一种西索米星生产用小单孢菌快速生长的固体培养基制造技术

本发明专利技术公开了一种西索米星生产用小单孢菌快速生长的固体培养基，所述的培养基成分包括特定的微生物多糖(黄原胶、结冷胶、胶质芽孢杆菌多糖、环状糊精等)、葡萄糖、蛋白胨、酵母粉、DL

【技术实现步骤摘要】
一种西索米星生产用小单孢菌快速生长的固体培养基


[0001]本专利技术属于微生物
，具体涉及一种西索米星生产用小单孢菌快速生长的固体培养基。

技术介绍

[0002]西索米星(Sisomicin)，中文别名为西梭霉素、西苏霉素、紫苏霉素等，是一种天然的氨基糖苷类抗生素，其生产菌株多为小单孢菌属。西索米星的抗菌谱、药代动力学和毒性类似于庆大霉素。但与庆大霉素相比，西索米星具有较好的保护动物免受致命假单胞菌感染的能力。西索米星对假单胞菌的体外活性是庆大霉素或阿米卡星的2
‑
8倍，与妥布霉素相似。在治疗动物感染假单孢菌上，西索米星的剂量平均比妥布霉素低5倍，比庆大霉素低3倍。西索米星的最低抑制浓度通常为10pg
·
ml
‑1。西索米星与多种青霉素具有协同作用，对许多假单胞菌具有抗菌作用，包括对庆大霉素耐药的菌株。西索米星和其他氨基糖苷类药物之间的交叉抗性程度取决于不同的机制。虽然许多具有灭活酶的菌株对西索米星、庆大霉素和妥布霉素都有抗性，但由于西索米星的高固有效价，它对许多因其不渗透性而对其他氨基糖苷类产生耐药性的菌株具有活性。西索米星对约66％的对庆大霉素、妥布霉素或阿米卡星耐药的菌株有活性。西索米星的人体药理作用与庆大霉素相似，在临床试验上一样有效，在某些情况下甚至更有效，但西索米星的不良反应率与庆大霉素或妥布霉素的不良反应率相当。在低于庆大霉素的剂量下，庆大霉素耐药的假单胞菌对西索米星有反应。此外，一些对庆大霉素或妥布霉素无效的感染病已经成功地使用西索米星治疗。由于西索米星在体内外均有很高的内在效力，且具有化学性质稳定、价格低和抗菌领域广范等优势，可能成为治疗敏感菌株引起的严重假单胞菌感染的首选药物。
[0003]小单孢菌属分类上属于放线菌，为革兰氏阳性菌。小单孢菌广泛分布于自然界中，尤其在富营养的土壤中大量存在。其形态为纤细的菌丝体，不存在气生菌丝，菌丝的孢子梗上不存在多个孢子。小单孢菌的次级代谢产物种类丰富且价值较大，如氨基糖苷类和大环酰胺类等多种抗生素以及生物碱等具有抗肿瘤活性的化合物。小单孢菌除了可以产生新霉素等抗生素，还可以产生庆大霉素和西索米星等抗生素。小单孢菌已经成为新发现的抗生素的菌种第一位，其产生的抗生素已经超过了一百种。
[0004]目前，小单孢菌已经在工业上被用于发酵生产西索米星，常规技术上小单孢菌斜面生长过程中所使用的培养基主要成分非常复杂，其主要成分为：玉米淀粉、麦芽糖、酵母粉、KNO3、KH2PO4、DL
‑
天冬素、CaCO3、MgCl2、琼脂粉、麸皮。但由于其生长比较缓慢且发酵单位较低，所以其生产成本相对较高，因此缩短小单孢菌发酵周期和提高其发酵单位是降低生产成本最有效的手段。

