本发明专利技术涉及庆大霉素制备技术领域，特别是涉及一种基于联产分离纯化工艺的庆大霉素提纯工艺，包括S1孢子悬浮液的制备、S2种子罐培养、S3酸化中和交换、S4分离漂洗、S5洗涤洗脱脱色、S6：成盐碳脱、S7喷雾干燥、S8成品保存，本发明专利技术通过控制反映代谢变化的各种参数，使产生菌的代谢沿着人们需要的方向进行，以达到预期的生产水平，采用732阳离子交换树脂，利用离子交换法从发酵液中提取庆大霉素，采用提纯条件为发酵液pH2～3，吸附时间2h，解吸剂浓度5％，解吸剂流速0.4mL/min，经HPLC测定，发酵液通过离子交换法分离提取后，庆大霉素纯度为92.5％，离子交换法适用于庆大霉素发酵液的分离提取，提取液纯度达到药物分析的要求。提取液纯度达到药物分析的要求。提取液纯度达到药物分析的要求。
【技术实现步骤摘要】
一种基于联产分离纯化工艺的庆大霉素提纯工艺
[0001]本专利技术涉及庆大霉素制备
，特别是涉及一种基于联产分离纯化工艺的庆大霉素提纯工艺。
技术介绍
[0002]庆大霉素是中国独立自主研制成功的广谱抗生素，它开始研制于1967年，成功鉴定在 1969年底，取名“庆大霉素”，意指庆祝“九大”以及庆祝工人阶级的伟大，庆大霉素[Gentamicin，正泰霉素(gentamycin)]系从放线菌科单孢子属发酵培养液中提得，系碱性化合物，是目前常用的氨基糖苷类抗生素；
[0003]庆大霉素的传统获取方法是从小诺霉素发酵液副产物中获得，下游纯化所得产品纯度较低，纯度易受到起始物料纯度的影响，提高庆大霉素纯度有重要意义，因此提出一种基于联产分离纯化工艺的庆大霉素提纯工艺。
技术实现思路
[0004]为了克服现有技术的不足，本专利技术提供一种基于联产分离纯化工艺的庆大霉素提纯工艺。
[0005]为解决上述技术问题，本专利技术提供如下技术方案：一种基于联产分离纯化工艺的庆大霉素提纯工艺，包括以下步骤：
[0006]S1：孢子悬浮液的制备；
[0007]S2：种子罐培养；
[0008]S3：酸化中和交换；
[0009]S4：分离漂洗；
[0010]S5：洗涤洗脱脱色；
[0011]S6：成盐碳脱；
[0012]S7：喷雾干燥；
[0013]S8：成品保存；
[0014]所述S4分离漂洗通过树脂分离器和漂洗罐完成。
[0015]作为本专利技术的一种优选技术方案，所述S1孢子悬浮液的准备包括以下步骤：
[0016]第一步：准备好制备孢子悬浮液作序的蒸汽灭菌柜和净化工作台，然后分装纯化水至三角瓶中，每瓶130
‑
170毫升；
[0017]第二步：组装接种瓶和接种皮管，并将准备好的上述器材进行100 度以上高温灭菌，灭菌时间一分钟以上；
[0018]第三步：在操作人员穿戴无菌衣、工作台酒精擦拭以及通风风速正常的条件下，将灭菌纯化水倒入茄子瓶中，一瓶纯化水倒两只茄子瓶；
[0019]第四步：用接种铲子将孢子刮下制成孢子悬浮液，然后打开接种瓶，将孢子悬浮液全部倒入接种瓶中，然后重新组装好接种瓶和接种皮管，并清理工作台。
[0020]作为本专利技术的一种优选技术方案，所述S2种子罐培养包括以下步骤：
[0021]第一步：先后将淀粉、玉米粉、硝酸钾、蛋白胨、轻质碳酸钙称量后放在料袋中准备投料；
[0022]第二步：向干净的种子罐中加水至埋住下层搅拌浆，然后开始搅拌，再将备好的物料缓缓加入罐中，再量取2％氯化钴溶液和豆油加入罐中，加水至所需容积，盖上罐盖准备进行灭菌；
[0023]第三步：打开罐底阀，放掉夹套水，夹层通蒸汽预热至90度后关闭，通过进气管进蒸汽进行蒸汽灭菌，当罐压达到0.1MPa时保压半小时；
