一种对水稻香味品质进行遗传改良的方法技术

本发明专利技术公开了一种对水稻香味品质进行遗传改良的方法，包含杂交育种与诱变育种步骤，本发明专利技术通过将杂交育种和诱变育种相结合的方式，改变了粤丰B基因组内多种基因的组合方式和突变型，以此来改变香味基因的表达环境，通过筛选，在不改变香味基因的基础上对水稻的香味品质进行了遗传改良，实现了香味物质含量的显著提高，为香稻和超级稻的育种提供了基础材料。料。

【技术实现步骤摘要】
一种对水稻香味品质进行遗传改良的方法


[0001]本专利技术涉及水稻改良
，特别涉及一种对水稻香味品质进行遗传改良的方法。

技术介绍

[0002]现有的基因编辑技术或者SSR标记辅助育种方法对于水稻香味基因Badh2的定向突变有极大的帮助，但是影响水稻香味基因表达的不仅仅是Badh2基因，还包括基因组内大量的其他基因或是与Badh2基因连锁的基因，部分水稻品种虽然缺失Badh2基因功能，但是由于其他基因的干扰或补偿表达导致最终的2
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AP表达量较低，香味较淡。在这种情况下，基因编辑技术或者SSR标记辅助育种方法仅针对Badh2基因进行定向遗传改造已无太大作用，需要采用其他方法对香味较淡的水稻品种进行改良，来提升水稻的香味品质。

