一种桑枝的质量控制方法技术

本申请涉及药物含量测定技术领域，特别涉及一种桑枝的质量控制方法，其包括以下步骤：S1.对照品溶液的制备；S2.供试品溶液的制备；S3.测定：分别精密吸取所述对照品溶液与所述供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪进行测定；步骤S3中的色谱条件包括：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以流动相A为乙腈，流动相C为0.9％～1.1％的冰醋酸溶液进行梯度洗脱，流速为1ml/min，柱温为25℃。精密测定桑枝饮片的质量标准，为临床用药提供指导，为制定桑枝中桑皮苷A、氧化白藜芦醇的含量标准提供依据，该测定方法准确、简便、重复性好；优化供试品制备方法，提取效率高，能够通过具体指标控制桑枝中有效成分的含量。有效成分的含量。有效成分的含量。

【技术实现步骤摘要】
一种桑枝的质量控制方法


[0001]本申请涉及药物含量测定
，特别涉及一种桑枝的质量控制方法。

技术介绍

[0002]桑枝，为桑树的枝叶、桑条、嫩桑枝的总称。2020年版药典记载其为桑(Morus alba L.)的干燥嫩枝，具有祛风湿，利关节的功效，用于治疗风湿痹病，肩臂、关节酸痛麻木。我国作为桑分布最多的国家，自古就有栽桑养蚕的说法，桑枝具有很高的药用价值、食用价值和化学工业价值。现代药理学研究表明，桑枝具有多种生物活性成分，包括黄酮类、生物碱类、芪类等，具有抗炎、降血糖、降血脂等多种生物活性。
[0003]芪类物质属于多酚类次生代谢物，氧化白藜芦醇又称氧化芪三酚，是二苯乙烯衍生物的芪类物质，研究表明，氧化白藜芦醇是一种络氨酸酶抑制剂，抑制黑色素的生成，还具有抗炎、抗氧化、抗病毒、抗糖尿病、神经保护等作用，此外该化合物易溶于水，具有低毒性，适用于药物开发，成为近年来的研究热点。桑皮苷A又称氧化白藜芦醇苷，是氧化白藜芦醇的成苷化合物，现代药理研究表明桑皮苷A具有治疗酒精肝、抗炎、镇痛、止咳等功效。
[0004]已有文献分别报道过关于桑皮苷A和氧化白藜芦醇的含量测定，也有文献报道关于桑不同部位中芪类成分的含量测定，但没有研究不同产地桑枝中桑皮苷A和氧化白藜芦醇的含量测定，也没有关于桑枝中桑皮苷A和氧化白藜芦醇薄层鉴别的研究。

