抗菌肽及其制备和应用制造技术

本发明专利技术涉及一种抗菌多肽及其制备和应用。所述抗菌多肽的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。所述抗菌多肽的制备方法包括采用热带假丝酵母和地衣芽孢杆菌对克氏原螯虾甲壳进行发酵的步骤。本发明专利技术提供的所述抗菌肽，是采用热带假丝酵母和地衣芽孢杆菌对克氏原螯虾甲壳进行发酵制备，能有效抑制弧菌，将其作为饲料添加剂添加到基础饲料中进行水产养殖，可有效降低弧菌对养殖动物带来的危害。并且，发明专利技术人发现，本发明专利技术的抗菌肽对其他革兰氏阴性菌，例如爱德华氏菌、无乳链球菌，也有明显的抑制作用，也可用于其他革兰氏阴性菌感染所致病害的防治。防治。防治。

【技术实现步骤摘要】
抗菌肽及其制备和应用


[0001]本专利技术涉及水产养殖
，涉及一种抗菌肽及其制备和应用。

技术介绍

[0002]海水养殖鱼类、贝类及甲壳类等经济动物的流行性和暴发性死亡多是由弧菌引起，主要包括副溶血弧菌、灿烂弧菌、鳗弧菌、溶藻弧菌、哈维氏弧菌、霍乱弧菌、创伤弧菌、嗜水气单胞菌等。弧菌病给水产养殖业造成巨大经济损失，并且该病还会导致野生海水鱼类、贝类及甲壳类动物的死亡，进而威胁海洋自然生物资源。
[0003]目前，抗生素的使用仍是解决水产养殖动物弧菌病的重要手段，它能在短期内起到良好的治疗效果，极大地降低养殖业的经济损失，但由于抗生素在疾病防治上的广泛和长期使用，耐药性弧菌的种类及数量不断攀升，对人类食品安全造成隐患。
[0004]据报道，从细菌、植物、昆虫、鱼类、软体动物、甲壳类动物、两栖动物、哺乳动物来源的抗菌肽虽种类众多，但是其抑菌效果并不理想。因此，如何为弧菌的抑制提供有效手段是亟待解决的技术问题。

