用小化合物增强iPSC衍生的效应免疫细胞制造技术

提供了用于获得通过对基因组工程化iPSC进行定向分化获得的功能上增强的衍生效应细胞的方法和组合物。本文所提供的所述衍生细胞具有递送改善的或增强的治疗效果的稳定且功能性基因组编辑。还提供了治疗组合物和其用途，所述治疗组合物包含单独的或与抗体或检查点抑制剂一起用于组合疗法中的所述功能上增强的衍生效应细胞。强的衍生效应细胞。强的衍生效应细胞。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用小化合物增强iPSC衍生的效应免疫细胞
[0001]相关申请
[0002]本申请主张2019年12月6日提交的美国临时申请第62/945,040号的优先权，其公开内容以全文引用的方式并入本文中。


[0003]本公开广泛涉及现成的免疫细胞产物领域。更确切地说，本公开涉及研发能够在体内递送治疗相关特性的多功能效应细胞的策略。根据本公开研发的细胞产物解决了患者来源的细胞疗法的关键限制。

技术介绍

[0004]过继性细胞疗法领域目前的重点是使用患者来源的细胞和供体来源的细胞，这使得实现癌症免疫疗法的持续制造以及向所有可能受益的患者递送疗法尤其困难。还需要改善过继性转移的淋巴细胞的疗效和持久性，以促进良好的患者结果。淋巴细胞，诸如T细胞和自然杀手(NK)细胞)，是有效的抗肿瘤效应因子，在先天性和适应性免疫中起重要作用。然而，这些免疫细胞用于过继性细胞疗法仍然具有挑战性，并且尚未满足改善的需求。因此，在过继性免疫疗法中，仍有大量机会来利用T细胞和NK细胞或其它淋巴细胞的全部潜能。

