一种防控地下害虫的生物有机肥、制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种防控地下害虫的生物有机肥、制备方法和应用，涉及生物有机肥料领域，解决了现有技术中采用化学农药防控害虫，存在农药残留及环境污染的问题。该方法包括如下步骤：制备枯草芽孢杆菌WSWFJ44菌粉，制备白僵菌WSWFJ49和绿僵菌WSWFJ48孢子粉；制备油枯型有机肥；将枯草芽孢杆菌WSWFJ44菌粉、白僵菌WSWFJ49和绿僵菌WSWFJ48孢子粉与油枯型有机肥复配，制得防控地下害虫的生物有机肥；枯草芽孢杆菌WSWFJ44菌粉中有效活菌数的量不小于1000亿/克，白僵菌WSWFJ49和绿僵菌WSWFJ48孢子粉中白僵菌WSWFJ49和绿僵菌WSWFJ48的有效活菌量不小于100亿/克。本发明专利技术的生物有机肥，既能防治地下害虫，同时也能使土壤有益微生物群落种群数量增，还可大大减少化学农药的施用量，减少环境污染，提高作物安全性。提高作物安全性。

【技术实现步骤摘要】
一种防控地下害虫的生物有机肥、制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及生物有机肥料
，尤其涉及一种防控地下害虫的生物有机肥、制备方法和应用。

技术介绍

[0002]蛴螬是鞘翅目金龟甲总科幼虫的统称，同时也是世界上公认的地下害虫，可危害多种植物，是近几年来危害最重，给农业生产造成巨大损失的一类地下害虫。蛴螬终年生活在土壤中，主要危害麦类、玉米、薯类、豆类、花生等大田作物，同时对烟草的危害也不容小觑，蛴螬对各类作物的危害，主要表现为取食萌发的种子和嫩根、咬断麦苗根茎、直接咬食花生嫩果或马铃薯、甘薯、甜菜的块茎和块根等，不仅造成作物减产，而且伤口容易引起病菌的侵染。据调查统计，植物地下部分受害中86％是由蛴螬危害造成的。
[0003]蛴螬是危害烟草的一种重要地下害虫，在云南烟区发生严重，对云南烟草产业造成严重影响。小地老虎，又名土蚕，切根虫，经历卵，幼虫，蛹，成虫。年发生代数随各地气候不同而异，对农、林木幼苗危害很大，轻则造成缺苗断垄，重则毁种重播。对烟草的种植受到较大影响。
[0004]20世纪50、60年代，地下害虫防治主要用有机氯杀虫剂和有机磷杀虫剂，但这两种药剂毒性高，残留高，对人、畜不安全，现已被禁用。近些年，蛴螬化学防治的研究也越来越多，所用化学药剂主要有辛硫磷、甲基异柳磷、丁硫克百威、吡虫啉、毒死蜱、敌百虫以及生物农药印楝素和除虫菊素等。为配合幼虫的防治，金龟子成虫的防治也同样重要。成虫发生季节主要采用的防治药剂有氧乐果、敌百虫、毒死蜱、高效氯氰菊酯等。目前.化学防治仍然是一种广泛应用的防治方法，特别是在蛴螬大量发生而其他防治方法又不能立即奏效的情况下是非常有效的，化学防治能在短时间内将蛴螬的种群密度降低到经济允许水平以下。但由于蛴螬在地下危害，加之土壤的隔离作用，使得蛴螬对农药的使用方法、使用剂量和使用时期及残留都提出了很高的要求。
[0005]大量研究表明，随着化学农药的长期使用，农药残留及环境污染问题愈发严重，且长期使用化学农药会导致土壤中适宜烟株生长的微生物群落种群密度降低，影响土壤微生物群落的平衡，导致烟株的生长发育受到不同程度的影响，随着高毒化学农药的逐步禁用，防治蛴螬的高效药剂越来越少，且剂型单一，蛴螬的抗药性逐渐增强，因此，急需研发新的防治药剂。
[0006]生物防控及生态防控在近几年得到广泛的重视，生物防控主要是利用杀虫微生物菌剂侵染地下害虫，使之能够快速寄生于害虫身上，最后致死害虫的过程。考虑到环境因素、农药残留等一系列问题，防治蛴螬最理想的方法是生物防治。因此，急需研究开发新的防治地下害虫的微生物菌剂。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的是提出一种防控地下害虫的生物有机肥、制备方法和应用，解决了
现有技术中采用化学农药防控害虫，存在农药残留及环境污染的技术问题。本专利技术优选技术方案所能产生的诸多技术效果详见下文阐述。
[0008]为实现上述目的，本专利技术提供了以下技术方案：
[0009]本专利技术防控地下害虫的生物有机肥的制备方法，包括如下步骤：
[0010]制备枯草芽孢杆菌WSWFJ44菌粉，制备白僵菌WSWFJ49和绿僵菌WSWFJ48孢子粉；
[0011]通过发酵制备油枯型有机肥；
[0012]将制备的枯草芽孢杆菌WSWFJ44菌粉、白僵菌WSWFJ49和绿僵菌WSWFJ48孢子粉与油枯型有机肥复配，制得防控地下害虫的生物有机肥；
