交联透明质酸凝胶与脱细胞基质微粒组合物制造技术

本申请涉及包含交联透明质酸凝胶与脱细胞基质微粒的组合物，其中所述凝胶颗粒具有多孔结构，孔径中位数在50

【技术实现步骤摘要】
交联透明质酸凝胶与脱细胞基质微粒组合物
[0001]
：本专利技术涉及医用生物材料领域，特别涉及交联透明质酸凝胶与脱细胞基质微粒组合物。本专利技术还涉及本专利技术所述交联透明质酸凝胶与脱细胞基质微粒组合物的制备方法、包含本专利技术交联透明质酸凝胶与脱细胞基质微粒组合物，及其用途。
[0002]背景概况：注射填充材料如透明质酸、胶原等被广泛用于医学美容领域，如矫正皱纹和皱褶并且增加面部体积。其主要原理是通过增加皮下组织体积，修复皮肤凹陷。
[0003]天然透明质酸存在着在组织内半衰期短、易被降解和扩散的缺点，这大大限制了其在医学美容填充等领域的应用。将天然透明质酸经化学交联剂交联修饰再经颗粒化为可注射的凝胶颗粒是目前解决天然透明质酸上述问题的常用方法，其中化学交联修缮是为了提高产品的抗降解性，颗粒化是为了让凝胶可以被从注射针中推出至皮肤内。如CN107223061公开了一种无菌组合物，该组合物包含与1,4
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丁二醇二缩水甘油醚交联的交联透明质酸，可用于下巴区域、下颌外形或鼻子的雕塑、填充或矫正。如CN104072814公开了一种用于制备交联透明质酸的组合物，包含浓度为15
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25wt%的透明质酸碱性水溶液和交联剂，所述组合物在频率0.02
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1Hz下的Tanδ值为0.5
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1.5。如CN1950039公开了一种基于葡萄糖胺聚糖的粒径为1到5mm的可注射凝胶颗粒，其制备方法包括以所需浓度制备粘弹性介质构成的凝胶，并将该凝胶物理破碎，例如剁碎、捣碎或将该凝胶通过具有适当孔径的过滤器。该颗粒可以用于软组织增添的植入物。
[0004]得益于其无免疫原性，体积支撑能力强，填充过程可逆，交联透明质酸凝胶被许多人认为是最理想的皮肤填充剂之一。然而，从组织工程的角度考虑，一个好的组织填充剂在提供足够的力学支撑作用的同时，应不影响或支持细胞粘附、生长和分化表型，应不影响或支持营养物质和代谢产物的输送。然而，交联透明质酸凝胶这一类材料是通过高分子溶液交联形成的富水的交联网络结构，在常规的制备方法下（如上述提及CN107223061、CN104072814），由于交联在均匀溶液的分子结构层面发生，形成的交联网络虽然具有空间上的三维结构但孔径极小，当这种致密交联的凝胶颗粒被注射到组织中时，在容积填充的同时也形成了一个惰性物理屏障，阻碍了局部组织的新陈代谢活动，易导致面部僵硬，表情不自然。而若要通过减小凝胶颗粒的粒径来规避这个问题，却又往往导致凝胶缺乏足够的支撑能力，无法达到预期的组织填充效果。此外，交联透明质酸凝胶为无色透明凝胶，注射层次过浅或者注射量过大时均容易产生丁达尔效应，从而导致皮肤发蓝，在浅表皱纹等方面的应用并不理想。
[0005]不同于透明质酸类填充剂，胶原类植入剂多以胶原纤维的悬液或胶原的溶液形式提供。胶原蛋白本身具有生理活性，纤维结构或溶液形式也不会影响局部的新陈代谢活动，反而能够诱导和刺激局部组织再生。但胶原类植入剂也有着其明显劣势。一方面，以溶液形式提供的胶原产品仅能起到局部营养和诱导再生作用，无法实现即时填充效果，仅有以纤维悬液方式提供的产品才能增加皮下组织的体积，但其体积占有率也不高，往往远需要高于透明质酸的浓度才能起到足够的组织填充效果，如市售胶原填充剂浓度多为3.5%，而透
明质酸多为2%。另一方面，天然胶原蛋白在体内的维持时间也不理想，为了提供足够的维持时间，往往也需要通过交联来增加产品的相关性能。如CN101648989公开了一种长效型胶原蛋白及其制造方法，将该胶原蛋白与γ－聚麸胺酸(γ－PGA)混合，同时加入一戊二醛溶液并搅拌均匀，进行第一交联，再重复加入该戊二醛溶液搅拌均匀，进行第二次交联后，即可得该长效型胶原蛋白。如CNCN102924731公开了一种三重交联胶原蛋白的制造方法，包括：提供一可溶性的胶原蛋白样品；混合该胶原蛋白样品与一第一交联剂，以形成一重交联的胶原蛋白；混合该一重交联的胶原蛋白与一第二交联剂，以形成二重交联的胶原蛋白；以及混合该二重交联的胶原蛋白与一第三交联剂，以形成三重交联的胶原蛋白。但这样的实现方式却导致产品失去了胶原材料天然的生理活性位点被破坏或封闭，无法发挥其预期的生理活性作用。
[0006]综上所述，从组织工程的角度考虑，市面上的这两类材料都不是一个理想的组织填充剂。因此，亟需一种具备与组织、细胞生长相适应的孔壁结构并具备生理活性的组织填充剂，能支持细胞粘附、生长和分化表型，支持营养物质和代谢产物的输送，在面部塑形的同时也能诱导局部组织再生，实现远期皮肤容积再生修复。
[0007]
技术实现思路
：为了解决现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种具交联透明质酸凝胶与脱细胞基质微粒组合物，其用于医学填充美容，填充部位优选在局部的组织需要新陈代谢且需提供足够支撑的部位，包括人体，例如人类中的鼻唇沟、下巴、下颌外形、面颊、颧弓、眼周、眉间、鼻梁、山根等。
[0008]本专利技术所述的组合物克服了已知植入剂的缺点，所述组合物与组织细胞生长相适应的孔壁结构特征，在发挥容积填充的作用的同时能够不影响局部组织的新陈代谢，并能作为细胞支架支持细胞迁移生长，支持信号分子、营养和代谢产物的运输。组合物中的脱细胞基质微粒具有生物活性，通过组成成分、仿生微观结构、信号因子协同具前述细胞支架诱导细胞迁移、增殖和局部组织再生，使产品在代谢完成后由于自体组织、细胞的再生修复，也能维持一定的矫正效果。另外，脱细胞基质微粒也使得产品整体呈现白色不透明状，避免了丁达尔效应的发生。