[0024]第四步：灭菌结束后先关排气阀，再关进气阀，然后打开冷水阀关闭罐底阀，降温至38度，进行压差接种；
[0025]第五步：操作人员停止搅拌，罐压降至0.04MPa，看罐人员配合种子组人员接种，先取无菌样，接种前点燃火圈烧接种口，对接种口消毒，火焰要大，要均匀，用火圈保护打开接种咀套管；
[0026]第六步：种子人员一手持接种瓶，一手将接种皮管插入接种咀，种子罐放在木盒或双层布袋中以防爆裂，关闭种子罐机械搅拌，当罐压降至0.03
‑
0.04MPa，种子组人员在火焰保护下将接种头上的纱布迅速插入接种口上；
[0027]第七步：种子人员高举接种瓶并倒置，再由消罐人员慢慢降低罐压至0.04Mpa,借压将接种瓶中的孢子悬液引入罐内，一次接种不完可以重复多次至接种完毕，罐压应维持在0.04
‑
0.08MPa之间，接种完毕，先关接种阀，再拔接种皮管，并拧上接种咀套管，调节进排气控制罐阀。
[0028]作为本专利技术的一种优选技术方案，所述S3酸化中和交换包括以下步骤：
[0029]S401：备料；
[0030]S402：裂解菌丝体；
[0031]S403：稀释；
[0032]S404：交换。
[0033]作为本专利技术的一种优选技术方案，所述S5洗涤洗脱脱色包括以下步骤：
[0034]S501：洗涤；
[0035]S502：洗脱和脱色。
[0036]作为本专利技术的一种优选技术方案，所述S6成盐碳脱包括以下步骤：
[0037]S601：成盐；
[0038]S602：碳脱。
[0039]作为本专利技术的一种优选技术方案，所述S7喷雾干燥包括以下步骤：
[0040]第一步：符合要求的炭脱液经钛棒过滤器抽压至炭脱液计量罐；
[0041]第二步：用无菌空气经0.45um、0.22um的滤膜过滤至喷量液计量罐中；
[0042]第三步：再经0.22um的滤膜输送至离心喷雾塔，干粉由塔底收集至容器内。
[0043]作为本专利技术的一种优选技术方案，所述S601成盐包括以下步骤：
[0044]第一步：配置人员穿好防护用品，先抽入总体积2/3的纯化水，在夹层冷却下再缓慢抽入1/3的浓硫酸，搅拌均匀；
[0045]第二步：冷却应在0.5小时以上，上批装塔的浓缩液与本批浓缩液混合后压入成盐
炭脱罐；
[0046]第三步：在不断搅拌及夹层通冷却水冷却下缓慢加入6molL的硫酸液，调pH至5.0
‑
5.8，当pH在5.0左右时取样检测。
[0047]作为本专利技术的一种优选技术方案，所述S602碳脱包括以下步骤：
[0048]第一步：成盐液温度降到45℃以下时，加入767型针用活性炭进行炭脱，加炭量为成盐液体积的5％左右；
[0049]第二步：在搅拌及夹层通蒸汽加热下，升温至65
±
5℃，保温 45min后，压缩；
[0050]第三步：第一遍炭脱液由储罐压入成盐炭脱罐调pH在5.3左右，同法进行第二遍炭脱，滤饼用预热的纯化水清洗至尾样在500u/mL 以下，浓缩至比重1.10
‑
1.13，套用于下一批。炭脱脱率在95％以上。
[0051]作为本专利技术的一种优选技术方案，所述S501洗涤包括以下步骤：
[0052]第一步：配制0.5mol/L HCI与0.2mol/LNH4CI混合液， 0.08
‑
0.12molL的稀氨；
[0053]第二步：每柱装饱和树脂1100
‑
1500L，用饮用水及空气疏松树脂并用饮用水赶走气泡；
