一种筛选和识别具有抗病毒属性的小分子的方法技术

本发明专利技术涉及医药领域，提供了一种筛选和识别具有抗病毒属性的小分子的方法，筛选和识别出大麻二酚(CBD)，可用于预防传染病如COVID

【技术实现步骤摘要】
一种筛选和识别具有抗病毒属性的小分子的方法


[0001]本专利技术专利涉及医药
，尤其涉及一种筛选和识别具有抗病毒属性的小分子的方法。

技术介绍

[0002]截至2021年中，全球有超过2.5亿的人感染新冠病毒(SARS
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CoV
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2病毒)。根据世界各国政府卫生部门和其他权威机构的数据，由新冠病毒引起的死亡病例超过500万。新出现的变种病毒，例如B.1.617和B.1.1.7变种新冠病毒在多个国家引发大规模的感染，例如在印度、日本、英国、秘鲁和巴西等国。
[0003]世界各国都在积极开发用于治疗COVID
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19的疫苗，有些疫苗已在许多国家广泛使用。但是疫苗的安全性、有效性、长期免疫性和供应链等问题阻碍了疫苗在社区中的大规模应用，特别是在一些低收入国家。治疗新冠病毒感染的有效药物更是有限。因此人们期望能利用一种快速的筛选和识别方法，找到更多具有抗病毒属性的小分子，可以用于制备治疗新冠病毒感染的药物。
[0004]英国开展的临床实验和世界卫生组织团队的实验证明，低剂量的地塞米松可以有效降低重症COVID
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19感染病人的死亡率。这也是到目前为止唯一被世界卫生组织推荐的有效防止COVID
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19感染病人死亡率的有效药物。虽然美国美国食品药品监督管理局(FDA)已批准紧急使用瑞德西韦用于治疗DOVID
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19病例，中国、日本、韩国和欧盟也推荐使用瑞德西韦治疗COVID
‑/>19感染，但瑞德西韦的使用虽可以减少住院时间，但不能有效减少死亡率。将现有药物(例如罗匹那韦
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利托那韦，法维拉韦，伊维菌素)用于治疗COVID
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19病毒感染的研发和临床实验也在进行中，但目前尚未有明确结论。
[0005]对COVID
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19感染病例的分析，长者更容易受到COVID
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19的感染，且接受感染后的死亡率高于其他年龄组的人。对COVID
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19感染机理的研究发现，COVID
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19可感染宿主的细胞并复制。通过分析基因型
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组织表达(GTEx，Genotype
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Tissue Expression)数据和生物信息学研究发现，COVID
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19肺炎感染可能是由新冠病毒与老化相关基因的相互作用引起的。研究发现男性在老化过程中TRIB3基因(Tribbles Homolog 3gene)的水平下降。对现有的肺细胞数据的分析显示，TRIB3基因在肺泡上皮细胞中有高的表达。现有文献也曾报道TRIB3基因可以降低丙型肝炎病毒的入侵和复制。因此研究人员认为在老年人中是TRIB3基因的损失导致了COVID
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19肺炎的高感染率。
[0006]目前主流的防止新冠病毒感染的方法主要是注射疫苗、保持社交距离、经常洗手和在公共场所佩戴口罩。如何能快速筛选和鉴别具有抗病毒活性的有效药物，是研究人员面临的难题和研究方向。