技术实现思路

[0005]需要功能改善的效本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种制造免疫细胞或其群体的方法，其包含使所述免疫细胞经受包含地塞米松、来那度胺、AQX
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1125或其衍生物或类似物中至少一种的小化合物处理，从而获得与没有相同小化合物处理的对应免疫细胞相比具有增强的解冻后细胞毒性的免疫细胞。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述免疫细胞为从诱导多能干细胞(iPSC)分化的衍生的效应免疫细胞，其中所述效应免疫细胞包含：衍生的CD34细胞、衍生的造血干细胞和祖细胞、衍生的造血多能祖细胞、衍生的T细胞祖细胞、衍生的NK细胞祖细胞、衍生的T细胞、衍生的NKT细胞、衍生的NK细胞、衍生的B细胞或具有在对应的原代T、NK、NKT和/或B细胞中不存在的一种或多种功能性特征的衍生效应细胞。3.根据权利要求2所述的方法，其中所述iPSC包含以下编辑中的至少一种：(i)具有第一靶向特异性的第一嵌合抗原受体(CAR)；(ii)CD38敲除(iii)与其天然的对应细胞相比，HLA
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I缺乏和/或HLA
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II缺乏；(iv)HLA
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G或不可切割的HLA
‑
G的引入表达、或CD58和CD54中的一者或两者的敲除；(v)CD16或其变体；(vi)具有第二靶向特异性的第二CAR；(vii)包含细胞表面表达的外源性细胞因子和/或其受体的部分或完全肽的信号传导复合物；(viii)表2中列出的基因型中的至少一种；(ix)与其天然的对应细胞相比，B2M、CIITA、TAP1、TAP2、TAP相关蛋白、NLRC5、CIITA、RFXANK、RFX5、RFXAP、TCRα或β恒定区、NKG2A、NKG2D、CD25、CD69、CD44、CD56、CIS、CBL
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B、SOCS2、PD1、CTLA4、LAG3、TIM3和TIGIT中的至少一者的缺失或减少表达；或(x)HLA
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E、41BBL、CD3、CD4、CD8、CD16、CD47、CD113、CD131、CD137、CD80、PDL1、A
2A
R、抗原特异性TCR、Fc受体、抗体或其片段、检查点抑制剂、接合器以及用于与双特异性或多特异性或通用接合器偶联的表面触发受体中至少一者中的引入或增加的表达；并且其中从所述iPSC分化的所述效应免疫细胞包含与所述iPSC相同的一个或多个编辑。4.根据权利要求3所述的方法，其中所述第一CAR包含：(i)包含至少一个抗原识别区的胞外域、跨膜结构域和包含至少一个信号传导结构域的胞内域；并且其中所述至少一个信号传导结构域源自对T和/或NK细胞活化或功能具有特异性的信号转导蛋白的细胞质结构域；(ii)特异性地与疾病、病原体、液体瘤或实体瘤相关的抗原结合的抗原识别结构域；或(iii)抗原识别结构域，其对以下具有特异性：(a)CD19、BCMA、CD20、CD22、CD38、CD123、HER2、CD52、EGFR、GD2、MICA/B、MSLN、VEGF
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R2、PSMA和PDL1中的任一个；或(b)ADGRE2、碳酸酐酶IX(CAIX)、CCR1、CCR4、癌胚抗原(CEA)、CD3、CD5、CD7、CD8、CD10、CD20、CD22、CD30、CD33、CD34、CD38、CD41、CD44、CD44V6、CD49f、CD56、CD70、CD74、CD99、CD123、CD133、CD138、CDS、CLEC12A、巨细胞病毒(CMV)感染细胞的抗原、上皮糖蛋白2(EGP 2)、上皮糖蛋白
‑
40(EGP
‑
40)、上皮细胞粘附分子(EpCAM)、EGFRvIII、受体酪氨酸
‑
蛋白激酶erb
‑
B2,3,4、EGFIR、EGFR
‑
VIII、ERBB叶酸结合蛋白(FBP)、胎儿乙酰胆碱受体(AChR)、叶酸受体
‑
a、神经节苷脂G2(GD2)、神经节苷脂G3(GD3)、人类表皮生长因子受体2(HER
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2)、人类
端粒酶逆转录酶(hTERT)、ICAM
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1、整合素B7、白介素
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13受体亚单位α
‑
2(IL
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13Rα2)、κ
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轻链、激酶插入结构域受体(KDR)、路易斯A(CA19.9)、路易斯Y(LeY)、L1细胞粘附分子(L1
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CAM)、LILRB2、黑色素瘤抗原家族A1(MAGE
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A1)、MICA/B、粘蛋白1(Muc
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1)、粘蛋白16(Muc
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16)、间皮素(MSLN)、NKCSI、NKG2D配体、c
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Met、癌症睾丸抗原NY
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ESO
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1、癌胚抗原(h5T4)、PRAME、前列腺干细胞抗原(PSCA)、PRAME前列腺特异性膜抗原(PSMA)、肿瘤相关糖蛋白72(TAG
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72)、TIM
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3、TRBCI、TRBC2、血管内皮生长因子R2(VEGF
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R2)和威尔姆斯肿瘤蛋白(WT
