【技术实现步骤摘要】
一种可降解油酸的基因改造酿酒酵母及其构建方法与应用
[0001]本专利技术涉及基因工程
,特别涉及一种可降解油酸的基因改造酿酒酵母及其构建方法与应用。
技术介绍
[0002]硫解酶普遍存在于原核生物和真核生物中。硫解酶在脂质代谢中发挥着重要作用,根据酶催化反应的方向可分为两类:3
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酮脂酰基辅酶A硫解酶(ACAA;EC 2.3.1.16)和乙酰辅酶A乙酰基转移酶(ACAT;EC 2.3.1.9)。前者也称为硫解酶I,可以催化β
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酮脂酰基辅酶A去除乙酰基产生乙酰辅酶A和少两个碳的酮酯酰辅酶A,该催化反应主要发生在脂肪酸β
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氧化的每个循环的最后一步。后者又称为硫解酶II,可以催化两分子的乙酰辅酶A缩合产生乙酰乙酰辅酶A,该催化反应普遍存在于许多合成代谢过程的第一步,例如原核生物中甾醇和酮体的生物合成或聚(3
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羟基丁酸)(许多细菌中的主要能量和碳储存分子)的合成。虽然这两种硫解酶催化可逆反应,但硫解酶I只参与催化分解代谢过程,这在热力学上是有利的, ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种可降解油酸的基因改造酿酒酵母的构建方法,其特征在于,包括步骤:获取米曲霉酮酯酰辅酶A硫解酶基因的克隆片段,所述米曲霉酮酯酰辅酶A硫解酶基因记为AoErg10D基因,所述AoErg10D基因的核苷酸序列为SEQ NO.1;将所述克隆片段连接到载体pYes2.0上,得到AoErg10D表达载体;将所述AoErg10D表达载体转化至酿酒酵母ScPot1基因突变体Y02319中,构建转基因菌株AoErg10D
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Y02319,即得到所述可降解油酸的基因改造酿酒酵母。2.根据权利要求1所述可降解油酸的基因改造酿酒酵母的构建方法,其特征在于,获取米曲霉酮酯酰辅酶A硫解酶基因的克隆片段的步骤包括:根据所述AoErg10D基因的核苷酸序列设计对应引物序列,所述引物序列为SEQ NO.13
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14;提取米曲霉总RNA进行反转录,得...
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