一种微反应器制备盐酸阿霉素脂质体的方法技术

本发明专利技术涉及药物制剂领域，具体涉及一种微反应器制备盐酸阿霉素脂质体的方法，包括以下步骤：（a）称取HSPC、CHO

【技术实现步骤摘要】
一种微反应器制备盐酸阿霉素脂质体的方法


[0001]本专利技术涉及药物制剂领域，具体涉及一种微反应器制备盐酸阿霉素脂质体的方法。

技术介绍

[0002]盐酸多柔比星为蒽环类广谱抗肿瘤抗生素，其严重的心脏损害、骨髓抑制限制了临床应用。脂质体作为药物输送载体可以增加包封药物的溶解度；提高药物的治疗效果，减少用药量；减轻药物的不良反应；延长药物的体内循环时间；克服肿瘤细胞的耐药性；提高药物输送的靶向性；具有良好的生物相容性。世界上第一个抗癌药物脂质体—阿柔比星脂质体于1995年底在美国获得FDA批准。
[0003]脂质体的制备方法有很多种，常规的脂质体制备方法主要包括薄膜分散法、溶剂注入法、逆相蒸发法、化学梯度载药法、复乳法等。例如专利(公开号：CN 1256091C)“阿霉素或盐酸阿霉素脂质体注射剂及其制备工艺”就是利用薄膜分散法制备脂质体；专利(公开号：CN 104958259 A)“一种盐酸表柔比星脂质体注射液及抗肿瘤活性应用”则利用溶剂注入法制备脂质体；这两个专利都使用了高压均质机来减小粒径和PDI。有专利(公开号：CN 101703471 B)专利技术了“一种改良的硫酸铵梯度法制备脂质体的方法”，通过在空白脂质体溶液中加入pH调节剂的水溶液、渗透压调节剂的水溶液或水，再加入药物或药物水溶液，进行主动载药。此方法省去了去除外水相硫酸铵的步骤，但因粒径和PDI的要求仍需对脂质体进行再处理。也有专利(公开号：CN 107115300 A)专利技术了“一种切向流系统在硫酸铵梯度法制备脂质体中的应用方法”，通过切向流快速除去脂质体混悬液中的小分子溶剂及外相硫酸铵，并有效地造成内外相硫酸铵梯度。此方法提高了脂质体有机溶剂和外相硫酸铵的去除效率，但是同样因粒径和PDI的要求仍需对脂质体进行再处理。以上大多专利仍只是单纯的利用常规的薄膜分散法或者溶剂注入法制备盐酸阿霉素脂质体，这些制备过程使用大量有机溶剂、质量不可控并且需要如超声、高压均质等繁琐的再处理步骤，多不适合工业化生产。