技术实现思路

[0005]本申请的主要目的是提供一种桑枝的质量控制方法，旨在解决现有技术中未有关于不同产地桑枝中桑皮苷A和氧化白藜芦醇的含量测定，也没有关于桑枝中桑皮苷A和氧化白藜芦醇薄层鉴别的研究的技术问题。
[0006]S1.对照品溶液的制备；
[0007]S2.供试品溶液的制备；
[0008]S3.测定：分别精密吸取所述对照品溶液与所述供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪进行测定；
[0009]其中，步骤S3中的色谱条件包括：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以流动相A为乙腈，流动相C为0.9％～1.1％的冰醋酸溶液进行梯度洗脱，流速为0.9～1.1ml/min，柱温为24℃
‑
26℃。
[0010]优选地，所述步骤S3中，高效液相色谱条件还包括：色谱柱为XBridege C18色谱柱，4.6
×
250mm，5μm，桑皮苷A和氧化白藜芦醇的检测波长为320
‑
330nm，理论塔板数不低于3000。
[0011]优选地，所述步骤S3中，梯度洗脱条件为：0
‑
10min：流动相A 8％，流动相C 92％；10
‑
15min：流动相A 8～18％，流动相C 92～82％，15min～25min:流动相A 18％，流动相C 82％；
[0012]或，梯度洗脱条件为：0
‑
10min：流动相A 9％，流动相C 91％；10
‑
15min：流动相A 9
～19％，流动相C 91～81％，15min～25min:流动相A 19％，流动相C 81％；
[0013]或，梯度洗脱条件为：0
‑
10min：流动相A 10％，流动相C 90％；10
‑
15min：流动相A 10～20％，流动相C 90～80％，15min～25min:流动相A 20％，流动相C 80％。
[0014]优选地，所述步骤S1中，精密称取桑皮苷A，加入40％甲醇溶液制成每ml含桑皮苷A 138.8μg；精密称取氧化白藜芦醇，加入80％乙醇溶液制成每ml含氧化白藜芦醇189.1μg。
[0015]优选地，所述步骤S2包括如下步骤：S21.精密称定桑枝粉末0.2g，加入40％甲醇15ml，称定重量后超声处理，再称定重量，补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液，作为供试品；
[0016]S22.精密称定桑枝粉末0.2g，加入80％乙醇25ml，称定重量后超声处理，再称定重量，补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液，作为供试品溶液。
[0017]优选地，所述步骤S21中的超声处理的时间为20min；所述步骤S22中的超声处理的时间为30min。
[0018]优选地，以所述对照品溶液进样量为横坐标，以桑皮苷A峰面积值和氧化白藜芦醇峰面积值分别为纵坐标，得到桑皮苷A浓度标准曲线的回归方程Y＝24400X
‑
3960(r＝0.9999)，氧化白藜芦醇浓度标准曲线的回归方程Y＝49400X
‑
2250(r＝0.9999)。
[0019]优选地，所述步骤S3之后，还包括步骤S4：
[0020]供试品溶液的制备：精密称定桑枝粉末，加入80％乙醇25ml，超声30min，摇匀，静置，取上清液过滤，得供试品备用；
[0021]对照品溶液制备：精密称取桑皮苷A，加入甲醇溶液制成每ml含桑皮苷A 47.47μg、氧化白藜芦醇50.20μg的混合溶液；
[0022]测定：吸取供试品溶液8μl，对照品溶液4μl分别点于聚酰胺薄膜上，以乙酸乙酯：甲醇：冰醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，置于紫外灯下，在365nm的波长下检视；供试品色谱中，在与对照品药材色谱相应的位置上，显相同的颜色斑点。
[0023]优选地，乙酸乙酯、甲醇、冰醋酸的体积比为10：10：1。
[0024]优选地，精密称定桑枝粉末前，先将桑枝粉末过四号筛。
[0025]本申请的桑枝的质量控制方法具有如下有益效果：采用高效液相色谱法测定桑枝饮片中桑皮苷A和氧化白藜芦醇含量，通过薄层色谱法对桑枝中桑皮苷A和氧化白藜芦醇进行薄层鉴别，该薄层色谱法分离度好，斑点清晰。通过对供试品制备方法进行优选，精密测定桑枝饮片的质量标准，为临床用药提供指导，为制定桑枝中桑皮苷A、氧化白藜芦醇的含量标准提供依据，该测定方法准确、简便、重复性好；优化供试品制备方法，提取效率高，能够通过具体指标控制桑枝中有效成分的含量。
附图说明
[0026]为了更清楚地说明本申请实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅为本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
[0027]图1为本申请提供的对照品
‑
桑皮苷A和氧化白藜芦醇的化学结构式；
[0028]图2为本申请提供的桑皮苷A和氧化白藜芦醇对照品色谱图；
[0029]图3为本申请提供的桑皮苷A和氧化白藜芦醇供试品色谱图；
[0030]图4为本申请提供的桑皮苷A采用甲醇作为提取溶剂时的色谱图；
[0031]图5为本申请提供的桑皮苷A采用乙醇作为提取溶剂时的色谱图；
[0032]图6为本申请提供的桑皮苷A在不同提取时间下的色谱图；
[0033]图7为本申请提供的桑皮苷A采用40％甲醇提取时不同加入量的色本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种桑枝的质量控制方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.对照品溶液的制备；S2.供试品溶液的制备；S3.测定：分别精密吸取所述对照品溶液与所述供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪进行测定；其中，步骤S3中的色谱条件包括：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以流动相A为乙腈，流动相C为0.9％～1.1％的冰醋酸溶液进行梯度洗脱，流速为0.9～1.1ml/min，柱温为24℃
‑
26℃。2.如权利要求1所述的一种桑枝的质量控制方法，其特征在于，所述步骤S3中，高效液相色谱条件还包括：色谱柱为XBridege C18色谱柱，4.6
×
250mm，5μm，桑皮苷A和氧化白藜芦醇的检测波长为320
‑
330nm，理论塔板数不低于3000。3.如权利要求1所述的一种桑枝的质量控制方法，其特征在于，所述步骤S3中，梯度洗脱条件为：0
‑
10min：流动相A 8％，流动相C 92％；10
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15min：流动相A 8～18％，流动相C 92～82％，15min～25min:流动相A18％，流动相C 82％；或，梯度洗脱条件为：0
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10min：流动相A 9％，流动相C 91％；10
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15min：流动相A 9～19％，流动相C 91～81％，15min～25min:流动相A19％，流动相C 81％；或，梯度洗脱条件为：0
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10min：流动相A10％，流动相C 90％；10
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15min：流动相A10～20％，流动相C 90～80％，15min～25min:流动相A 20％，流动相C80％。4.如权利要求1所述的一种桑枝的质量控制方法，其特征在于，所述步骤S1中，精密称取桑皮苷A，加入40％甲醇溶液制成每ml含桑皮苷A 138.8μg；精密称取氧化白藜芦醇，加入80％乙醇溶...

【专利技术属性】
技术研发人员：凌一平，冼少华，相雨，曾宇，张旭峰，潘树球，卢国扬，陈基辉，吴锐华，何建，
申请(专利权)人：国药集团德众佛山药业有限公司，
类型：发明
国别省市：