窖泥中微量成分萃取定量方法技术

窖泥中微量成分萃取定量方法，利用固液萃取技术，筛选合适的溶剂萃取窖泥中微量成分并对萃取微量成分进行定量分析，本方法选择乙醇作为萃取剂，确定摇床震荡和超声相结合的方法，采用具塞三角瓶可以有效减少微量成分挥发，通过萃取剂预先添加标样的手段，有效保证了定量的准确度。本方法分析过程相对简单，可重复项强，可操作性强，成本较低，可以有对窖泥中微量成分进行有效量化，摆脱以往凭感觉判断窖泥好坏的弊端。窖泥好坏的弊端。

【技术实现步骤摘要】
窖泥中微量成分萃取定量方法


[0001]本专利技术涉及白酒窖池窖泥成分分析
，具体涉及一种窖泥中微量成 分萃取定量方法。

技术介绍

[0002]窖池是白酒生产过程中，集糖化、酒化、酯化等多种反应于一体的酿酒容器。 俗话说“老窖出好酒”，在白酒生产实践中，往往发现靠近窖底、窖壁的糟醅， 其酒浓郁芳香，其根本原因在于窖泥中与生香有关的功能菌群的代谢作用。窖 池本身就是多种微生物的载体，随着发酵长期连续的进行，窖泥中的功能微生 物不断地得到驯化和富集，最终形成其特有的微生物群落。因此，窖泥中微量 成分的种类和数量对白酒风味物质的形成有着重要的影响。窖泥中含有的微量 成分包括酚类物质或微生物菌群例如乳酸菌、芽孢杆菌、甲烷菌等，这些物质 对人工窖泥的开发、窖泥的质量控制以及白酒风味物质的形成都具有重要的意 义。
[0003]目前对窖泥中微量成分定量检测仍然属于空白领域，现有技术和方法都无法 对窖泥中微量成分进行定量测定。