[0009]交联透明质酸凝胶根据本专利技术一实施方案，孔壁结构的孔径中位数在50
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1000 um之间，优选为80
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500 um，更优选为90
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300 um，甚至100
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200um；本专利技术所述凝胶的孔径为反映凝胶孔壁结构的特征值，定义为孔的最远端两点之间的距离。凝胶的孔径可以使用常规方法测量，如通过根据如下方法量化：将凝块在浓度为30、50、70、90、100%的乙醇水溶液中依序浸没20分钟以实现梯度脱水，在硅氮烷中浸没10分钟后真空干燥。将干燥后的样品进行SEM表征，视野下随机选取4个500
×
500 μm的正方形，随机测量其中20个孔径并进行统计分析，得到孔径的中位数。
[0010]根据本专利技术另一实施方案，凝胶颗粒的粒径中位数D
50
在50
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1000 um之间，优选为100
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800 um，更优选为300
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700 um，甚至400
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600um；本专利技术所述凝胶颗粒的粒径为反映凝胶颗粒大小的特征值，可以通过配有湿法分散仪的激光粒度仪在0.9%的氯化钠水溶液中测定得到的。
[0011]根据本专利技术另一实施方案，所述的凝胶的颗粒粒径与孔径间存在着相适应关系，
孔壁结构的孔径中位数与凝胶颗粒的粒径中位数的比值在0.05
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1之间，优选为0.1
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.包含交联透明质酸凝胶与脱细胞基质微粒的组合物，其中所述凝胶颗粒具有多孔结构，孔径中位数在50
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1000 um之间。2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述凝胶颗粒具有多孔结构，孔径中位数为80
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500 um，更优选为90
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300 um，甚至100
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200um。3.根据前述权利要求任一项所述的组合物，其中所述脱细胞基质微粒粒径中位数在 5
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300um之间，优选为10
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200 um，更优选为20
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100um，甚至30
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50um。4.根据前述权利要求任一项所述的组合物，其中所述凝胶颗粒的孔径中位数为80
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500 um，更优选为90
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300 um，甚至100
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200um。5.根据前述权利要求任一项所述的组合物，其中所述凝胶颗粒的粒径中位数D
50
在50
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1000 um之间，优选为100
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800 um，更优选为300
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700 um，甚至400
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600um。6.根据前述权利要求任一项所述交联透明质酸凝胶颗粒，其中所述凝胶颗粒的孔径的中位数与凝胶颗粒的粒径的中位数D
50
的比值在0.05
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【专利技术属性】
技术研发人员：黄兆辉，董丽，刘宝军，解江冰，
申请(专利权)人：爱博睿美成都医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：