[0013]其中，枯草芽孢杆菌WSWFJ44菌粉中有效活菌数的量不小于1000亿/克，白僵菌WSWFJ49和绿僵菌WSWFJ48孢子粉中白僵菌WSWFJ49和绿僵菌WSWFJ48的有效活菌量不小于100亿/克。
[0014]本专利技术的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)，其编号为WSWFJ44，保藏登记号为CGMCC No.20144，保藏日期2020年06月28日，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
[0015]本专利技术的白僵菌(Beauveria sp.)，其编号为WSWFJ49，保藏登记号为CGMCC No.20213，保藏日期2020年06月28日，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
[0016]本专利技术的绿僵菌(Metarhizium sp.)，其编号为WSWFJ48，保藏登记号为CGMCC No.19926，保藏日期2020年06月28日，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
[0017]根据一个优选实施方式，复配过程中，枯草芽孢杆菌WSWFJ44菌粉、白僵菌WSWFJ49和绿僵菌WSWFJ48孢子粉的重量比为2∶0.5∶0.5。
[0018]根据一个优选实施方式，枯草芽孢杆菌WSWFJ44菌粉的制备过程包括如下步骤：
[0019]菌种活化：将﹣80℃下保存的枯草芽孢杆菌WSWFJ44菌株在LB固体培养基上活化12h～16h，得活化的菌株；
[0020]种子液制备：用无菌接种环刮取一环活化的菌株接种到50ml LB液体培养基中，在温度为36.5℃
‑
37.5℃、转速为160rpm/min条件下培养24h，得种子液；
[0021]发酵液制备：按照菌种、培养液体积比为1∶120的比例将所得的种子液接入到车间发酵料培养基中，在温度为36.5℃
‑
37.5℃，转速为120rpm/min条件下培养24h
‑
36h，得发酵液，即为枯草芽孢杆菌WSWFJ44菌悬液，并且枯草芽孢杆菌WSWFJ44菌悬液的有效活菌数为20.0
×
108cfu/g以上；
[0022]将所得发酵液离心后添加吸附保护剂，再将添加吸附保护剂的发酵液转入喷粉设备得到枯草芽孢杆菌WSWFJ44菌粉，并且枯草芽孢杆菌WSWFJ44菌粉中有效活菌数的量不小于1000亿/克。
[0023]根据一个优选实施方式，菌种活化过程中，LB固体培养基包括如下浓度的成分：细菌学蛋白胨10g/L、酵母提取粉5g/L、氯化钠10g/L、琼脂粉24g/L；种子液制备过程中，LB液体培养基包括如下浓度的成分：细菌学蛋白胨10g/L、酵母提取粉5g/L、氯化钠10g/L。
[0024]根据一个优选实施方式，发酵液制备过程中，发酵料培养基包括如下质量百分数的成分：黄豆粉1.0％
‑
1.6％、蔗糖0.1％
‑
0.5％、蛋白胨0.2％
‑
0.6％、玉米粉0.2％
‑
0.6％、
碳酸钙0.3％
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0.9％、鱼粉0.1％
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0.3％、硫酸铵0.01％
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0.08％、硫酸镁0.02％
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0.05％、磷酸二氢钾0.01％
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0.04％、磷酸氢二钾本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种防控地下害虫的生物有机肥的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：制备枯草芽孢杆菌WSWFJ44菌粉，制备白僵菌WSWFJ49和绿僵菌WSWFJ48孢子粉；通过发酵制备油枯型有机肥；将制备的枯草芽孢杆菌WSWFJ44菌粉、白僵菌WSWFJ49和绿僵菌WSWFJ48孢子粉与油枯型有机肥复配，制得防控地下害虫的生物有机肥；其中，枯草芽孢杆菌WSWFJ44菌粉中有效活菌数的量不小于1000亿/克，白僵菌WSWFJ49和绿僵菌WSWFJ48孢子粉中白僵菌WSWFJ49和绿僵菌WSWFJ48的有效活菌量不小于100亿/克。2.根据权利要求1所述的防控地下害虫的生物有机肥的制备方法，其特征在于，复配过程中，枯草芽孢杆菌WSWFJ44菌粉、白僵菌WSWFJ49和绿僵菌WSWFJ48孢子粉的重量比为2∶0.5∶0.5。3.根据权利要求1或2所述的防控地下害虫的生物有机肥的制备方法，其特征在于，枯草芽孢杆菌WSWFJ44菌粉的制备过程包括如下步骤：菌种活化：将﹣80℃下保存的枯草芽孢杆菌WSWFJ44菌株在LB固体培养基上活化12h～16h，得活化的菌株；种子液制备：用无菌接种环刮取一环活化的菌株接种到50ml LB液体培养基中，在温度为36.5℃
