血栓弹力图激活剂F质控品及其制备方法技术

本发明专利技术涉及凝血检验质量控制技术领域，具体涉及血栓弹力图激活剂F质控品及其制备方法。血栓弹力图激活剂F质控品，其原料包括由肝素抗凝血浆基质液和肝素抗凝纤维蛋白原基质液组成的凝固主体以及冻干保护剂；所述冻干保护剂中含有四氢嘧啶。本技术方案可以解决现有技术中尚无适用于血小板图检测系统的质控品的技术问题，提供了一种能模拟临床实际检测环境，涵盖临床正常凝血、异常凝血的血栓弹力图激活剂F质控品。用户可方便对血小板图检测系统进行质量控制或检测系统评估，保证临床样本检测结果的可靠性。本发明专利技术以猪血为主要原料，来源充足，成本较低；本发明专利技术制备工艺简单、产品稳定、易于工业化生产。易于工业化生产。易于工业化生产。

【技术实现步骤摘要】
血栓弹力图激活剂F质控品及其制备方法


[0001]本专利技术涉及凝血检验质量控制
，具体涉及血栓弹力图激活剂F质控品及其制备方法。

技术介绍

[0002]血栓弹力图是由血栓弹性描记仪描记的凝血动态过程曲线，是一种能动态分析凝血形成和纤维蛋白溶解全过程的曲线图。血栓弹力图于1948年由Hartert专利技术，20世纪80年代中后期开始应用于临床，现已成为围手术期监测凝血功能的重要指标，并已广泛应用于肝移植、心脏外科、肾移植、创伤外科等诸多领域，指导围手术期的血液输注、溶栓及抗凝治疗等。血栓弹力图仪可联合激活剂F(主要含巴曲酶、十三因子等)、ADP(二磷酸腺苷)、AA(花生四烯酸)等激活剂绘制出血小板图，监测纤维蛋白原、二磷酸腺苷、花生四烯酸等途径，评估抗血小板药物疗效，临床上可快速识别和发现创伤中高危患者。
[0003]由检测设备(血栓弹力图仪)和配套检测试剂共同组成血小板图检测系统，对临床样本进行检测。在用血小板图检测系统检测临床样本前，需先用合适的质控品评估该检测系统(设备+配套试剂)是否处于正常状态，以保证临床样本检测结果的可靠性。目前市场上尚无稳定、可靠的血小板图检测系统质控品，因此开发出适用于该检测系统的质控品十分必要。

