一种基于气相色谱的联硼酸频那醇酯的检测方法技术

本申请提供了一种基于气相色谱的联硼酸频那醇酯的检测方法。通过探索样品预处理和气相色谱条件，采用中极性气相色谱柱结合质谱检测的方法，可以延长待测物联硼酸频那醇酯在分析检测过程中的热稳定性，从而提高检测方法的准确性和灵敏度，解决了联硼酸频那醇酯在液相检测中发生水解反应或气相检测中由于样品基质致使目标物热稳定性差导致检测方法评价指标差的技术问题。本申请对检测方法的专属性、线性、检测限、准确度和稳定性进行验证，确认该方法适用于联硼酸频哪醇酯的含量测定。方法适用于联硼酸频哪醇酯的含量测定。方法适用于联硼酸频哪醇酯的含量测定。

【技术实现步骤摘要】
一种基于气相色谱的联硼酸频那醇酯的检测方法


[0001]本申请属于化合物分析
，尤其涉及一种基于气相色谱的联硼酸频那醇酯的检测方法。

技术介绍

[0002]联硼酸频那醇酯是一种常用的医药中间体，同时也是一种基因毒杂质。基因毒杂质是一类可与DNA反应，造成DNA损伤，在很低水平下即可诱发基因突变，并可能致癌的杂质，因此需要严格控制样品中此类杂质的限度。
[0003]目前，针对联硼酸频那醇酯的检测方法中多采用液相色谱法，但硼酸酯类化合物中由于含有硼酸酯结构，容易和水、醇类发生水解反应，不同的硼酸酯反应速率不一，液相或者液质的流动相都会用到水或醇类，不利于目标物质的检测。而采用气相色谱法对化合物的热稳定性要求较高，硼酸酯的检测常常由于样品基质的存在导致在进样口气化过程中目标物热稳定性差，使得检测方法存在一定局限性。

