一种白酒中甾醇的检测方法技术

本发明专利技术主要涉及化学技术分析领域。为了解决白酒中的甾醇含量难以测量的问题，本发明专利技术提供一种白酒中甾醇的检测方法，所述方法以白酒作为样品进行甾醇含量检测；白酒样品采用固相萃取小柱进行预处理得到待测样品，采用气相质谱法对待测样品进行检测，计算甾醇含量。计算甾醇含量。计算甾醇含量。

【技术实现步骤摘要】
一种白酒中甾醇的检测方法


[0001]本专利技术主要涉及化学分析
，尤其是涉及一种白酒中甾醇的检测方法。

技术介绍

[0002]甾醇，一类由3个己烷环及一个环戊烷稠合而成的环戊烷多氢菲衍生物。除细菌中缺少外，是广泛存在于生物体内的一种重要的天然活性物质，按其原料来源分为动物性甾醇、植物性甾醇和菌类甾醇等三大类。甾醇有多种不同的生物学功能，如作为细胞膜的成分及构成肾上腺皮质激素和性激素等。不少植物甾醇还具有很强的药理或毒理效应，如β－谷甾醇有降胆固醇、止咳、祛痰及抑制肿瘤和修复组织作用。
[0003]白酒属于固态发酵蒸馏酒，主要以粮食为原料，酒曲作为发酵剂，经长时间自然固态发酵后蒸馏所得。固态发酵过程中，原辅材料中的各种活性成分在各酶系、微生物代谢等作用下释放到酒糟中，一些活性成分再经以酒糟为填料的精馏塔式的特殊蒸馏方式，随着酒精蒸汽或水蒸气的拖带作用进入酒体，使白酒区别于液态发酵蒸馏酒，而含有大量由粮食原料及发酵过程所产生的风味及活性成分。研究白酒中的甾醇类物质，阐明其生理活性，对白酒产品的市场推广有重要的意义。同时，对比分析液态发酵蒸馏酒与固态发酵白酒中的微量活性成分甾醇，并以此评价固态发酵白酒的真实性，有利于提升白酒品质，并有助于白酒的质量的有效监控。
[0004]甾醇具有高沸点、不挥发、弱极性的物理化学性质，普通的蒸馏方式很难蒸馏得到，而白酒蒸馏过程中层层酒糟所形成的精馏塔，使得甾醇可以在乙醇蒸气的拖带作用下进入酒体，但是含量很低，由此未见白酒中甾醇检出的相关报道，因此，亟需提供一种操作简便、灵敏度高、准确度高的检测方法。

