一株地衣芽孢杆菌及其在降解白及多糖的应用制造技术

本申请公开了一株地衣芽孢杆菌及其在降解白及多糖的应用。该地衣芽孢杆菌株命名为Bacillus licheniformis BJ2022，保藏单位为中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 2022816。该地衣芽孢杆菌在用于甘露聚糖、异甘露聚糖和甘露寡糖的降解时，可断裂β

【技术实现步骤摘要】
一株地衣芽孢杆菌及其在降解白及多糖的应用


[0001]本申请涉及白及多糖降解
，尤其涉及一株地衣芽孢杆菌及其在降解白及多糖的应用。

技术介绍

[0002]白及为兰科白及属多年生草本植物，是我国传统的珍稀名贵中药材，具有极高的观赏价值、药用价值和经济价值。白及块茎中的化合物组成超过150种，其中白及多糖是其干块茎中组成最丰富的一类物质，含量最高可达60％。白及多糖是一种高分子粘性多糖，其化学成分为葡甘露聚糖(包括β
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葡萄糖和β
‑
甘露糖)，单糖残基以β
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1，4
‑
糖苷键连接，两者摩尔比约为1：4，分子量为70000～600000Da。白及多糖具有抗菌活性、促进伤口愈合、抗肿瘤、抗纤维化、抗氧和抗消化道溃疡等生物活性，由于白及多糖的无刺激、无副作用，其在食品、化妆品等工业也有广泛的应用。白及多糖粘度大，水溶性差，在后续加工利用上带来很大的不便。鉴于多糖在白及块茎中的绝对占比，如何在保持多糖生物活性的同时有效降低其粘性，已成为白及产业当前面临的重大科学难题和产业瓶颈。
[0003]相较于白及多糖，聚合度更小的白及低聚糖(一般低于30)水溶性增加而粘度下降，且经口服进入肠道后更易发挥生物活性。目前，白及多糖降解为低聚糖的方法主要有化学(如酸、碱水解)、物理法(如超声)和生物法三大类，但化学法反应条件剧烈、难以质控，且环境污染较大，物理法则存在降解效率不高的难题，而生物法则可以有效避免这些问题。
[0004]微生物降解法是近年来发展的新兴多糖降解技术，采用特别微生物，将多糖高效降解成低聚寡糖，相比于传统的化学和物理方法，绿色环保，特别适用于低聚寡糖的规模化制备。
[0005]因此，寻找出一种能够高效降解白及多糖的微生物，成为解决上述技术问题的关键方法之一。