技术实现思路

[0004]有鉴于此，本申请提供了一种基于气相色谱的联硼酸频那醇酯的检测方法，可以延长待测物的热稳定性，提高检测方法的准确性和灵敏度。
[0005]本申请的具体技术方案如下：一种基于气相色谱的联硼酸频那醇酯的检测方法，气相色谱的色谱柱采用中极性气相色谱柱，样品预处理条件为：先采用少量二甲基亚砜溶解，再加入环己烷和超纯水的混合溶液萃取。
[0006]进一步的，样品与二甲基亚砜的用量比为（50~100）mg：（0.1~0.2）ml。
[0007]进一步的，混合溶液中环己烷与超纯水的体积比为1:（0.1~0.2）。
[0008]进一步的，样品与混合溶液的用量比为（50~100）mg：（2~2.5）ml。
[0009]进一步的，气相色谱的载气为He，分流比为（3~4）:1。
[0010]进一步的，气相色谱的升温程序为（50~70）℃，保持（1~2）min；（30~40）℃/min升温至（240~250）℃，保持（2~8）min。
[0011]进一步的，气相色谱的流速为（0.8~1.2）ml/min，进样体积为（1~5）μl。
[0012]进一步的，气相色谱采用质谱检测，质谱参数为：采集类型：MRM，离子源：EI，传输线温度：（250~300）℃，四极杆温度：150℃，离子源温度：250℃。
[0013]进一步的，气相色谱采用质谱检测，质谱扫描参数为：母离子239（m/z），子离子57/85（m/z），CE（5~25）（eV）。
[0014]进一步的，样品包括化工制品、生物制品和药品。
[0015]本申请提供了一种基于气相色谱的联硼酸频那醇酯的检测方法，通过二甲基亚砜溶解样品，然后再加入环己烷和水进行萃取，二甲基亚砜和水互溶后和环己烷分层，通过快速萃取的方式让联硼酸频那醇酯减少在水相停留的时间并快速从水相进入环己烷相以减
少联硼酸频那醇酯的水解；同时液液萃取可以去除样品基质，并利用优化后的气相色谱条件能够大大提高联硼酸频那醇酯在气相进样口气化过程中目标物的热稳定性，使得用气相色谱串联质谱检测联硼酸频那醇酯成为可能。本申请的检测方法准确性和灵敏度高，解决了联硼酸频那醇酯在液相检测中发生水解反应或气相检测中由于样品基质致使目标物热稳定性差导致检测方法评价指标差的技术问题。本申请对检测方法的专属性、线性、检测限、准确度和稳定性进行验证，确认该方法适用于联硼酸频哪醇酯的含量测定。
附图说明
[0016]为了更清楚地说明本申请实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。
[0017]图1为本申请实施例1专属性色谱图；图2为本申请实施例1线性曲线图；图3为本申请对比例1色谱图；图4为本申请对比例2色谱图；图5为本申请对比例4色谱图；图6为本申请对比例5线性曲线图。
具体实施方式
[0018]为使得本申请的目的、特征、优点能够更加的明显和易懂，对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，下面所描述的实施例仅仅是本申请一部分实施例，而非全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本申请保护的范围。
[0019]本申请实施例所使用的试剂和原料均为市售或自制。
[0020]实施例1气相色谱条件：色谱柱：VF
‑
624ms柱（30m
×
0.25mm，1.4μm）；流速：1.0ml/min；进样体积：1μl；分流模式：分流，分流比4：1；控制模式：恒定流量；载气：He；升温程序：70℃，保持1min；30℃/min升温至250℃，保持3min。
[0021]质谱参数：采集类型：MRM，离子源：EI，传输线温度：250℃，四级杆温度：150℃，离子源温度：250℃。
[0022]杂质扫描参数：母离子239（m/z），子离子57/85（m/z），驻留时间160（ms），CE15/25（eV）。
[0023]供试品溶液配制：称取样品约50mg，置于10ml离心管中，准确加入0.1ml二甲基亚砜，涡旋至样品完全溶解，依次精密加入2ml环己烷、0.2ml超纯水，涡旋1min后，静置分层，取上清液过滤，即得。
[0024]检测限溶液配制：精密称取联硼酸频哪醇酯对照品，置于10ml容量瓶中，加环己烷使溶解并稀释至刻度，摇匀，配制对照品储备液。取样品约50mg，置于10ml离心管中，准确加入0.1ml二甲基亚砜，涡旋至样品完全溶解，加入0.02ml 对照品储备液，涡旋振荡，再依次
精密加入2ml环己烷、0.2ml超纯水，涡旋1min后，静置分层，取上清液过滤，即得。
[0025]标准曲线溶液配制：称取样品约50mg，置于不同10ml离心管中，准确加入0.1ml二甲基亚砜，涡旋至样品完全溶解；分别精密量取0.02ml各标准曲线储备液置于上述离心管中，涡旋振荡，再依次精密加入2ml环己烷、0.2ml超纯水，涡旋1min后，静置分层，取上清液过滤，即得一系列不同浓度标准曲线溶液。
[0026]准确度溶液配制：称取样品约50mg，置于10ml离心管中，准确加入0.1ml二甲基亚砜，涡旋振荡至样品完全溶解，加入0.02ml对照品储备液，涡旋振荡，再依次精密加入2ml环己烷、0.2ml超纯水，涡旋1min后，静置分层，取上清液过滤，即得。
[0027]（1）专属性：分别取供试品溶液、100%限度浓度对照品溶液（浓度为316.96 ng/ml）和准确度溶液，按照测试条件进行分析。结果显示，供试品溶液色谱图中未检出目标峰；100%限度浓度对照品溶液色谱图中显示目标峰，且与峰面积大于LOQ的相邻峰分离度均大于1.5；准确度溶液色谱图（如图1所示）中均显示目标峰，且与峰面积大于LOQ的相邻峰分离度均大于1.5；结果均符合规定，该方法专属性良好。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于气相色谱的联硼酸频那醇酯的检测方法，其特征在于，气相色谱的色谱柱采用中极性气相色谱柱，样品预处理条件为：先采用少量二甲基亚砜溶解，再加入环己烷和超纯水的混合溶液萃取。2.根据权利要求1所述的基于气相色谱的联硼酸频那醇酯的检测方法，其特征在于，样品与二甲基亚砜的用量比为（50~100）mg：（0.1~0.2）ml。3.根据权利要求1所述的基于气相色谱的联硼酸频那醇酯的检测方法，其特征在于，混合溶液中环己烷与超纯水的体积比为1:（0.1~0.2）。4.根据权利要求1所述的基于气相色谱的联硼酸频那醇酯的检测方法，其特征在于，样品与混合溶液的用量比为（50~100）mg：（2~2.5）ml。5.根据权利要求1所述的基于气相色谱的联硼酸频那醇酯的检测方法，其特征在于，气相色谱的载气为He，分流比为（3~4）:1。6.根据权利要求1所述的基于气相色谱的联硼酸频那醇酯的检测方法，其特征在于，气相色谱的...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋杰，麦华凤，喻美华，马玉露，陈丽平，
申请(专利权)人：广东国标医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：