技术实现思路

[0005]基于上述
技术介绍
，本专利技术的主要目的是提供一种抗菌多肽，该抗菌多肽能有效抑制弧菌。
[0006]本专利技术的目的可以通过以下技术方案实现：
[0007]一种抗菌多肽，所述抗菌多肽的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。
[0008]如上所述的抗菌多肽的制备方法，所述制备方法包括采用热带假丝酵母和地衣芽孢杆菌对克氏原螯虾甲壳进行发酵的步骤。
[0009]在其中一个实施例中，所述热带假丝酵母包含热带假丝酵母ACCC20005。
[0010]在其中一个实施例中，所述地衣芽孢杆菌包含地衣芽孢杆菌ACCC11091。
[0011]在其中一个实施例中，所述制备方法包括：用克氏原螯虾甲壳制备发酵培养基，将所述热带假丝酵母和地衣芽孢杆菌接种至所述发酵培养基中进行发酵。
[0012]在其中一个实施例中，所述发酵培养基的制备步骤包括：
[0013]获取克氏原螯虾的甲壳粉，与水混合，匀质，灭菌，制备甲壳均质液；
[0014]混合所述甲壳均质液和培养基质，制备所述发酵培养基；
[0015]所述培养基质包含蛋白胨、酵母提取物、氯化钠、葡萄糖以及水。
[0016]在其中一个实施例中，每1L所述甲壳均质液对应的所述甲壳粉的用量为80g～120g。
[0017]在其中一个实施例中，匀质的条件包括：温度为75℃～85℃，压力为20MPa～30MPa，转速为2500rpm～3500rpm，时长为5min～15min。
[0018]在其中一个实施例中，每1L所述培养基质对应的所述甲壳均质液的用量为80mL～120mL。
[0019]在其中一个实施例中，每1L所述培养基质包含12g～18g所述蛋白胨、4.5g～5.5g所述酵母提取物、4.5g～5.5g所述氯化钠以及12g～18g所述葡萄糖。
[0020]在其中一个实施例中，所述甲壳粉为过250目筛～350目筛的甲壳粉。
[0021]在其中一个实施例中，发酵的条件包括：温度为28℃～32℃，时长为40h～50h。
[0022]在其中一个实施例中，发酵的过程中，所述热带假丝酵母的接种浓度为(1～3)
×
10
10
cfu/mL，或/和所述地衣芽孢杆菌的接种浓度为(2～4)
×
10
10
cfu/mL。
[0023]在其中一个实施例中，所述制备方法还包括对发酵所得发酵产物进行纯化的步骤，纯化的步骤包括对所述发酵产物进行离心并对所得上清液进行超滤。
[0024]在其中一个实施例中，所述制备方法还包括对超滤所得滤液进行干燥的步骤，干燥的方式采用喷雾干燥。
[0025]一种饲料，所述饲料包含饲料添加剂以及基础饲料，所述饲料添加剂包含如上所述的抗菌肽。
[0026]在其中一个实施例中，每1kg所述饲料包含3g～8g所述抗菌肽。
[0027]与现有技术相比，本专利技术具备如下有益效果：
[0028]本专利技术提供一种抗菌肽，该抗菌肽是采用热带假丝酵母和地衣芽孢杆菌对克氏原螯虾甲壳进行发酵制备，能有效抑制弧菌，将其作为饲料添加剂添加到基础饲料中进行水产养殖，可有效降低弧菌对养殖动物带来的危害。并且，专利技术人发现，本专利技术的抗菌肽对其他革兰氏阴性菌(例如爱德华氏菌、无乳链球菌)也有明显的抑制作用，也可用于其他革兰氏阴性菌感染所致病害的防治。本专利技术提供的抗菌肽，可以增大细菌细胞膜的通透性，更容易进入菌体，从而作用于菌内靶点。
附图说明
[0029]为了更清楚地说明本专利技术具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0030]图1为本专利技术一个实施例所得抗菌肽养殖效果验证所在养殖池塘图；
[0031]图2为本专利技术一个实施例所得抗菌肽应用的养殖塘鲺的解剖图。
具体实施方式
[0032]为了便于理解本专利技术，下面将对本专利技术进行更详细的描述。但是，应当理解，本专利技术可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施方式或实施例。相反地，提供这些实施方式或实施例的目的是使对本专利技术的公开内容的理解更加透彻全面。
[0033]除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本专利技术的
的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本专利技术的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施方式或实施例的目的，不是旨在于限制本专利技术。本文所使用的术语“和/或”的可选范围包括两个或两个以上相关所列项目中任一个，也包括相关所列项目的任意的和所有的组合，所述任意的和所有的组合包括任意的两个相关所列项目、任意的更多个相关所列项目、或者全部相关所列项目的组合。
[0034]本专利技术中，“第一方面”、“第二方面”、“第三方面”等仅用于描述目的，不能理解为指示或暗示相对重要性或数量，也不能理解为隐含指明所指示的技术特征的重要性或数量。
[0035]本专利技术中，以开放式描述的技术特征中，包括所列举特征组成的封闭式技术方案，也包括包含所列举特征的开放式技术方案。
[0036]本专利技术中，涉及到数值区间，如无特别说明，则包括数值区间的两个端点。
[0037]本专利技术中涉及的百分比含量，如无特别说明，对于固液混合和固相
‑
固相混合均指质量百分比，对于液相
‑
液相混合指体积百分比。
[0038]本专利技术中涉及的百分比浓度，如无特别说明，均指终浓度。所述终浓度，指添加成分在添加该成分后的体系中的占比。
[0039]本专利技术中的温度参数，如无特别限定，既允许为恒温处理，也允许在一定温度区间内进行处理。所述的恒温处理允许温度在仪器控制的精度范围内进行波动。
[0040]本专利技术中的克氏原螯虾(P本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗菌多肽，其特征在于，所述抗菌多肽的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。2.权利要求1所述的抗菌多肽的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括采用热带假丝酵母和地衣芽孢杆菌对克氏原螯虾甲壳进行发酵的步骤。3.根据权利要求2所述的抗菌多肽的制备方法，其特征在于，所述热带假丝酵母包含热带假丝酵母ACCC20005，或/和，所述地衣芽孢杆菌包含地衣芽孢杆菌ACCC11091。4.根据权利要求2或者3所述的抗菌多肽的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：用克氏原螯虾甲壳制备发酵培养基，将所述热带假丝酵母和地衣芽孢杆菌接种至所述发酵培养基中进行发酵。5.根据权利要求4所述的抗菌多肽的制备方法，其特征在于，所述发酵培养基的制备步骤包括：获取克氏原螯虾的甲壳粉，与水混合，匀质，灭菌，制备甲壳均质液；混合所述甲壳均质液和培养基质，制备所述发酵培养基；所述培养基质包含蛋白胨、酵母提取物、氯化钠、葡萄糖以及水。6.根据权利要求5所述的抗菌多肽的制备方法，其特征在于，每1L所述甲壳均质液对应的所述甲壳粉的用量为80g～120g；或/和，匀质的条件包括：温度为75℃～85℃，压力为20MPa～30MPa，转速为2500rpm～3500rpm，时长为5min～15min；或/和，每1L所述培养基质对应的所述甲...

【专利技术属性】
技术研发人员：权利要求书一页说明书七页序列表一页附图一页，
申请(专利权)人：广东联鲲集团有限公司，
类型：发明
国别省市：