技术实现思路

[0007]近年来，大麻二酚(Cannabidiol，CBD)，从大麻中发现的一种主要的非精神类植物性大麻素，可以用于治疗各种的疾病，包括慢性疼痛、厌食、恶心、痉挛和多发性硬化症。由
于大麻二酚的抗炎作用，有研究人员曾建议将大麻二酚用于治疗COVID
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19肺炎，但具体的机理仍未知。
[0008]根据本专利技术的一个方面，本专利技术提供了一种利用大麻二酚上调TRIB3基因的表达，从而预防病毒感染的方法。
[0009]根据本专利技术的一个方面，本专利技术提供了一种利用大麻二酚上调TRIB3基因的表达，从而预防病毒感染的方法，其中的病毒感染是由SARS
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CoV
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2病毒引起的COVID
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19肺炎。
[0010]根据本专利技术的另一方面，本专利技术提供了一种利用大麻二酚上调TRIB3基因的表达,从而预防由SARS
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CoV
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2病毒引起的COVID
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19肺炎的方法，其中大麻二酚的优选剂量是5μM
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10μM。
[0011]根据本专利技术的另一方面，本专利技术提供了一种筛选和识别具有抗病毒属性的小分子的方法。
[0012]根据本专利技术的另一方面，本专利技术提供了一种筛选和识别具有抗病毒属性的小分子的方法，其中的具有抗病毒属性的小分子是大麻二酚。
【附图说明】
[0013]为了更清楚地说明本申请实施例中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本申请中记载的一些实施例，对于本领域普通技术人员来说，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。
[0014]图1为一种筛选和识别具有抗病毒属性的小分子的方法的流程图。
[0015]图2为CBD对于野生型小鼠胚胎成纤维细胞和核纤层蛋白A(Lamin A)609突变型小鼠胚胎成纤维细胞的扩散的效果图。其中野生型小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)和核纤层蛋白A(Lamin A)609突变型小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)在接受优选剂量(5μM)和高剂量(50μM)的CBD情况下的群体倍增水平显示，优选剂量可以明显增加两种小鼠胚胎成纤维细胞的群体倍增水平(PDL),而高剂量明显降低两种小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)的群体倍增水平(PDL)。
[0016]图3为通过RNA测序识别出TRIB3(Tribbles同源蛋白3)基因是一种与衰老相关的、可与病毒相互作用的基因，其在早衰Lamin A 609突变型小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)中降调，但经过CBD处理，该基因在野生型小鼠胚胎成纤维细胞和核纤层蛋白A(Lamin A)609突变型小鼠胚胎成纤维细胞都有上调。图表显示了在接受CBD处理后，两种小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)中的TRIB3基因的FPKM(Fragments Per Kilobase of transcript per Million mapped reads，每千个碱基的转录每百万映射读取的fragments)的数据结果。
[0017]图4为经过两个月CBD处理的Lamin A 609突变型小鼠的肺组织中的TRIB3基因的qPCR结果与野生型小鼠及Lamin A 609对照组的TRIB3基因的qPCR结果的对比效果。
[0018]图5为经过不同剂量CBD处理的Huh7肝细胞的细胞裂解液的病毒基因拷贝数目的检测结果。
[0019]图6为经过不同剂量CBD处理的Huh7肝细胞的上清液的病毒基因拷贝数目的检测结果。
[0020]图7为经CBD处理的人结肠腺癌细胞(Caco
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2)的SARS
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CoV
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2伪病毒感染的荧光素
酶检本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种确定和检测对可以和病毒相互作用的基因进行调控的具有抗病毒属性的小分子方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：步骤1：用含有5％的二甲基亚砜(DMSO)和5％的聚乙二醇(PEG)的无菌生理盐水溶解所述小分子，得到小分子的溶解液；步骤2：用所述小分子的溶解液对实验用小鼠进行处理；步骤3：从经处理的小鼠组织中准备提取RNA；步骤4：RNA提取、DNase消化、逆转录和qPCR检测；步骤5：采用RNA测序的方法对可以和病毒相互作为的基因表达进行检测。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1中的小分子是大麻二酚(CBD)。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤5中的可以和病毒相互作用的基因是TRIB3基因。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述大麻二酚可以上调TRIB3基因的表达，从而可以抑制和预防病毒感染。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的病毒感染是由nCoV病毒引起的COVID
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19肺炎。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述步骤2中小分子...

【专利技术属性】
技术研发人员：周中军，黄常健，朱軒，王雪莱，周婕，李存，英亮，张剑，
申请(专利权)人：飞象生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：