技术实现思路

[0005]本专利技术所要解决的技术问题：
[0006]提供一种白酒中甾醇的检测方法，解决白酒中的微量甾醇的含量无法测定的问题。
[0007]本专利技术解决上述技术问题所采用的技术方案：
[0008]一种白酒中甾醇的检测方法，所述方法以白酒作为样品进行甾醇含量检测；白酒样品采用固相萃取小柱进行预处理得到待测样品，采用气相质谱法对待测样品进行检测，计算甾醇含量。
[0009]进一步的，采用固相萃取小柱进行预处理的步骤包括小柱活化、平衡、上样，淋洗，洗脱，浓缩洗脱液；
[0010]以甲醇或乙腈作为小柱活化溶剂；
[0011]采用0.1％甲酸水溶液进行平衡；
[0012]将白酒样品稀释至酒精浓度5％～20％后进行上样；
[0013]淋洗液为浓度80％～90％甲醇水溶液；
[0014]洗脱液为甲醇或乙腈。
[0015]进一步的，所述甾醇为β－谷甾醇、菜油甾醇、豆甾醇、麦角甾醇四种甾醇中的至少两种的混合物。
[0016]进一步的，使用气相色谱－三重四极杆质谱仪对待测样品进行气相质谱检测；
[0017]所述气相色谱的检测条件为：色谱柱：HP
‑
5MS毛细管色谱柱；程序升温：200℃保持0min，以15℃/min升至300℃，保持20min；采用恒流模式，载气He流速1.0mL/min，不分流进样，进样量1μL，进样口温度300℃；
[0018]所述质谱检测条件为：电子轰击电离源：电子能量70eV；离子源温度230℃；传输线温度230℃；四极杆温度150℃；定性采用全扫描模式，质量扫描范围M/Z45
‑
500，MRM模式。
[0019]进一步的，所述甾醇含量计算包括以下步骤：
[0020]绘制标准曲线：配制甾醇混合标准母液，以甾醇混合标准母液浓度为横坐标，以甾醇母离子－子离子对质荷比信号峰的峰面积为纵坐标，绘制浓度－峰面积标准曲线；
[0021]检测并计算甾醇含量：将待测样品进样至气相色谱－三重四极杆质谱仪；根据甾醇母离子－子离子对质荷比信号峰的峰面积与绘制的标准曲线计算出各种甾醇的含量。
[0022]本专利技术的有益效果：
[0023]本专利技术所述的方法能检出白酒中的微量甾醇含量，灵敏度高，结果准确；选择固相萃取小柱进行预处理，预处理方法简便快捷，一方面能同时吸附白酒样品中的甾醇化合物，另一方面又可以有效除去白酒样品中的酸、酯、醇类物质，避免对甾醇的检测造成干扰；本专利技术所述的方法选择的上样浓度，能确保甾醇类物质能很好地被吸附，并减少其他化合物的吸附，以避免小柱饱和，本专利技术所述的方法选择的淋洗液为80
‑
90％的甲醇水溶液，可以将吸附在小柱上的醇类、脂肪酸类和脂肪酸酯类化合物淋洗掉，而弱极性的甾醇类化合物可以保留在小柱上，再以甲醇或乙腈洗脱下来，可以充分实现杂质的分离和甾醇类化合物的富集、净化。
附图说明
[0024]图1为标准溶液浓度为50mg/L时4种标准物质的MRM色谱图。
[0025]图2为固态发酵白酒样品的MRM色谱图。
[0026]图3为麦角甾醇质谱图。
[0027]图4为菜油甾醇质谱图。
[0028]图5为豆甾醇质谱图。
[0029]图6为β－谷甾醇质谱图。
具体实施方式
[0030]液态发酵蒸馏酒是以粮谷、薯类、糖蜜等原料，经短时间液态发酵、单塔或多塔蒸馏成食用酒精的工艺路线、再经串香、勾兑、调配而成的白酒。发酵时间短，且通常通过多塔蒸馏、精馏尽可能除去酒体中除酒精以外的杂质成分，由此其中不含有高沸点、不挥发的活性甾醇物质是合理的；固态发酵型白酒因发酵周期长达70天以上，发酵过程中产生大量的有机酸，酵母生长环境受到破坏，出现自溶，释放出麦角甾醇，分布于酒糟中。固态发酵型白酒蒸馏是以酒糟为填料的蒸馏方式，酒糟中的风味及活性成分可以尽可能地进入到酒体，
由此分布在酒糟中的麦角甾醇及酒糟中由粮食作物水解释放出的植物甾醇——β－谷甾醇、菜油甾醇和豆甾醇，随着蒸馏过程在酒精蒸气的拖带作用下进入到酒体中，使固态发酵白酒中含有一定量的甾醇物质。
[0031]本实施例中以本专利技术所述法方法分别对固态发酵型白酒和液态发酵蒸馏酒中的甾醇类化合物进行检测；对样品采用固相萃取小柱进行预处理得到待测样品，采用气相质谱法对待测样品进行检测，计算甾醇含量；最后对所述方法的回收率进行测定。
[0032]本专利技术实施例中采用的固相萃取小柱为CNW Technologies公司的LC
‑
C18小(500mg,6ml)。
[0033]本专利技术实施例中气相质谱检测使用的气相质谱仪为气相色谱－三重四极杆质谱仪；气相色谱的检测条件为：色谱柱：HP
‑
5MS毛细管色谱柱；程序升温：200℃保持0min，以15℃/min升至300℃，保持20min；采用恒流模式，载气(He)流速1.0ml/min，不分流进样，进样量1μL，进样口温度300℃。本实施例中质谱检测条件为：电子轰击(EI)电离源：电子能量70eV；离子源温度230℃；传输线温度230℃；四极杆温度150℃。定性采用全扫描模式，质量扫描范围m/z 45
‑
500，多反应检测(MRM)模式。
[0034]本专利技术实施例中标准曲本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种白酒中甾醇的检测方法，其特征在于，所述方法以白酒作为样品进行甾醇含量检测：白酒样品采用固相萃取小柱进行预处理得到待测样品，采用气相质谱法对待测样品进行检测，计算甾醇含量。2.根据权利要求1所述的一种白酒中甾醇的检测方法，其特征在于，采用固相萃取小柱进行预处理的步骤包括小柱活化、平衡、上样，淋洗，洗脱，浓缩洗脱液。3.根据权利要求2所述的一种白酒中甾醇的检测方法，其特征在于，所述小柱活化中以甲醇或乙腈作为小柱活化溶剂。4.根据权利要求2所述的一种白酒中甾醇的检测方法，其特征在于，所述平衡中采用0.1％甲酸水溶液进行平衡。5.根据权利要求2所述的一种白酒中甾醇的检测方法，其特征在于，所述上样包括：将白酒样品稀释至酒精浓度5％～20％后进行上样。6.根据权利要求2所述的一种白酒中甾醇的检测方法，其特征在于，所述淋洗中淋洗液为浓度80％～90％的甲醇水溶液。7.根据权利要求2所述的一种白酒中甾醇的检测方法，其特征在于，所述洗脱中洗脱液为甲醇或乙腈。8.根据权利要求1所述的一种白酒中甾醇的检测方法，其特征在于，所述甾醇为β－谷甾醇、菜油甾醇、豆甾醇、麦角甾醇四种甾醇中的至少两种的混合物。9.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：廖勤俭，李杨华，安明哲，赵东，乔宗伟，胡娇，王小琴，罗珠，周韩玲，郭艳，王芳，
申请(专利权)人：宜宾五粮液股份有限公司，
类型：发明
国别省市：