一种药物缓释微球的制备方法技术

本发明专利技术提供了一种药物缓释微球的制备方法。该制备方法包括如下步骤：提供无定形的纳米羟基磷灰石；将nHAP分散于无机盐溶液中，作为内水相，将PLGA和PDLLA

【技术实现步骤摘要】
一种药物缓释微球的制备方法


[0001]本专利技术涉及药物缓释微球的制备领域，尤其涉及一种药物缓释微球的制备 方法，具体地，涉及一种可有效缓解类风湿关节炎疾病的可注射重组人Ⅱ型肿 瘤坏死因子受体抗体融合蛋白
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聚乳酸羟基乙酸药物缓释微球的制备方法。

技术介绍

[0002]类风湿关节炎(Rheumatoidarthritis，RA)是一种以慢性滑膜炎和关节结构破 坏为主要症状的全身炎症性疾病，发病关节多为对称性、进行性及侵蚀性的多 关节慢性肿痛。造成关节的慢性炎症和血管翳的形成，病变的滑膜侵蚀下层的 软骨和骨组织，最终造成关节结构破坏，功能障碍，甚至残疾。RA为多因素 疾病，其基本病理特征是淋巴细胞等炎性细胞浸润引起的滑膜炎和血管炎。细 胞因子在疾病的发生发展中起到关键作用，比较肯定的是细胞因子调控网络的 失衡参与了RA的病理过程。T、B细胞均可通过分泌大量的细胞因子作用于滑 膜细胞，刺激滑膜组织中的新生血管形成、滑膜细胞增殖、单核/巨噬细胞的侵 润，参与RA滑膜炎症。同时这些细胞因子又可通过复杂的细胞因子网络反过 来作用于免疫细胞，进一步使自身免疫反应扩大。除了免疫细胞外，滑膜组织 中的巨噬样滑膜细胞和成纤维样滑膜细胞也可产生如TNF
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a、IL
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1、IL
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6、IL
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12 等多种细胞因子。在参与RA滑膜炎症众多的细胞因子中，TNF
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a起着极其关 键的作用。它通过刺激滑膜成纤维细胞的增殖、诱导IL
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6、GM
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CSF、趋化因 子以及基质金属蛋白酶和前列腺素的产生等机制导致滑膜增殖、软骨侵蚀和全 身性的炎症反应。
[0003]注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体
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抗体融合蛋白(rhTNFR:Fc)是由人 p75肿瘤坏死因子
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α(TNF
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α)受体与人IgG1的Fc段组成的一种融合蛋白。在 人体Fc达稳态的时间为408
±
20h。其中Fc段只包括有铰链区、CH2区、CH3 区，有较好的非免疫原性和耐受性。由于在结构上，含有2个可溶性的TNF
‑ꢀ
α受体，所以它与细胞表面TNF
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α受体相比，特异性结合TNF
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α的作用更强， 从而阻断细胞表面TNF
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α受体与TNF
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α的相互作用，降低其生物活性。现有 的药物均需对患者进行短时间多次注射，如何解决现有的生物利用度低，以及 多次注射带来的患者依从性低的问题急需解决。