技术实现思路

[0004]本专利技术提供一种微反应器制备盐酸阿霉素脂质体的方法，通过微反应器精准混合水油两相，直接制备出粒径较小的脂质体，无需繁琐的再处理步骤；并且使用膜包同时去除外水相硫酸铵和有机溶剂，不必再单独去除有机溶剂；这些都极大的简化了脂质体的生产工艺并且显著提高了脂质体的生产效率和重现性。
[0005]一种微反应器制备盐酸阿霉素脂质体的方法，包括以下步骤：
[0006](a)按照质量比3：1：1称取氢化大豆磷脂HSPC、胆固醇CHO
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HP和聚乙二醇(PEG)的二硬脂酸磷脂酞乙醇胺(DSPE)的衍生物DSPE
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mPEG2000加适量有机溶剂超声至溶解并预热至50～70℃作为油相；
[0007](b)配制硫酸铵缓冲液并预热至50～70℃作为水相；
[0008](c)利用微反应器混合水油两相：将微反应器放置于50～70℃的水浴中并按照不同水油比(v/v)，总流量(水油两相流量之和)和压力(背压阀所加压力)混合两相，50～70℃温育20min；
[0009](d)使用膜包超滤去除脂质体外水相硫酸铵和有机溶剂并载药；
[0010]使用膜包超滤脂质体后加入适量pH和渗透压调节剂得空白脂质体；随后逐滴加入盐酸阿霉素水溶液；并用盐酸和氢氧化钠调节脂质体外水相pH，50～70℃温育20min得载药脂质体。
[0011]进一步的，在步骤(a)中所述HSPC、CHO
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HP和DSPE
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mPEG2000的总浓度为20mg/ml～200mg/ml；其中HSPC浓度为12mg/ml～120mg/ml，CHO
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HP浓度为4mg/ml～40mg/ml，DSPE
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mPEG2000浓度为4mg/ml～40mg/ml。
[0012]进一步的，在步骤(b)中所述硫酸铵缓冲液浓度为2.4mg/ml～50mg/ml。
[0013]进一步的，在步骤(b)中所述硫酸铵缓冲液pH为4.0～6.0。
[0014]进一步的，在步骤(c)中所述水油比为14：1～1：1。
[0015]进一步的，在步骤(c)中所述总流量为0～100ml/min。
[0016]进一步的，在步骤(c)中所述压力为0～20MPa。
[0017]进一步的，在步骤(d)中所述膜包截留分子量为3～200kd。
[0018]进一步的，在步骤(d)中所述蠕动泵转速为0～400rpm/min。
[0019]进一步的，在步骤(d)中所述盐酸阿霉素水溶液浓度为1mg/ml～15mg/ml。
[0020]进一步的，在步骤(d)中所述脂质体外水相pH为6.0～8.0。
[0021]研究发现，初始脂质浓度、水油比、总流量和压力为影响脂质体粒径和PDI的关键因素；但是这些影响因素和粒径，PDI都不是简单的线性关系，而是在一定范围内存在最优值。初始脂质浓度的适当增加可以减小粒径和PDI；水油比的增大可以极大的减小粒径，PDI也随之减小；但是水油比是7：1还是14：1粒径差距并不明显；总流量的适当增加可以减小粒径和PDI；压力的增大可以极大的减小粒径和PDI；但是加压10MPa还是16MPa粒径和PDI差距并不明显。另外使用膜包同时去除脂质体外水相硫酸铵和有机溶剂并不会对脂质体的粒径和PDI造成很大影响。具体见附图1～4。
[0022]本专利技术的有益效果是：
[0023]提供一种微反应器制备盐酸阿霉素脂质体的方法，无需繁琐的再处理步骤，通过微反应器精准混合水油两相，直接制备出粒径较小的脂质体；并且使用膜包同时去除外水相硫酸铵和有机溶剂，不必再单独去除有机溶剂；这些都极大的简化了脂质体的生产工艺并且显著提高了脂质体的生产效率和重现性。最终制备出的最优脂质体，粒径为116nm，PDI为0.103，包封率为100％。
附图说明
[0024]图1为实施例5，7和10的粒径、PDI分布图；
[0025]图2为实施例25，27和28的粒径、PDI分布图；
[0026]图3为实施例37，38和40的粒径、PDI分布图；
[0027]图4为实施例40，42和44的粒径、PDI分布图。
具体实施方式
[0028]下面结合附图和具体实施例对本专利技术作进一步说明，以使本领域的技术人员可以更好地理解本专利技术并能予以实施，但所举实施例不作为对本专利技术的限定。
[0029]实施例1
[0030]分别称取HSPC 0.7664g、CHO
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HP 0.2552g和DSPE
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mPEG2000 0.2552g，加30ml无水乙醇超声溶解作为油相；配制33mg/ml硫酸铵缓冲液(pH5.0)并预热至60℃作为水相；使用宽微反应器按照水油比(v/v)1：1，总流量20ml/min和加压3MPa混合两相，减压去除有机溶剂后60℃温育20min。使用本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种微反应器制备盐酸阿霉素脂质体的方法，其特征在于，包括以下步骤：（a）将氢化大豆磷脂HSPC、胆固醇CHO
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HP 和聚乙二醇（PEG）的二硬脂酸磷脂酞乙醇胺(DSPE)的衍生物DSPE
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mPEG2000溶解在有机溶剂中作为油相；（b）配制硫酸铵缓冲液作为水相；（c）利用微反应器混合水油两相，50~70℃温育制得脂质体；（d）使用膜包超滤去除脂质体外水相硫酸铵和有机溶剂得空白脂质体，将盐酸阿霉素载入空白脂质体，得载药脂质体。2.根据权利要求1的方法，其特征在于，在步骤（a）中所述HSPC、CHO
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HP 和DSPE
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mPEG2000的总浓度为20 mg/ml~200 mg/ml；其中HSPC浓度为12 mg/ml~120 mg/ml，CHO
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HP浓度为4 mg/ml~40 mg/ml，DSPE
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mPEG2000浓度为4 mg/ml~40 mg/ml。3.根据权利要求1的方法，其特征在于，在油相中，HSPC、CHO
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HP 和DSPE
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【专利技术属性】
技术研发人员：蒋志君，孙薇，杜欢欢，曹青日，陆小娟，于鹤云，
申请(专利权)人：江苏长泰药业有限公司，
类型：发明
国别省市：