用于检测血清中25-羟基维生素D的试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种用于检测血清中25

【技术实现步骤摘要】
用于检测血清中25
‑
羟基维生素D的试剂盒及其应用


[0001]本专利技术涉及维生素D检测
，尤其是涉及一种用于检测血清中25
‑
羟基维生素D的试剂盒及其应用。

技术介绍

[0002]维生素是维持机体正常生理功能、维持细胞内特异代谢反应所必须的一类小分子有机物，是人体健康所必须的一类基本营养物质，在调节物质代谢过程中发挥重要作用。维生素D属于脂溶性维生素，是调节骨代谢的重要维生素，婴幼儿缺乏维生素D会导致佝偻病，成人缺乏会导致骨质疏松症。当机体摄入并蓄积过量的维生素D时，体内维生素D负反馈调节作用失调，会导致高钙血症及一系列不良反应如恶心、呕吐、便秘、胰腺炎、急性肾脏损伤等。25
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羟基维生素D半衰期较长，体内存在形式稳定且浓度较高，是监测体内维生素D营养水平的标志物。25
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羟基维生素D2和25
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羟基维生素D3是25
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羟基维生素D在血液循环中的主要存在形式，可作为维生素D的检测指标，因此，监测人体内25
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羟基维生素D2和25
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羟基维生素D3的含量，有助于评价人体维生素D的状况。目前市场并无诊断人体血清中维生素D高效液相色谱法试剂盒。
[0003]有鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0004]本专利技术的第一目的在于提供一种用于检测血清中25
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羟基维生素D的试剂盒，以缓解现有技术中存在的缺乏一种准确高效的维生素D高效液相色谱法试剂盒的问题。
[0005]本专利技术的第二目的在于提供上述试剂盒在非诊断和治疗目的的检测血清中25
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羟基维生素D中的应用。
[0006]为解决上述技术问题，本专利技术特采用如下技术方案：
[0007]根据本专利技术的一个方面，本专利技术提供了用于检测血清中25
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羟基维生素D的试剂盒，所述25
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羟基维生素D包括25
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羟基维生素D2和25
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羟基维生素D3；
[0008]所述试剂盒包括用于高效液相色谱分析的校准品，所述校准品为含有25
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羟基维生素D2和25
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羟基维生素D3的混合液；用于稀释校准品的稀释液；和用于对样品进行前处理的沉淀剂和样本萃取液；
[0009]所述稀释液为含有牛血清蛋白的缓冲液；
[0010]所述沉淀剂为硫酸盐或硝酸盐的水溶液；
[0011]所述样本萃取液为含有月桂基苯甲酮的有机溶液。
[0012]优选地，所述稀释液为含有牛血清蛋白的PBS缓冲液。
[0013]优选地，所述稀释液为含有1～5％牛血清蛋白的PBS缓冲液；
[0014]优选地，所述稀释液为含有1％牛血清蛋白的PBS缓冲液。
[0015]优选地，所述沉淀剂为硫酸锌的水溶液或硝酸银的水溶液；
[0016]优选地，所述沉淀剂为浓度为0.01～0.2mol/L的硫酸锌水溶液；
[0017]优选地，所述沉淀剂为浓度为0.2mol/L的硫酸锌水溶液。
[0018]优选地，所述样本萃取液的溶剂为乙酸乙酯或正己烷；
[0019]优选地，所述样本萃取液为浓度为800～1200ng/mL月桂基苯甲酮的乙酸乙酯溶液；
[0020]优选地，所述样本萃取液为浓度为1000ng/mL月桂基苯甲酮的乙酸乙酯溶液。
[0021]优选地，所述校准品包括校准品S1、校准品S2、校准品S3、校准品S4、校准品S5和校准品S6；各校准品按照目标浓度配制，然后经高一级校准品赋值得到校准品的标示浓度；校准品S1～S6中25
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羟基维生素D2和25
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羟基维生素D3的目标浓度依次为70、100、200、500、800和1000ng/mL。
[0022]优选地，所述试剂盒还包括质控品。
[0023]优选地，所述质控品包括低值质控品和高值质控品；各质控品按照目标浓度配制，然后经高一级校准品赋值得到质控品的标示浓度；低值质控品和高值质控品中25
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羟基维生素D2和25
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羟基维生素D3的目标浓度依次为200和800ng/mL。
[0024]优选地，所述试剂盒包括校准品S1～S6，低值质控品、高值质控品、稀释液、沉淀剂和样本萃取液；
[0025]校准品S1中25
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羟基维生素D2和25
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羟基维生素D3的目标浓度为70ng/mL，以甲醇作为溶剂；校准品S2中25
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羟基维生素D2和25
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羟基维生素D3的目标浓度为100ng/mL，以甲醇作为溶剂；校准品S3中25
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羟基维生素D2和25
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羟基维生素D3的目标浓度为200ng/mL，以甲醇作为溶剂；校准品S4中25