技术实现思路

[0004]本专利技术的专利技术人发现，聚乳酸
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羟基乙酸聚合物(PLGA)是由乳酸和羟基乙 酸的单体随机聚合而成的一种可降解的功能高分子有机化合物。微球制剂具有 诸多优点，如可避免出现血药浓度峰谷现象、减小不良反应、提高药物的生物 利用度等。PLGA具有性能优良、成囊成膜性好、无毒、制备方便等优点可作 为多种药物缓释载体。PLGA微球具有保护药物免遭破坏，靶向药物到某些特 殊组织，延缓/控制药物释放，延长药物作用时间，降低药物毒性和刺激性等优 点。
[0005]聚多巴胺(PDA)是一种贻贝仿生类材料，可由多巴胺(DA)在弱碱性环 境下自聚而得，具有良好的粘附性、稳定性和生物相容性。PDA的结构中含有 大量的邻苯二酚和一、二
级胺，使得其几乎可黏附于任何表面，并具有良好的 光学、电学性能，因此在医学和材料学中得到了广泛的研究。吸附在材料表面 的PDA可以视作反应的“桥梁”，通过迈克尔加成或席夫碱反应，与含亲核基 团的试剂发生反应，从而在材料表面引入其他功能性基团，实现材料的表面改 性。同时，PDA是黑色素的主要成分，分布于人体各个部位，因而具有良好的 生物相容性。
[0006]本专利技术的一个目的在于提高微球的药物负载率，且提高负载的稳定性，同 时消除微球的突释效应，从而避免对患者在短时间内进行多次注射，提高生物 利用度，从而避免出现由于多次注射带来的患者依从性低的问题。
[0007]本专利技术的一个进一步的目的在于提高纳米羟基磷灰石的生物相容性以及稳 定性。
[0008]特别地，本专利技术提供了一种药物缓释微球的制备方法，包括如下步骤：
[0009]提供无定形的纳米羟基磷灰石(nHAP)；
[0010]将所述nHAP分散于无机盐溶液中，作为内水相，将PLGA和 PDLLA
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PEG
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PDLLA溶解在乙酸乙酯中作为油相，乳化制备成W/O乳液，再 对所述W/O乳液与聚乙烯醇溶液进行乳化，得到W/O/W乳液；
[0011]对所述W/O/W乳液进行搅拌抽真空，离心得到微球，并对所述微球进行 刻蚀、冷冻干燥，得到nHAP
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PLGA多孔微球；
[0012]将所述nHAP
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PLGA多孔微球与多巴胺溶解于缓冲液中，搅拌离心并冷冻 干燥得到PDA修饰的nHAP
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PLGA多孔微球；
[0013]将所述PDA修饰的nHAP
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PLGA多孔微球分散在磷酸盐缓冲液中，并施加 重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体抗体融合蛋白(rhTNFR:Fc)溶液，冷冻干燥后 得到rhTNFR:Fc
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PLGA可注射药物缓释微球。
[0014]可选地，所述将所述nHAP
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PLGA多孔微球与多巴胺溶解于缓冲液中，搅 拌离心并冷冻干燥得到PDA修饰的nHAP
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PLGA多孔微球的步骤中，所述 nHAP
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PLGA多孔微球与所述多巴胺的质量比为范围在5
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10:1中任一值；
[0015]所述nHAP
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PLGA多孔微球、多巴胺和缓冲液的溶液中，所述nHAP
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PLGA 多孔微球的质量分数为范围在0.1
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1％中任一值；
[0016]可选地，所述缓冲液为三(羟甲基)氨基甲烷盐酸盐缓冲液，所述缓冲液 的pH值为范围在8
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9中任一值。
[0017]可选地，所述将所述nHAP
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PLGA多孔微球与多巴胺溶解于缓冲液中，搅 拌离心并冷冻干燥得到PDA修饰的nHAP
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PLGA多孔微球的步骤中，将所述 nHAP
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PLGA多孔微球与多巴胺溶解于缓冲液之后、且搅拌离心并冷冻干燥得 到PDA修饰的nHAP
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PLGA多孔微球之前，还包括如下步骤：避光搅拌反应 12
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16h，并进行水洗。
[0018]可选地，将所述PDA修饰的nHAP
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PLGA多孔微球分散在磷酸盐缓冲液中 的步骤中，所述磷酸盐缓冲液的pH值为范围在7
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8中任一值；
[0019本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种药物缓释微球的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：提供无定形的纳米羟基磷灰石(nHAP)；将所述nHAP分散于无机盐溶液中，作为内水相，将PLGA和PDLLA
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PEG
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PDLLA溶解在乙酸乙酯中作为油相，乳化制备成W/O乳液，再对所述W/O乳液与聚乙烯醇溶液进行乳化，得到W/O/W乳液；对所述W/O/W乳液进行搅拌抽真空，离心得到微球，并对所述微球进行刻蚀、冷冻干燥，得到nHAP
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PLGA多孔微球；将所述nHAP
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PLGA多孔微球与多巴胺溶解于缓冲液中，搅拌离心并冷冻干燥得到PDA修饰的nHAP
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PLGA多孔微球；将所述PDA修饰的nHAP
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PLGA多孔微球分散在磷酸盐缓冲液中，并施加重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体抗体融合蛋白(rhTNFR:Fc)溶液，冷冻干燥后得到rhTNFR:Fc
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PLGA可注射药物缓释微球。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述将所述nHAP
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PLGA多孔微球与多巴胺溶解于缓冲液中，搅拌离心并冷冻干燥得到PDA修饰的nHAP
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PLGA多孔微球的步骤中，所述nHAP
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PLGA多孔微球与所述多巴胺的质量比为范围在5
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10:1中任一值；所述nHAP
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PLGA多孔微球、多巴胺和缓冲液的溶液中，所述nHAP
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PLGA多孔微球的质量分数为范围在0.1
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1％中任一值；可选地，所述缓冲液为三(羟甲基)氨基甲烷盐酸盐缓冲液，所述缓冲液的pH值为范围在8
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9中任一值。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述将所述nHAP
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PLGA多孔微球与多巴胺溶解于缓冲液中，搅拌离心并冷冻干燥得到PDA修饰的nHAP
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PLGA多孔微球的步骤中，将所述nHAP
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PLGA多孔微球与多巴胺溶解于缓冲液之后、且搅拌离心并冷冻干燥得到PDA修饰的nHAP
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PLGA多孔微球之前，还包括如下步骤：避光搅拌反应12
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16h，并进行水洗。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，将所述PDA修饰的nHAP
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PLGA多孔微球分散在磷酸盐缓冲液中的步骤中，所述磷酸盐缓冲液的pH值为范围在7
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8中任一值；所述PDA修饰的nHAP
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PLGA多孔微球和所述磷酸盐缓冲液的溶液中，所述PDA修饰的nHAP
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PLGA多孔微球的质量分数为范围在1
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10％中任一值；所述将所述PDA修饰的nHAP
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PLGA多孔微球分散在磷酸盐缓冲液中，并施加重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体抗体融合蛋白(rhTNFR:Fc)溶液的步骤中，所述rhTNFR:Fc溶液为含有rhTNFR:Fc的磷酸盐缓冲液的溶液，所述rhTNFR:Fc溶液中，所述rhTNFR:Fc的质量百分比为范围在0.05
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0.5％中任一值；可选地，所述rhTNFR:Fc溶液中，所述磷酸盐缓冲液的pH值为7
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8中任一值；可选地，所述将所述PDA修饰的nHAP

【专利技术属性】
技术研发人员：张建军，杨康，李晓明，
申请(专利权)人：北京化工大学，
类型：发明
国别省市：