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1)中的任一个。5.根据权利要求3所述的方法，其中所述第一CAR包含在共表达的双顺反子构建体中：(1)细胞表面表达的外源性细胞因子或其受体的部分或全长肽，其中所述外源性细胞因子或其受体包含：(a)IL2、IL4、IL6、IL7、IL9、IL10、IL11、IL12、IL15、IL18、IL21或其相应受体中的至少一者；(b)以下中的至少一者：(i)通过使用自切割肽进行IL15和IL15Rα的共表达；(ii)IL15和IL15Rα的融合蛋白；(iii)IL15/IL15Rα融合蛋白，其中IL15Rα的胞内结构域被截短或消除；(iv)IL15和IL15Rα的膜结合Sushi结构域的融合蛋白；(v)IL15和IL15Rβ的融合蛋白；(vi)IL15和共同受体γC的融合蛋白，其中所述共同受体γC为天然的或经修饰的；和(vii)IL15Rβ的同源二聚体；(2)抗体或其片段；(3)接合器；或(4)检查点抑制剂。6.根据权利要求1所述的方法，其中所述免疫细胞的小化合物处理是在所述免疫细胞冷冻保存之前或之后。7.根据权利要求1所述的方法，其中所述方法进一步包含冷冻保存经受所述小化合物处理的所述免疫细胞。8.根据权利要求7所述的方法，其中所述冷冻保存物不含或基本上不含所述处理的一种或多种小化合物。9.根据权利要求1所述的方法，其中所述增强的解冻后细胞毒性包含在冷冻保存后解冻的免疫细胞增强的体内疗效，并且其中所述经过小化合物处理的解冻后的免疫细胞包含以下特征中的至少一种：(i)增强的肿瘤控制、肿瘤清除和/或减少肿瘤复发的能力；(ii)改善的肿瘤穿透性；或(iii)增强的迁移至骨髓和/或肿瘤部位的能力，与没有相同小化合物处理的解冻后对应的免疫细胞相比。10.根据权利要求1所述的方法，其中所述小化合物处理：(i)包含地塞米松，或其衍生物或类似物；(ii)不含或基本上不含细胞因子IL7，任选地，其中接受所述处理的所述免疫细胞是T
细胞；(iii)不含或基本上不含细胞因子IL2和/或细胞因子IL15，任选地，其中接受所述处理的所述免疫细胞是NK细胞；(iv)包含地塞米松，但不包含细胞因子IL7；(v)不含或基本不含细胞因子；(vi)是在细胞培养期间和/或冷冻保存之前或之后；(vii)是在从iPSC分化所述细胞后的免疫细胞扩增期间；和/或(viii)在冷冻保存之前持续约1至约12天，或约3至约6天。11.根据权利要求10所述的方法，其中所述地塞米松以约10nM至约20μM的浓度范围存在。12.一种细胞或其群体，其中：(i)所述细胞是经过小化合物处理的免疫细胞，所述小化合物包含地塞米松、来那度胺、AQX
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1125及其衍生物或类似物中的至少一种；和(ii)与没有相同小化合物处理的对应的免疫细胞相比，所述免疫细胞包含增强的解冻后细胞毒性。13.根据权利要求12所述的细胞或其群体，其中：(iii)所述免疫细胞是从诱导多能干细胞(iPSC)分化的衍生的效应免疫细胞；和(iv)所述效应免疫细胞包含：衍生的CD34细胞、衍生的造血干细胞和祖细胞、衍生的造血多能祖细胞、衍生的T细胞祖细胞、衍生的NK细胞祖细胞、衍生的T细胞、衍生的NKT细胞、衍生的NK细胞、衍生的B细胞或具有在对应的原代T、NK、NKT和/或B细胞中不存在的一种或多种功能性特征的衍生效应细胞。14.根据权利要求13所述的细胞或其群体，其中所述iPSC包含以下编辑中的至少一种：(i)具有第一靶向特异性的第一嵌合抗原受体(CAR)；(ii)CD38敲除(iii)与其天然的对应细胞相比，HLA
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I缺乏和/或HLA
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II缺乏；(iv)HLA
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G或不可切割的HLA
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G的引入表达、或CD58和CD54中的一者或两者的敲除；(v)CD16或其变体；(vi)具有第二靶向特异性的第二CAR；(vii)包含细胞表面表达的外源性细胞因子和/或其受体的部分或完全肽的信号传导复合物；(viii)表2中列出的基因型中的至少一种；(ix)与其天然的对应细胞相比，B2M、CIITA、TAP1、TAP2、TAP相关蛋白、NLRC5、CIITA、RFXANK、RFX5、RFXAP、TCRα或β恒定区、NKG2A、NKG2D、CD25、CD69、CD44、CD56、CIS、CBL
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B、SOCS2、PD1、CTLA4、LAG3、TIM3和TIGIT中的至少一者的缺失或减少表达；或(x)HLA
‑
E、41BBL、CD3、CD4、CD8、CD16、CD47、CD113、CD131、CD137、CD80、PDL1、A
2A
R、抗原特异性TCR、Fc受体、抗体或其片段、检查点抑制剂、接合器以及用于与双特异性或多特异性或通用接合器偶联的表面触发受体中至少一者中的引入或增加的表达；并且其中从所述iPSC分化的效应免疫细胞包含与所述iPSC相同的一个或多个编辑。15.根据权利要求14所述的细胞或其群体，其中所述第一CAR和第二CAR独立地包含：
(i)包含至少一个抗原识别区的胞外域、跨膜结构域和包含至少一个信号传导结构域的胞内域；并且其中所述至少一个信号传导结构域源自对T和/或NK细胞活化或功能具有特异性的信号转导蛋白的细胞质结构域；(ii)特异性地与疾病、病原体、液体瘤或实体瘤相关的抗原结合的抗原识别结构域；或(iii)抗原识别结构域，其对以下具有特异性：(a)CD19、BCMA、CD20、CD22、CD38、CD123、HER2、CD52、EGFR、GD2、MICA/B、MSLN、VEGF
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R2、PSMA和PDL1中的任一个；或(b)ADGRE2、碳酸酐酶IX(CAIX)、CCR1、CCR4、癌胚抗原(CEA)、CD3、CD5、CD7、CD8、CD10、CD20、CD22、CD30、CD33、CD34、CD38、CD41、CD44、CD44V6、CD49f、CD56、CD70、CD74、CD99、CD123、CD133、CD138、CDS、CLEC12A、巨细胞病毒(CMV)感染细胞的抗原、上皮糖蛋白2(EGP 2)、上皮糖蛋白
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40(EGP
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40)、上皮细胞粘附分子(EpCAM)、EGFRvIII、受体酪氨酸
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蛋白激酶erb
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B2,3,4、EGFIR、EGFR
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VIII、ERBB叶酸结合蛋白(FBP)、胎儿乙酰胆碱受体(AChR)、叶酸受体
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a、...

【专利技术属性】
技术研发人员：B，
申请(专利权)人：菲特治疗公司，
类型：发明
国别省市：