技术实现思路

[0004]本专利技术针对现有技术存在的不足，提供了一种窖泥中微量成分萃取定量方 法。
[0005]本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：
[0006]一种窖泥中微量成分萃取定量方法，利用固液萃取技术，筛选合适的溶剂萃 取窖泥中微量成分并对萃取微量成分进行定量分析，具体按如下步骤进行：
[0007](1)标准曲线的制备：针对窖泥中的微量成分进行气质联用仪技术定量， 根据拷贝数与CT值构建的标准曲线；
[0008](2)萃取：称取窖泥，加入萃取剂乙醇和内标溶液放置摇床上，220转/分， 震荡30分钟，静止足够时间待形成上清液，医用针管吸取2毫升左右，过0.45 微米有机系滤膜，得测试样品；
[0009](3)气相色谱
‑
质谱联用：将获得的样品才用液体直接进样的方式检测，获得 定量数值；
[0010]气相色谱条件为：
[0011]色谱柱为DB
‑
WAX毛细管柱60m
×
0.25mm
×
0.25μm；
[0012]进样口温度230～250℃，质谱检测器温度230℃，载气He，流速0.8～ 1mL/min，不分流进样；
[0013]程序升温条件为初始柱温40℃，以4～5℃/min上升至180℃，保持2～4min, 然后以5～6℃/min升温到230℃，保持5～15min；
[0014]质谱条件为：
[0015]气相色谱与质谱接口温度为230℃；
[0016]电离方式为电子轰击源EI；
[0017]监测方式为选择性离子扫描模式SIM，电离能量70eV；
[0018]溶剂延迟为2.0～2.5min；
[0019](4)标准曲线的建立
[0020]a、配制标准物质储备液：称取白酒中各种微量成分化合物标准品，分别用 无水乙醇配制成1～2mg/L的单标储备液，采用棕色储液瓶于4℃冰箱中避光保 存；
[0021]b、配制混合标准储备液：吸取各种微量化合物的单标储备液0.5mL混合， 然后采用色谱纯无水乙醇定容至50mL棕色容量瓶，获得混合标准储备液，于 4℃冰箱中避光保存；
[0022]c、配制混合标准使用液：分别吸取混合标准储备液0.05mL、0.1mL、0.2mL、 0.5mL、1mL至50mL棕色容量瓶中，加入乙醇，然后用超纯水定容，配制成 乙醇体积浓度为10％～15％的标准系列溶液；
[0023]d、对各混合标准使用液按步骤(2)、(3)进行处理，以各微量化合物标准品与 内标物特征离子峰的峰面积之比为横坐标，以各种微量类化合物标准品与内标 物的浓度之比为纵坐标绘制标准曲线；
[0024](5)检测：将待测窖泥按步骤(2)进行萃取，然后按照步骤(3)气相色谱
‑
质谱联 用进行定性定量分析，窖泥中各种微量成分含量(mg/克)＝色谱测定数值
×
100 (溶剂)
÷
10(窖泥)
÷
(1
‑
水分含量)。
[0025]上述窖泥和萃取剂乙醇按照质量比1：10的比例添加。
[0026]本专利技术根据白酒发酵窖泥特性，选择乙醇作为萃取剂，确定摇床震荡和超声 相结合的方法，采用具塞三角瓶作为萃取容器可以有效减少微量成分挥发，通 过萃取剂预先添加标样的手段，有效保证了定量的准确度，本方法相对简单， 可重复项强，可操作性强，成本较低。可以有对窖泥中微量成分进行有效量化， 摆脱以往凭感觉判断窖泥好坏的弊端。
具体实施方式
[0027]一种窖泥中微量成分萃取定量方法，利用固液萃取技术，筛选合适的溶剂萃 取窖泥中微量成分并对萃取微量成分进行定量分析，具体按如下步骤进行：
[0028](1)标准曲线的制备：针对窖泥中的微量成分进行气质联用仪技术定量， 根据拷贝数与CT值构建的标准曲线；
[0029](2)萃取：称取窖泥，加入萃取剂乙醇和内标溶液放置摇床上，220转/分， 震荡30分钟，静止足够时间待形成上清液，医用针管吸取2毫升左右，过0.45 微米有机系滤膜，得测试样品，窖泥和萃取剂乙醇按照质量比1：10的比例添 加；
[0030](3)气相色谱
‑
质谱联用：将获得的样品才用液体直接进样的方式检测，获得 定量数值；
[0031]气相色谱条件为：
[0032]色谱柱为DB
‑
WAX毛细管柱60m
×
0.25mm
×
0.25μm；
[0033]进样口温度230～250℃，质谱检测器温度230℃，载气He，流速0.8～ 1mL/min，不分流进样；
[0034]程序升温条件为初始柱温40℃，以4～5℃/min上升至180℃，保持2～4min, 然后以5～6℃/min升温到230℃，保持5～15min；
[0035]质谱条件为：
[0036]气相色谱与质谱接口温度为230℃；
[0037]电离方式为电子轰击源EI；
[0038]监测方式为选择性离子扫描模式SIM，电离能量70eV；
[0039]溶剂延迟为2.0～2.5min；
[0040](4)标准曲线的建立
[0041]a、配制单标储备液：称取白酒中各种微量成分化合物标准品，分别用无水 乙醇配制成1～2mg/L的单标储备液，采用棕色储液瓶于4℃冰箱中避光保存；
[0042]b、配制混合标准储备液：吸取各种微量化合物的单标储备液0.5mL混合， 然后采用色谱纯无水乙醇定容至50mL棕色容量瓶，获得混合标准储备液，于 4℃冰箱中避光保存；
[0043]c、配制混合标准使用液：分别吸取混合标准储备液0.05mL、0.1mL、0.2mL、 0.5mL、1mL至50mL棕色容量瓶中，加入乙醇，然后用超纯水定容，配制成 乙醇体积浓度为10％～15％的标准系列溶液；
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种窖泥中微量成分萃取定量方法，其特征是利用固液萃取技术，筛选合适的溶剂萃取窖泥中微量成分并对萃取微量成分进行定量分析，具体按如下步骤进行：（1）标准曲线的制备：针对窖泥中的微量成分进行气质联用仪技术定量，根据拷贝数与CT值构建的标准曲线；（2）萃取：称取窖泥，加入萃取剂乙醇和内标溶液放置摇床上，220转/分，震荡30分钟，静止足够时间待形成上清液，医用针管吸取2毫升左右，过0.45微米有机系滤膜，得测试样品；(3)气相色谱
‑
质谱联用：将获得的样品才用液体直接进样的方式检测，获得定量数值 ；气相色谱条件为：色谱柱为DB
‑
WAX毛细管柱60m
×
0.25mm
×
0.25μm；进样口温度230～250℃，质谱检测器温度230℃，载气He，流速0.8～1mL/min， 不分流进样；程序升温条件为初始柱温40℃，以4～5℃/min上升至180℃，保持2～4min,然后 以5～6℃/min升温到230℃，保持5～15min；质谱条件为：气相色谱与质谱接口温度为230℃；电离方式为电子轰击源EI；监测方式为选择性离子扫描模式SIM，电离能量70eV；溶剂延迟为2.0～2.5min；(4)标准曲线的建立a、配制标准物质储...

【专利技术属性】
技术研发人员：范志勇，杜新勇，王朝青，王广鹏，左国营，陈兴芬，刘春红，董蕊，
申请(专利权)人：古贝春集团有限公司，
类型：发明
国别省市：