【技术实现步骤摘要】
一种提高多杀菌素摇瓶发酵水平的方法
[0001]本专利技术属于生物发酵工程
,提供了一种提高多杀菌素摇瓶发酵水平的方法。
技术介绍
[0002]多杀菌素(Spinosad)是刺糖多孢菌(Saccharopolyspora spinosa)产生的一种大环内酯类无公害高效生物杀虫剂,兼具化学农药的髙效性和生物农药的低毒性,选择性高,无残留,不易产生抗药性,具有良好的环境相容性,可克服化学农药污染环境、破坏生态平衡、易产生耐药性的缺陷,符合国内对多杀菌素的技术需求,并且对改善环境污染,保障粮食、食品安全有着重要的现实意义。
[0003]现有技术中制备多杀菌素的方法主要有:
[0004]CN107523598A公开了一种提高多杀菌素产量的发酵方法,通过向发酵液中批次补加复合有机氮源,提高多杀菌素的产量,使得多杀菌素产量在发酵216 小时达到5.66g/L。
[0005]CN104450834A公开了一种基于代谢组学改进刺糖多孢菌发酵条件以提高多杀菌素产量的方法,通过添加正十二烷使多杀菌素产量达到381. ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一株刺糖多孢菌,其特征在于,其生物保藏编号为CGMCC No.25093。2.一种提高多杀菌素摇瓶发酵水平的方法,其特征在于,具体步骤如下:在发酵培养基中添加有前体物质,所述前体物质为甲硫氨酸、乙酸铵中的一种或两种,其添加量为每升发酵培养基添加量为1
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5g;在发酵罐发酵阶段,当发酵至144
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168h时检测氨基氮含量,加入复合氮源使氨基氮含量达到0.5%
‑
0.8%。3.根据权利要求2所述的提高多杀菌素摇瓶发酵水平的方法,其特征在于,具体步骤如下:菌种活化:从
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80℃冰箱中取刺糖多孢菌甘油管,快速融化,划线培养至固体培养基,27
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30℃活化菌种,培养7
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10天固体培养基上长出白色菌落,形成孢子即可完成活化;所采用的菌种生物保藏编号为CGMCC No.25093;种子培养:取活化后的平板,刮下孢子,制备孢子悬液,孢子悬液按1
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3%(v/v)的接种量接种至种子培养基,27
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30℃,190
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250rpm,培养3
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7天,至菌体湿体积达到25
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30%,获取摇瓶种子液;摇瓶发酵:摇瓶种子液按1
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7%(v/v)的接种量接种至装有发酵培养基的锥形瓶中,28
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32℃,220
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260rpm,培养295
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305h结束发酵,并检测含量;在上述摇瓶发酵阶段,当发酵至144
‑
168h时检测氨基氮含量,若氮含量小于5g/L,则需要加入复合氮源使氨基氮含量达到5
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8g/L。4.根据权利要求3所述的提高多杀菌素摇瓶发酵水平的方法,其特征在于:菌种活化时采用的固体培养基组成按照重量百分比如下:葡萄糖0.5
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1.0%,饴糖0.5
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1.0%,酪蛋白胨0.2
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0.5%,酵母浸粉0.2
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0.5%,硫酸镁0.2%,琼脂2%,余量为水,消毒前调节pH 6.9
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7.3。...
【专利技术属性】
技术研发人员:权利要求书二页说明书八页附图二页,
申请(专利权)人:黄河三角洲京博化工研究院有限公司,
类型:发明
国别省市:
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