技术实现思路

[0006]有鉴于此，本申请实施例公开了一株地衣芽孢杆菌及其在降解白及多糖的应用，以解决或缓解了上述部分技术问题。
[0007]第一方面，本申请实施例公开了一株地衣芽孢杆菌，该菌株命名为Bacillus licheniformis BJ2022，保藏单位为中国典型培养物保藏中心，地址位于湖北省武汉市武昌区八一路299号，保藏编号为CCTCC NO:M 2022816，保藏日期为2022年6月7日。
[0008]第二方面，本申请实施例公开了一种菌剂，应用于白及多糖的降解，其中，所述菌剂包含第一方面所述的地衣芽孢杆菌。
[0009]进一步地，所述菌剂含有所述地衣芽孢杆菌的活菌体，或者所述菌剂含有所述地衣芽孢杆菌的活菌体和死菌体的混合菌体。
[0010]优选地，当所述菌剂含有所述地衣芽孢杆菌的活菌体和死菌体的混合菌体时，活菌体的数量高于死菌体的数量。
[0011]更优选地，所述菌剂含有所述地衣芽孢杆菌的活菌体。
[0012]进一步地，所述菌剂为液态菌剂和/或固态菌剂。
[0013]优选地，所述菌剂的剂型为菌液或者冻干后的菌体。
[0014]第三方面，本申请实施例公开了第一方面所述地衣芽孢杆菌和/或第二面所述菌剂在降解甘露聚糖的应用；
[0015]其中，所述多糖包含β
‑
1，4
‑
糖苷键。
[0016]优选地，所述应用包括降解白及多糖。
[0017]第四方面，本申请实施例公开了第一方面所述地衣芽孢杆菌和/或第二面所述菌剂在发酵制备白及低聚糖的应用。
[0018]第五方面，本申请实施例公开了一种试剂盒，其包含第一方面所述地衣芽胞杆菌或第二方面所述菌剂。
[0019]第六方面，本申请实施例公开了第一方面所述地衣芽胞杆菌的筛选方法，包括：
[0020]取粪便样品并制备肠道菌群稀释液；
[0021]菌株的富集和筛选；
[0022]地衣芽孢杆菌株的分离、纯化；
[0023]以及菌株的鉴定。
[0024]进一步地，所述肠道菌群稀释液的制备方法为梯度离心法。
[0025]进一步地，所述地衣芽孢杆菌株的分离方法唯一碳源筛选法。
[0026]进一步地，所述菌株的鉴定方式为形态学特征验证及16S rDNA测序鉴定。
[0027]与现有技术相比，本申请至少具有以下有益效果之一：
[0028]本申请中涉及一株地衣芽孢杆菌及其在降解白及多糖的应用。所述地衣芽孢杆菌在用于甘露聚糖、异甘露聚糖和甘露寡糖的降解时，可断裂β
‑
1，4
‑
D
‑
甘露糖苷键，产生低聚糖片段，白及多糖含有大量的β
‑
1,4
‑
D
‑
甘露糖苷键，采用所述地衣芽胞杆菌，可有效将白及多糖降解为白及低聚糖。相比于采用物理法和化学法，采用本申请提供的地衣芽孢杆菌降解白及多糖及含有β
‑
1，4
‑
D
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甘露糖苷键的多种甘露聚糖、异甘露聚糖和甘露寡糖时，效率高、绿色环保，适用于白及低聚糖及其它低聚糖的规模化制备。
附图说明
[0029]图1为本申请实施例提供的地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis BJ2022的格兰染色结果(1000
×
)及菌落照片。
[0030]图2为醒申请实施例提供的白及低聚糖的发酵过程参数测定；其中，A为地衣芽孢杆菌生长曲线，B为发酵液pH值的变化曲线，C为发酵液总糖含量变化曲线，D为发酵液还原糖含量变化曲线。
[0031]图3为本申请实施例提供的白及低聚糖结构鉴定图；其中A为HPGPC检测白及低聚糖单糖分子量，B、C为HPLC检测的两种白及低聚糖单糖组成。
具体实施方式
[0032]为了使本申请的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本申请进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本申请，并不用于限
定本申请。本申请中未详细单独说明的试剂均为常规试剂，均可从商业途径获得；未详细特别说明的方法均为常规实验方法，可从现有技术中获知。
[0033]需要说明的是，本专利技术的说明书和权利要求书及上述附图中的术语“第一”、“第二”等是用于区别类似的对象，而不必用于描述特定的顺序或先后次序，也不对其后的技术特征起到实质的限定作用。应该理解这样使用的数据在适当情况下可以互换，以便这里描述的本专利技术的实施例能够以除了在这里图示或描述的那些以外的顺序实施。此外，术语“包括”和“具有”以及他们的任何变形，意图在于覆盖不排他的包含，例如，包含了一系列步骤或单元的过程、方法、系统、产品或设备不必限于清楚地列出的那些步骤或单元，而是可包括没有清楚地列出的或对于这些过程、方法、产品或设备固有的其它步骤或单元。
[0034]第一方面，本申请实施例公开了一株地衣芽孢杆菌，该菌株命名为Bacillus licheniformis BJ2022，保藏单位为中国本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株地衣芽孢杆菌，该菌株命名为Bacillus licheniformis BJ2022，保藏单位为中国典型培养物保藏中心，地址位于湖北省武汉市武昌区八一路299号，保藏编号为CCTCC NO:M 2022816，保藏日期为2022年6月7日。2.一种菌剂，其包含权利要求1所述的地衣芽孢杆菌。3.根据权利要求2所述的菌剂，其中，所述菌剂含有所述地衣芽孢杆菌的活菌体，或者所述菌剂含有所述地衣芽孢杆菌的活菌体和死菌体的混合菌体。4.根据权利要求3所述的菌剂，其中，当所述菌剂含有所述地衣芽孢杆菌的活菌体和死菌体的混合菌体时，活菌体的数量高于死菌体的数量。5.根据权利要求3所述的菌剂，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘洪涛，张志刚，殷明珠，胡海明，郑军平，程雪，夏慧，胡白飞，
申请(专利权)人：刘洪涛，
类型：发明
国别省市：