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羟基维生素D2和25
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羟基维生素D3的目标浓度为500ng/mL，以甲醇作为溶剂；校准品S5中25
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羟基维生素D2和25
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羟基维生素D3的目标浓度为800ng/mL，以甲醇作为溶剂；校准品S6中25
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羟基维生素D2和25
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羟基维生素D3的目标浓度为1000ng/mL，以甲醇作为溶剂；
[0026]低值质控品中25
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羟基维生素D2和25
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羟基维生素D3的目标浓度为200ng/mL，以甲醇作为溶剂；高值质控品中25
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羟基维生素D2和25
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羟基维生素D3的目标浓度为800ng/mL，以甲醇作为溶剂；
[0027]稀释液为按照质量百分比计，含有1％牛血清蛋白的PBS缓冲液；沉淀剂为浓度为0.2mol/L的硫酸锌水溶液；样本萃取液为浓度为1000ng/mL月桂基苯甲酮的乙酸乙酯溶液。
[0028]根据本专利技术的另一个方面，本专利技术还提供了上述试剂盒在非诊断和治疗目的的检测血清中25
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羟基维生素D中的应用，所述检测包括将经预处理的样本采用高效液相色谱法分析血清中的25
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羟基维生素D；所述预处理包括对样本进行沉淀和萃取。
[0029]与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
[0030]本专利技术针对市场上诊断人体血清中维生素D高效液相色谱法试剂盒的空白，研究了一种能准确、高效地评价血清中25
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羟基维生素D2和25
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羟基维生素D3的高效液相色谱法检测试剂盒。
[0031]该试剂盒包括用于高效液相色谱分析的校准品以及用于稀释校准品的稀释液，本专利技术提供的试剂盒选用含有牛血清蛋白的缓冲液作为血清样本的替代基质，具有易于获得、成本低、质量易于控制等优点。本专利技术提供的试剂盒还包括用于对样品进本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.用于检测血清中25
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羟基维生素D的试剂盒，其特征在于，所述25
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羟基维生素D包括25
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羟基维生素D2和25
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羟基维生素D3；所述试剂盒包括用于高效液相色谱分析的校准品，所述校准品为含有25
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羟基维生素D2和25
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羟基维生素D3的混合液；用于稀释校准品的稀释液；和用于对样品进行前处理的沉淀剂和样本萃取液；所述稀释液为含有牛血清蛋白的缓冲液；所述沉淀剂为硫酸盐或硝酸盐的水溶液；所述样本萃取液为含有月桂基苯甲酮的有机溶液。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述稀释液为含有牛血清蛋白的PBS缓冲液。3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，按照质量百分比计，所述稀释液为含有1～5％牛血清蛋白的PBS缓冲液；优选地，所述稀释液为含有1％牛血清蛋白的PBS缓冲液。4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述沉淀剂为硫酸锌的水溶液或硝酸银的水溶液；优选地，所述沉淀剂为浓度为0.01～0.2mol/L的硫酸锌水溶液；优选地，所述沉淀剂为浓度为0.2mol/L的硫酸锌水溶液。5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述样本萃取液的溶剂为乙酸乙酯或正己烷；优选地，所述样本萃取液为浓度为800～1200ng/mL月桂基苯甲酮的乙酸乙酯溶液；优选地，所述样本萃取液为浓度为1000ng/mL月桂基苯甲酮的乙酸乙酯溶液。6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述校准品包括校准品S1、校准品S2、校准品S3、校准品S4、校准品S5和校准品S6；各校准品按照目标浓度配制，然后经高一级校准品赋值得到校准品的标示浓度；校准品S1～S6中25
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羟基维生素D2和25
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羟基维生素D3的目标浓度依次为70、100、200、500、800和1000ng/mL。7.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括质控品。8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述质控品包括低值质控品和高值质控品；各质控品按照目标浓度配制，然后经高一级校准品赋值得到质控品的标示浓度；低值质控品和高值质控品中25
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羟基维生素D2和25...

【专利技术属性】
技术研发人员：栗琳，李小侠，张新星，吴政晖，应洪波，王倩倩，秦于杰，周立，丁亮，
申请(专利权)人：江苏豪思睦可生物科技有限公司湖南豪思生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：