欧李多酚提取物在制备促进成骨细胞分化药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种欧李多酚提取物在制备促进成骨细胞分化药物中的应用，本发明专利技术人经过大量试验发现，欧李多酚提取物对MC3T3

【技术实现步骤摘要】
欧李多酚提取物在制备促进成骨细胞分化药物中的应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种欧李多酚提取物在制备促进成骨细胞分化药物中的应用。

技术介绍

[0002]欧李是膳食摄入矿质元素的优质来源，尤其是钙、铁、锌三种元素，其含量分别高达524mg/kg FW(Fresh weight，鲜重)、24.2mg/kg FW和4.86mg/kg FW。野生欧李中的钙含量达2574.78mg/kg DW(Dry weight，干重)，是富士苹果的8.86倍。欧李鲜果中的钙主要以水溶性钙的形式存在，水溶性钙和果胶钙占欧李鲜果总钙含量的60.92％，易于被人体吸收利用。
[0003]欧李鲜果富含植物多酚，因此，目前对欧李果实的营养保健的探究主要以其抗氧化能力为主。多酚类成分是植物抵抗逆境时的代谢产物，可帮助对抗病虫害。多酚的酚羟基结构通过氢键的作用与细菌蛋白质结合，使蛋白质失活或变性，从而起到抑菌的作用。研究表明，欧李中的花色苷类成分对食品中常见的致病细菌具有抑制作用，如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌等。同时，通过AB
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8大孔树脂精制后，欧李花色苷的抗菌能力能得到显著提高，欧李粗制花色苷对大肠杆菌的最小抑菌浓度为1040μg/mL，精制后，能达到21.446μg/mL。欧李多酚提取物对三种不同的人源癌细胞(肝癌细胞HepG2、结肠癌细胞HCT116和胃癌细胞BGC823)具有良好的抑制效果，抑制率达70％以上。
[0004]成骨细胞(osteoblast，OB)主要由内外骨膜和骨髓中基质内的间充质始祖细胞分化而来，能特异性分泌多种生物活性物质，调节并影响骨的形成和重建过程。成骨细胞是骨形成的主要功能细胞，负责骨基质的合成、分泌和矿化。人类及动物体骨组织不断地进行着重建，骨重建过程包括骨的分解吸收与新骨的形成。破骨细胞负责骨分解与吸收，而成骨细胞负责新骨形成。破骨细胞贴附在旧骨区域，分泌酸性物质溶解矿物质，分泌蛋白酶消化骨基质，形成骨吸收陷窝；其后，成骨细胞移行至被吸收部位，分泌骨基质，骨基质矿化而形成新骨。破骨与成骨过程的平衡是维持正常骨量的关键。
[0005]在骨组织中，不断进行着骨生成和骨吸收，在年轻时骨生成和骨吸收保持着良好的平衡，但随着年龄的增长，由于各种原因该平衡倾向于骨吸收(解偶联)。并且，长时间持续该状态的话会使得骨组织变脆，导致发生骨折、腰痛等各种骨疾病。临床上常用双磷酸盐类、雌激素类、选择性雌激素受体调节剂等化学药物进行治疗，但此类药物胃肠不耐受，患者依从性差，并在长期服用的安全性上颇受争议。
[0006]鉴于以上原因，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0007]为了解决现有技术存对于骨折、腰痛等疾病经常采用化学药物进行治疗，化学药物容易产生副作用，且还会产生依懒性等问题，本专利技术提供了一种欧李多酚提取物在制备促进成骨细胞分化药物中的应用。
[0008]为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0009]一种欧李多酚提取物在制备促进成骨细胞分化药物中的应用。
[0010]进一步的，所述的欧李多酚提取物的提取方法如下：将冷冻处理的欧李果实去核，研磨粉碎均匀，加入乙醇超声提取，抽滤，残渣重复超声提取抽滤两次，合并每次抽滤得到的滤液，真空旋蒸干燥，冷冻保存。
[0011]进一步的，所述的冷冻处理的温度为
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85～
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95℃。
[0012]进一步的，所述的乙醇的体积浓度为65
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75％。
[0013]进一步的，所述的乙醇的体积浓度为70％。
[0014]进一步的，提取过程中的料液比为1g:4
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6mL。
[0015]进一步的，提取过程中的料液比为1g:5mL。
[0016]进一步的，超声提取的时间为25
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35min。
[0017]进一步的，超声提取的时间为30min。
[0018]进一步的，真空旋蒸干燥的温度为42
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48℃。
[0019]进一步的，冷冻保存的温度是
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85～
‑
95℃。
[0020]进一步的，所述的药物包括医学上可接受的盐、载体和/或赋形剂。
[0021]欧李果多酚提取物中含有抗氧化活性成分，黄酮醇及其苷类成分数量较多，原花青素类成分是欧李中主要的抗氧化活性物质，可作为一项特征性的欧李果实营养评价指标。此外，儿茶素和原花青素B1也是欧李果实中含量最高的多酚成分。
[0022]MC3T3
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E1细胞的碱性磷酸酶染色实验中，细胞铺板后需要进行长达9天的体外诱导分化，并每3天更换新鲜培养基。在更换培养基的过程中，专利技术人发现细胞极易受到培养基液体波动而脱落，影响最终的检测。因此，本专利技术人用Attachment Factor(Gibco，Cat.no.S
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006
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100)预包被细胞培养板，促进贴壁，同时在细胞换液过程中，保持平稳缓慢操作，最大程度减少细胞脱壁。
[0023]与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：
[0024]本专利技术人经过大量试验发现，欧李多酚提取物对MC3T3
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E1细胞的体外诱导分化具有一定的促进作用，主要表现在能显著上调节骨细胞分化各阶段的指标，ALP及OCN的水平。此外，欧李多酚提取物可以促进骨钙素的分泌，进而可以用于在促进成骨细胞分化药物中。
附图说明
[0025]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0026]图1是本专利技术中各组大鼠代谢生化标志物水平图；
[0027]图2是本专利技术中各组大鼠骨保护素(Osteoprotegerin，OPG)/核因子
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κB的受体激活子(Receptor activator of nuclear factor
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κB ligand，RANKL)比值图；
[0028]图3是本专利技术中欧李多酚提取物对MC3T3
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E1细胞的毒性作用图；
[0029]图4是本专利技术中欧李多酚提取物对ALP活性的影响图；
[0030]图5是本专利技术中欧李多酚提取物对MC3T3
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E1细胞ALP染色的影响(
×
40)；
[0031]图6是本专利技术中欧李多酚提取物对MC3T3
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E1细胞分泌OCN的影响。
具体实施方式
[0032]为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术的技术方案进行详细的描述。显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种欧李多酚提取物在制备促进成骨细胞分化药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的欧李多酚提取物的提取方法如下：将冷冻处理的欧李果实去核，研磨粉碎均匀，加入乙醇超声提取，抽滤，残渣重复超声提取抽滤两次，合并每次抽滤得到的滤液，真空旋蒸干燥，冷冻保存。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的冷冻处理的温度为
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85～
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95℃。4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的乙醇的体积浓度为65
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75％。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的乙醇的体积浓度为70％。6...

【专利技术属性】
技术研发人员：‑，
申请(专利权)人：青岛得高健康科技有限公司，
类型：发明
国别省市：