比本专利技术的有益效果。
[0016]（1）本专利技术首次公开丹参药材质
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量双标控制方法，可以弥补目前丹参药材质量控
制方法中单一指标不能反映药材整体特征、多指标含量测定依赖于多种对照品且某些指标成分不能反映药效、指纹图谱只能模糊地评价药材相似性不能清晰地判断供试品真伪优劣的不足。
[0017]（2）本专利技术利用现代分析检测技术指认出的特征峰化学成分。其中丹参酮I可发挥抗炎活性；丹参酮ⅡA可以抑制甲状腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭，以及诱导细胞凋亡；隐丹参酮能够发挥抗脑胶质瘤作用；丹酚酚B可抑制胸主动脉瘤的发生发展，并改善免疫功能、炎性反应及氧化应激状态。
[0018]上述化学成分均为丹参发挥其“通经止痛，清心除烦，凉血消痈”之功效。抗癌药理作用的活性化学成分，能全面科学地反映中药丹参的内在质量。
附图说明
[0019]图1是丹参对照药材及10批丹参供试药材的特征图谱。
[0020]图2是丹参特征图谱共有模式。
[0021]图3是毫州丹参样品质
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种丹参药材质量控制标准的建立方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：步骤1 基于对照药材的丹参药材定性研究；步骤2 基于内标物质的特征峰化学成分相对定量研究；步骤3 方法学考察。2.根据权利要求1所述的一种丹参药材质量控制标准的建立方法，其特征在于，所述步骤1的具体步骤包括：（1）溶液的制备：取丹参对照药材及供试药材粉末，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50倍量的80%甲醇，称定重量，加热回流1 h，放冷，补足失重，摇匀，滤过；续滤液挥干，80%甲醇定容，摇匀，过0.22 μm滤膜，即得；（2）色谱条件与系统适用性试验：采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的Agilent EC
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C18色谱柱，色谱柱规格为3.0
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100 mm，2.7
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Micron；以0.1%甲酸水为流动相A，以乙腈为流动相B，进行梯度洗脱；流速1.0 mL/min；柱温30℃；DAD检测器在波长280 nm下进行检测；进样量5 μL；（3）特征图谱的建立：每份样品平行2次，按色谱条件依次进样检测，将280 nm波长下的图谱数据由分析检测仪器中导出获得10批供试药材的HPLC叠加图谱；10批供试药材使用中位数进行自动匹配，加以多点校正，生成共有模式R，与对照药材特征图谱进行比对；（4）相似度评价：以特征峰的相似度明确丹参药材真伪；供试药材与对照药材的相似度均大于0.96；（5）特征峰化学成分解析：采用Q
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TOF
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MS技术，通过分析化合物的保留时间、一级离子质荷比以及二级离子碎片信息，并与相关文献报道信息进行匹配，共鉴定出6个化学成分；（6）中药材（饮片）可视化的质
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量双标质量控制方法程序：利用Visual Basic编程语言设计包含1个OEL控件和4个Command控件的适用于丹参药材（饮片）可视化的质
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量双标质量控制程序。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述（5）中鉴定出6个化学成分分别为：（5）号峰为迷迭香酸、（6）号峰为紫草酸、（7）号峰为丹酚酸B、（16）号峰为隐丹参酮、（17）号峰为丹参酮I和（18）号峰为丹参酮IIA。4.根据权利要1所述的一种丹参药材质量控制标准的建立方法，其特征在于，所述步骤2的具体步骤包括：以步骤1中确定的...

【专利技术属性】
技术研发人员：孟宪生，丁昕瑶，赵琳，包永睿，王帅，李天娇，孟莹，郑莹，
申请(专利权)人：辽宁中医药大学，
类型：发明
国别省市：