[0054]第三步：通入稀酸洗涤液至无钙、镁离子，完成后用饮用水冲洗至无Cl，再用0.08～0.12mol儿L稀氨水洗至pH 8.5～9.0。
[0055]与现有技术相比，本专利技术能达到的有益效果是：
[0056]通过控制反映代谢变化的各种参数，使产生菌本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种基于联产分离纯化工艺的庆大霉素提纯工艺，其特征在于，所述基于联产分离纯化工艺的庆大霉素提纯工艺包括以下步骤：S1：孢子悬浮液的制备；S2：种子罐培养；S3：酸化中和交换；S4：分离漂洗；S5：洗涤洗脱脱色；S6：成盐碳脱；S7：喷雾干燥；S8：成品保存；所述S4分离漂洗通过树脂分离器和漂洗罐完成。2.根据权利要求1所述的一种基于联产分离纯化工艺的庆大霉素提纯工艺，其特征在于，所述S1孢子悬浮液的准备包括以下步骤：第一步：准备好制备孢子悬浮液作序的蒸汽灭菌柜和净化工作台，然后分装纯化水至三角瓶中，每瓶130
‑
170毫升；第二步：组装接种瓶和接种皮管，并将准备好的上述器材进行100度以上高温灭菌，灭菌时间一分钟以上；第三步：在操作人员穿戴无菌衣、工作台酒精擦拭以及通风风速正常的条件下，将灭菌纯化水倒入茄子瓶中，一瓶纯化水倒两只茄子瓶；第四步：用接种铲子将孢子刮下制成孢子悬浮液，然后打开接种瓶，将孢子悬浮液全部倒入接种瓶中，然后重新组装好接种瓶和接种皮管，并清理工作台。3.根据权利要求1所述的一种基于联产分离纯化工艺的庆大霉素提纯工艺，其特征在于，所述S2种子罐培养包括以下步骤：第一步：先后将淀粉、玉米粉、硝酸钾、蛋白胨、轻质碳酸钙称量后放在料袋中准备投料；第二步：向干净的种子罐中加水至埋住下层搅拌浆，然后开始搅拌，再将备好的物料缓缓加入罐中，再量取2％氯化钴溶液和豆油加入罐中，加水至所需容积，盖上罐盖准备进行灭菌；第三步：打开罐底阀，放掉夹套水，夹层通蒸汽预热至90度后关闭，通过进气管进蒸汽进行蒸汽灭菌，当罐压达到0.1MPa时保压半小时；第四步：灭菌结束后先关排气阀，再关进气阀，然后打开冷水阀关闭罐底阀，降温至38度，进行压差接种；第五步：操作人员停止搅拌，罐压降至0.04MPa，看罐人员配合种子组人员接种，先取无菌样，接种前点燃火圈烧接种口，对接种口消毒，火焰要大，要均匀，用火圈保护打开接种咀套管；第六步：种子人员一手持接种瓶，一手将接种皮管插入接种咀，种子罐放在木盒或双层布袋中以防爆裂，关闭种子罐机械搅拌，当罐压降至0.03
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0.04MPa，种子组人员在火焰保护下将接种头上的纱布迅速插入接种口上；第七步：种子人员高举接种瓶并倒置，再由消罐人员慢慢降低罐压至0.04Mpa,借压将
接种瓶中的孢子悬液引入罐内，一次接种不完可以重复多次至接种完毕，罐压应维持在0.04
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0.08MPa之间，接种完毕，先关接种阀，再拔接种皮管，并拧上接种咀套管，调节进排气控制罐阀。4.根据权利要求1所述的一种基于联产分离纯化工...
【专利技术属性】
技术研发人员：张会敏，陈小翠，刘凡铎，
申请(专利权)人：河南仁华生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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