‑
37.5℃、转速为160rpm/min条件下培养24h，得种子液；发酵液制备：按照菌种、培养液体积比为1∶120的比例将所得的种子液接入到车间发酵料培养基中，在温度为36.5℃
‑
37.5℃，转速为120rpm/min条件下培养24h
‑
36h，得发酵液，即为枯草芽孢杆菌WSWFJ44菌悬液，并且枯草芽孢杆菌WSWFJ44菌悬液的有效活菌数为20.0
×
108cfu/g以上；将所得发酵液离心后添加吸附保护剂，再将添加吸附保护剂的发酵液转入喷粉设备得到枯草芽孢杆菌WSWFJ44菌粉，并且枯草芽孢杆菌WSWFJ44菌粉中有效活菌数的量不小于1000亿/克。4.根据权利要求3所述的防控地下害虫的生物有机肥的制备方法，其特征在于，菌种活化过程中，LB固体培养基包括如下浓度的成分：细菌学蛋白胨10g/L、酵母提取粉5g/L、氯化钠10g/L、琼脂粉24g/L；种子液制备过程中，LB液体培养基包括如下浓度的成分：细菌学蛋白胨10g/L、酵母提取粉5g/L、氯化钠10g/L。5.根据权利要求3所述的防控地下害虫的生物有机肥的制备方法，其特征在于，发酵液制备过程中，发酵料培养基包括如下质量百分数的成分：黄豆粉1.0％
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1.6％、蔗糖0.1％
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0.5％、蛋白胨0.2％
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0.6％、玉米粉0.2％
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0.6％、碳酸钙0.3％
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0.9％、鱼粉0.1％
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0.3％、硫酸铵0.01％
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0.08％、硫酸镁0.02％
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0.05％、磷酸二氢钾0.01％
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0.04％、磷酸氢二钾0.02％
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0.05％、硫酸锰0.01％
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0.04％、氢氧化钠0.01％
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0.04％、氯化钠0.02％
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0.03％、消泡剂0.5％
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1.5％，余量为水，用盐酸及氢氧化钠调节pH至6.8
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7.5。6.根据权利要求1或2所述的防控地下害虫的生物有机肥的制备方法，其特征在于，白僵菌WSWFJ49和绿僵菌WSWFJ48孢子粉的制备过程包括如下步骤：白僵菌WSWF...

【专利技术属性】
技术研发人员：毛明林，李诚，赵崇钧，杨润霞，蔺以享，郭绍青，潘菲，
申请(专利权)人：云南云叶化肥股份有限公司，
类型：发明
国别省市：