技术实现思路

[0005]专利技术目的：为了克服现有技术中存在的不足，本专利技术提供一种西索米星生产用小单孢菌快速生长的固体培养基，使用添加微生物多糖的固体培养基替代传统斜面培养基作
为小单孢菌菌丝体生长的固体培养基，极大的缩短了发酵过程中种子培养的时间。
[0006]技术方案：为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案为：
[0007]本专利技术的第一个目的是，提供一种西索米星生产用依尼奥小单孢菌快速生长的固体培养基，所述培养基包括微生物多糖，所述微生物多糖包括黄原胶、结冷胶、胶质芽孢杆菌多糖、环状糊精其中任意至少一种。
[0008]微生物多糖，也称作微生物发酵多糖，是由细菌和真菌(包括霉菌和酵母菌)合成的食用胶，已经在食品工业中应用的有红曲霉多糖、黄杆菌胶、茁霉胶α
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葡聚糖和环状糊精。本专利技术使用微生物多糖替代了传统培养基中的可溶性淀粉和麦芽糖，一方面可以作为培养基中的碳源，以保证小单孢菌菌丝体的生长，另一方面微生物多糖胶质的状态更利于菌丝体的形成。属于微生物在碳源极度匮乏的环境下，缺乏可迅速利用的碳源，从而调动了一些环境适应因子，促进了胞外微生物多糖水解酶以及菌丝体生长分裂过程中关键酶的表达，从而使其生长速度相对于传统培养基的得到了明显提升。
[0009]可选的，在本专利技术的一种实施方式中，所述微生物多糖在配置培养基时，提前2
‑
3h溶于水中使其充分的溶解于水中。
[0010]可选的，在本专利技术的一种实施方式中，所述微生物多糖的浓度为5
‑
10g/L。
[0011]可选的，在本专利技术的一种实施方式中，所述微生物多糖的浓度为6
‑
9g/L。
[0012]可选的，在本专利技术的一种实施方式中，所述微生物多糖的浓度为7
‑
8g/L。
[0013]可选的，在本专利技术的一种实施方式中，所述微生物多糖的浓度为7.5g/L。
[0014]可选的，在本专利技术的一种实施方式中，所述微生物多糖的分子量为1500
‑
2000kDa。
[0015]可选的，在本专利技术的一种实施方式中，所述培养基还包括DL
‑
天冬素、蛋白胨、酵母粉。
[0016]可选的，在本专利技术的一种实施方式中，所述培养基还包括0.1
‑
0.3g/L DL
‑
天冬素、3
‑
10g/L蛋白胨、3
‑
10g/L酵母粉。
[0017]可选的，在本专利技术的一种实施方式中，所述培养基还包括磷酸盐、镁离子盐、碳酸钙及琼脂。
[0018]可选的，在本专利技术的一种实施方式中，所述培养基还包括1
‑
3g/L磷酸盐、1
‑
3g/L镁离子盐、1
‑
3g/L碳酸钙及20g/L琼脂。
[0019]可选的，在本专利技术的一种实施方式中，所述培养基还包括1g/L磷酸盐、1g/L镁离子盐、3g/L碳酸钙及20g/L琼脂。
[0020]可选的，在本专利技术的一种实施方式中，所述磷酸盐包括磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、磷酸三钾其中任意至少一种。在传统的一般培养基中，通常使用KNO3作为钾盐来源，但其对菌株的生长并没有明显的促进作用，且为危化品，所以本专利技术将其替换成了常用的磷酸钾盐类，如磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、磷酸三钾等，更加安全。
[0021]可选的，在本专利技术的一种实施方式中，所述镁离子盐包括硫酸镁、氯化镁其中任意至少一种。
[0022]可选的，在本专利技术的一种实施方式中，固体培养基的组成如下：微生物多糖(胶质芽孢杆菌多糖、黄原胶、结冷胶)、DL
‑
天冬素、蛋白胨、酵母粉、磷酸盐(磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、磷酸三钾)、镁离子盐(氯化镁、硫酸镁)、碳酸钙、琼脂。
[0023]本专利技术的第二个目的是，提供一种小单孢菌代谢生产西索米星的方法，该方法的
固体培养基采用如上述的培养基。
[0024]可选的，在本专利技术的一种实施方式中，所述小单孢菌代谢生产西索米星的方法包括以下步骤：
[0025]S1、将实验室保藏菌株西索米星产生菌涂布于上述的包含有微生物多糖的固体培养基，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种西索米星生产用小单孢菌快速生长的固体培养基，其特征在于，所述培养基包括微生物多糖，所述微生物多糖包括黄原胶、结冷胶、胶质芽孢杆菌多糖、环状糊精其中任意至少一种。2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述微生物多糖在配置培养基时，提前2
‑
3h溶于水中使其充分的溶解于水中。3.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述微生物多糖的分子量为1500
‑
2000kDa。4.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述微生物多糖的浓度为5
‑
10g/L。5.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述培养基还包括DL
‑
天冬素、蛋白胨、酵母粉。6.根据权利要求5所述的培养基，其特征在于，所述培养基还包括0.1
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：李会，张毅，史劲松，许正宏，徐建国，张晓梅，徐国强，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：