技术实现思路

[0004]本专利技术意在提供血栓弹力图激活剂F质控品，以解决现有技术中尚无适用于血小板图检测系统的质控品的技术问题。
[0005]为达到上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0006]血栓弹力图激活剂F质控品，其原料包括由肝素抗凝血浆基质液和肝素抗凝纤维蛋白原基质液组成的凝固主体以及冻干保护剂；所述冻干保护剂中含有四氢嘧啶。
[0007]本方案还提供了一种血栓弹力图激活剂F质控品的制备方法，包括以下依次进行的步骤：
[0008]S1：将肝素抗凝血浆基质液和肝素抗凝纤维蛋白原基质液混合，并调整MA值至第一设定范围，获得凝固主体；
[0009]S2：在凝固主体中加入冻干保护剂，并调整MA值至第二设定范围，获得待冻干品；
[0010]S3：待冻干品经冻干处理后获得血栓弹力图激活剂F质控品。
[0011]本方案的原理及优点是：质控品通常是使用在实际样品检测之前，以确定检测系统的稳定性，从而保证实际样品检测结果的准确性。目前市场尚无适用于血小板图检测系统的质控品，本方案的质控品可以实现对包括血栓弹力图仪、激活剂F形成的血小板图检测系统的质量控制。
[0012]现有技术中，制备血栓弹力图仪用质控品，通常是将抗凝猪血分离为纤维蛋白原基质液和血浆基质液，从而调配出不同的性能的质控品。并且为了保证质控品的长期有效
性和运输的方便性，我们通常在质控品中加入pH缓冲剂、蛋白质保护剂和防腐剂，然后再进行冻干处理。但是，专利技术人在制作血栓弹力图激活剂F质控品的时候，发现按照常规方式制作，获得的质控的稳定性欠佳。主要表现在产品检测结果波动较大(即CV值较大)，产品稳定性较差(详见对比例1的实验数据)。专利技术人通过对质控品配方案进行大量的筛选和改进，发现额外计入四氢嘧啶作为溶液稳定剂，获得的质控品更加稳定，可以满足应用需求(详见对比例2的实验数据)。
[0013]进一步，所述冻干保护剂和所述凝固主体的体积比为25.1～65.1：1000。采用上述比例的冻干保护剂和凝固主体，可保证质控品质量稳定。
[0014]进一步，所述四氢嘧啶和所述凝固主体的用量比为10～20mmol：1000ml。
[0015]四氢嘧啶的用量对于保证质控品的稳定性非常关键，尤其当1M四氢嘧啶溶液用量为每1000ml凝固主体10～20mmol四氢嘧啶时，其检测结果的CV值(不精密度)较小(详见对比例3的实验数据)，产品可在2～8℃稳定保存12个月。
[0016]进一步，所述冻干保护剂包括体积比为0.5～1.5：1～3：0.01：1～2的pH缓冲剂、蛋白质保护剂、防腐剂和四氢嘧啶溶液。
[0017]采用上述技术方案，蛋白质保护剂起到保护质控品中的蛋白质物质的作用；pH缓冲剂可为质控品中的各种生物分子提供稳定的pH环境以及维持一定的盐离子浓度，维持质控品中的生物分子活性状态；防腐剂的使用可以防止质控品腐败，延长质控品的保质期。
[0018]进一步，所述蛋白质保护剂包括牛血清白蛋白、蔗糖、海藻糖、甘氨酸、甘露醇和乳糖中的至少一种；所述pH缓冲剂为Hepes缓冲剂、Tris
‑
HCl缓冲剂和磷酸盐缓冲剂中的一种；所述防腐剂为Proclin 300、叠氮化钠和苯甲酸钠中的一种。上述蛋白质保护剂、pH缓冲剂和防腐剂为现有技术中常规的试剂，性质稳定且成本适中。
[0019]进一步，凝固主体的MA值为18.0～22.0mm；将凝固主体和冻干保护剂混合后形成待冻干品，待冻干品的MA值为8.0～12.0mm。
[0020]在本方案中，MA值在8.0～12.0mm范围内的质控品可作为血栓弹力图激活剂F质控品水平1使用，血栓弹力图激活剂F质控品水平1可模拟正常凝血状态，并对含有血栓弹力图仪和配套试剂的血小板图检测系统进行质控。
[0021]进一步，凝固主体的MA值为30.0～40.0mm；将凝固主体和冻干保护剂混合后形成待冻干品，待冻干品的MA值为15.0～25.0mm。
[0022]在本方案中，MA值在15.0～25.0mm范围内的质控品可作为血栓弹力图激活剂F质控品水平2使用，血栓弹力图激活剂F质控品水平2可模拟异常凝血状态，并对含有血栓弹力图仪和配套试剂的血小板图检测系统进行质控。
[0023]进一步，当血栓弹力图激活剂F质控品为水平1时，第一设定范围为18.0～22.0mm，第二设定范围为8.0～12.0mm；
[0024]当血栓弹力图激活剂F质控品为水平2时，第一设定范围为30.0～40.0mm，第二设定范围为15.0～25.0mm。
[0025]采用上述方案，通过控制MA值可以实现两种水平的质控品的制备。制备的血栓弹力图质控品水平1和血栓弹力图质控品水平2分别反映了实际样品的正常凝血和异常凝血两种状态。可实现血小板图检测系统针对于正常凝血样品的检测效力的质控，以及实现血小板图检测系统针对于异常凝血样品的检测效力的质控。
[0026]进一步，肝素抗凝猪血浆基质液和肝素抗凝纤维蛋白原基质液由如下方法制备：在新鲜猪全血中加入肝素钠抗凝剂，获得肝素抗凝猪血；经静置分层取上层液体、离心取上层液体后，加入叠氮化钠，获得肝素抗凝猪血浆；对肝素抗凝猪血浆进行离心处理，获得位于上层的肝素抗凝血浆基质液和位于下层的肝素抗凝纤维蛋白原基质液。
[0027]采用上述技术方案，可以从猪血中分离得到纤维蛋白原基质液和血浆基质液，上述操作过程简单且易于工业化，并且本方案以猪血为主要原料，来源充足，成本较低。
[0028]综上所述，本方案的综合有益效果如下：
[0029]在对样品进行血栓弹力图检测时，需要使用到检测设备(血栓弹力图仪)、配套试剂。针对检测设备、配套试剂组成的血本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.血栓弹力图激活剂F质控品，其特征在于：其原料包括由肝素抗凝血浆基质液和肝素抗凝纤维蛋白原基质液组成的凝固主体以及冻干保护剂；所述冻干保护剂中含有四氢嘧啶。2.根据权利要求1所述的血栓弹力图激活剂F质控品，其特征在于：所述冻干保护剂和所述凝固主体的体积比为25.1～65.1：1000。3.根据权利要求2所述的血栓弹力图激活剂F质控品，其特征在于：所述四氢嘧啶和所述凝固主体的用量比为10～20mmol：1000ml。4.根据权利要求1所述的血栓弹力图激活剂F质控品，其特征在于：所述冻干保护剂包括体积比为0.5～1.5：1～3：0.01：1～2的pH缓冲剂、蛋白质保护剂、防腐剂和四氢嘧啶溶液。5.根据权利要求4所述的血栓弹力图激活剂F质控品，其特征在于：所述蛋白质保护剂包括牛血清白蛋白、蔗糖、海藻糖、甘氨酸、甘露醇和乳糖中的至少一种；所述pH缓冲剂为Hepes缓冲剂、Tris
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HCl缓冲剂和磷酸盐缓冲剂中的一种；所述防腐剂为Proclin 300、叠氮化钠和苯甲酸钠中的一种。6.根据权利要求1
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5任一项所述的血栓弹力图激活剂F质控品，其特征在于，凝固主体的MA值为18.0～22.0mm；将凝固主体和冻干保护剂混合后形成待冻干品，待冻干品的MA值为8.0～12.0mm。7.根据权利要求1
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【专利技术属性】
技术研发人员：陈树国，李川，靳亚东，王培勇，邹忠良，
申请(专利权)人：重庆东渝中能实业有限公司，
类型：发明
国别省市：