技术实现思路

[0003]本专利技术所要解决的技术问题：解决现有淡香型水稻无法提高香味的问题。
[0004]为解决上述技术问题，本专利技术提供以下的技术方案：
[0005]一种对水稻香味品质进行遗传改良的方法，具体步骤如下：
[0006](a)将香味浓的水稻品种与香味淡的水稻品种杂交获得F1代；
[0007](b)将F1代自交后获得F2代种子，将F2代种子种植后采用KOH法鉴定是否含香味，将含香味的植株种植至收获，获得F3代种子；
[0008](c)将F3代种子采用清水冲洗灰尘，25℃恒温箱内清水浸泡36h，期间定期换水；
[0009](d)将浸泡后的F3代种子采用甲基磺酸乙酯工作液浸泡，暗室操作，用锡箔纸将瓶子包好，使其密封、不透光，放入摇床125rpm，22℃，晃动22h；
[0010](e)倒出EMS和种子的混合液，自来水充分冲洗去除EMS；
[0011](f)将冲洗好的种子用白色预湿的毛巾包好，保证水分适中，放在26℃恒温条件下开始催芽，定期观察种子发芽情况；
[0012](g)发芽后将F3代种子播种于大田，常规种植管理，采用KOH法和籽粒咀嚼法鉴定筛选香味浓的水稻个体，种植至收获，得F4代；
[0013](h)将F4代重复步骤(g)，直至F8代即可获得稳定遗传的浓香型水稻品种。
[0014]优选地，所述甲基磺酸乙酯工作液的体积浓度为0.82％。
[0015]优选地，所述甲基磺酸乙酯工作液的配制方法为：向1750mL磷酸盐缓冲液中加入14.35mL甲基磺酸乙酯，使用前2h配制，暗室搅拌1.5h，停止l0min，继续搅拌20min，共计2h即得。
[0016]优选地，所述磷酸盐缓冲液为0.01M PBS。
[0017]优选地，所述香味浓的水稻品种为稻花香2号，所述香味淡的水稻品种为粤丰B。
[0018]优选地，还包括步骤(i):将F8代种植后取叶片进行PCR鉴定，筛选香味基因为纯合子的单株进行自交制种，即得浓香型水稻品种。
[0019]本专利技术获得的有益效果：
[0020]本专利技术通过将杂交育种和诱变育种相结合的方式，改变了粤丰B基因组内多种基因的组合方式和突变型，以此来改变香味基因的表达环境，通过筛选，在不改变香味基因的基础上对水稻的香味品质进行了遗传改良，实现了香味物质含量的显著提高，为香稻和超级稻的育种提供了基础材料。
具体实施方式
[0021]下面通过对实施例的描述，对本专利技术的具体实施方式作进一步详细的说明，以帮助本领域的技术人员对本专利技术的专利技术构思、技术方案有更完整、准确和深入的理解。
[0022]实施例1：采用如下方法对粤丰B进行香味品质改良，具体步骤为：
[0023](a)将浓香型稻花香2号与淡香型粤丰B杂交获得F1代；
[0024](b)将F1代自交后获得F2代种子，将F2代种子种植后采用KOH法鉴定是否含香味，将含香味的植株种植至收获，获得F3代种子；
[0025](c)将F3代种子采用清水冲洗灰尘，25℃恒温箱内清水浸泡36h，期间定期换水；
[0026](d)将浸泡后的F3代种子采用体积浓度为0.82％的甲基磺酸乙酯工作液浸泡，暗室操作，用锡箔纸将瓶子包好，使其密封、不透光，放入摇床125rpm，22℃，晃动22h；所述甲基磺酸乙酯工作液的配制方法为：向1750mL 0.01M PBS中加入14.35mL甲基磺酸乙酯，使用前2h配制，暗室搅拌1.5h，停止l0min，继续搅拌20min，共计2h即得。
[0027](e)倒出EMS和种子的混合液，自来水充分冲洗去除EMS；
[0028](f)将冲洗好的种子用白色预湿的毛巾包好，保证水分适中，放在26℃恒温条件下开始催芽，定期观察种子发芽情况；
[0029](g)发芽后将F3代种子播种于大田，常规种植管理，采用KOH法和籽粒咀嚼法鉴定筛选香味浓的水稻个体，种植至收获，得F4代；
[0030](h)将F4代重复步骤(g)，直至F8代即可获得稳定遗传的浓香型水稻品种。
[0031](i)将F8代种植后取叶片进行PCR鉴定，筛选香味基因Badh2为纯合子的单株进行自交制种，即得浓香型水稻品种。
[0032]对照实施例1：采用CRISPR/Cas9技术对粤丰B进行香味品种改良。
[0033]将实施例1及对照实施例1收获的籽粒分别测定香味物质2
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AP的含量，结果如下：
[0034]表1不同改良方法对籽粒内香味物质含量的影响
[0035]组别改良前(ng/g)改良后(ng/g)实施例173.3
±
5.8173.4
±
19.5对照实施例177.6
±
6.388.4
±
9.4
[0036]上述结果表明，本专利技术能够有效提升淡香型水稻品种的香味品质，提高主要香味物质的含量。
[0037]以上实施例仅为说明本专利技术的技术思想，不能以此限定本专利技术的保护范围，凡是按照本专利技术提出的技术思想，在技术方案基础上所做的任何改动，均落入本专利技术保护范围之内；本专利技术未涉及的技术均可通过现有技术加以实现。
本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种对水稻香味品质进行遗传改良的方法，其特征在于，具体步骤如下：(a)将香味浓的水稻品种与香味淡的水稻品种杂交获得F1代；(b)将F1代自交后获得F2代种子，将F2代种子种植后采用KOH法鉴定是否含香味，将含香味的植株种植至收获，获得F3代种子；(c)将F3代种子采用清水冲洗灰尘，25℃恒温箱内清水浸泡36h，期间定期换水；(d)将浸泡后的F3代种子采用甲基磺酸乙酯工作液浸泡，暗室操作，用锡箔纸将瓶子包好，使其密封、不透光，放入摇床125rpm，22℃，晃动22h；(e)倒出EMS和种子的混合液，自来水充分冲洗去除EMS；(f)将冲洗好的种子用白色预湿的毛巾包好，保证水分适中，放在26℃恒温条件下开始催芽，定期观察种子发芽情况；(g)发芽后将F3代种子播种于大田，常规种植管理，采用KOH法和籽粒咀嚼法鉴定筛选香味浓的水稻个体，种植至收获，得F4代；(h)将F4代重复步骤(g)，直至F8代即可获得稳定遗传的浓香型水稻品种。2.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：乔保建，任代胜，王思哲，杨家来，
申请(专利权)人：安徽袁粮种业科学研究院，
类型：发明
国别省市：