含烟酰胺单核苷酸的松花粉提取液、提取物及其制备方法技术

本发明专利技术提供了一种含烟酰胺单核苷酸的松花粉提取液、提取物及其制备方法，涉及分离纯化技术领域。本发明专利技术提供的含烟酰胺单核苷酸的松花粉提取液的制备方法，以破壁松花粉为原料，以特定配比的有机酸和EDTA的水溶液作为提取溶剂，其中有机酸为乙酸或者甲酸中的至少一种，该制备方法简单，大大促进了松花粉中烟酰胺单核苷酸的溶出，且不影响后续的纯化过程。本发明专利技术提供的含烟酰胺单核苷酸的松花粉提取物的制备方法，以上述制备得到的松花粉提取液依次经过浓缩、萃取、醇沉和干燥步骤制备得到，在保证烟酰胺单核苷酸高提取率的前提下，有效提高了松花粉提取物中烟酰胺单核苷酸的纯度。提高了松花粉提取物中烟酰胺单核苷酸的纯度。提高了松花粉提取物中烟酰胺单核苷酸的纯度。

【技术实现步骤摘要】
含烟酰胺单核苷酸的松花粉提取液、提取物及其制备方法


[0001]本专利技术涉及分离纯化
，尤其是涉及一种含烟酰胺单核苷酸的松花粉提取液、提取物及其制备方法。

技术介绍

[0002]烟酰胺单核苷酸(Nicotinamide mononucleotide，NMN)，是一种内源性生物活性核苷酸，是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(Nicotinamide adenine dinucleotide，NAD+)的关键前体之一，具有抗氧化、减少氧化应激的作用，可以减缓生物体的生理衰退，增强能量代谢，延长寿命，在保健领域具有广阔的前景。
[0003]目前，烟酰胺单核苷酸主要通过微生物发酵、化学合成或体外酶催化制备。烟酰胺单核苷酸也富含在一些水果和蔬菜中，包括西兰花、卷心菜、黄瓜、毛豆、鳄梨等。
[0004]现代研究表明，松花粉富含人体所需的多种微量营养素，具有增强免疫力、调节代谢、抗氧化、抗衰老、排重金属等功效。本实验室发现松花粉中也含有烟酰胺单核苷酸，并且含量高于西蓝花、牛油果和毛豆等。
[0005]CN202010472425.8提供了一种从牛油果中提取烟酰胺单核苷酸的方法，采用提取溶剂协同超声波辅助、超滤浓缩等方式从牛油果中提取烟酰胺单核苷酸，含量为13.3～16.1μg/g，提取率有待提高。
[0006]CN201910811841.3提供了一种西蓝花提取物及制备方法和用途，采用超声波和超滤等方式提取烟酰胺单核苷酸，含量为13.724μg/mg。
[0007]CN201910841351.8提供了一种毛豆提取物及其制备方法和应用，采用超声波辅助复合酶、超滤浓缩等方法提取烟酰胺单核苷酸，含量为8.072ug/mL。
[0008]然而上述三个方法中烟酰胺单核苷酸的提取率不高，还有待提升。
[0009]有鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0010]本专利技术的第一目的在于提供一种含烟酰胺单核苷酸的松花粉提取液的制备方法，以解决上述问题中的至少一种。
[0011]本专利技术的第二目的在于提供一种含烟酰胺单核苷酸的松花粉提取液。
[0012]本专利技术的第三目的在于提供一种含烟酰胺单核苷酸的松花粉提取物的制备方法。
[0013]本专利技术的第四目的在于提供一种含烟酰胺单核苷酸的松花粉提取物。
[0014]第一方面，本专利技术提供了一种含烟酰胺单核苷酸的松花粉提取液的制备方法，包括如下步骤：
[0015]将破壁松花粉采用提取溶剂提取，制备得到含烟酰胺单核苷酸的松花粉提取液；
[0016]所述提取溶剂为含有有机酸和EDTA的水溶液；
[0017]所述提取溶剂中，有机酸的体积百分比为0.05％
‑
0.1％，EDTA的质量百分比为0.2％
‑
0.6％；
[0018]所述有机酸为甲酸或乙酸中的至少一种。
[0019]作为进一步技术方案，所述提取为在超声条件下进行；
[0020]优选地，所述提取的时间为60
‑
90min；
[0021]优选地，所述提取的温度为30
‑
40℃。
[0022]作为进一步技术方案，所述破壁松花粉和提取溶剂的比例为1g:60mL
‑
1g:100mL。
[0023]作为进一步技术方案，提取结束后还包括除杂；
[0024]优选地，所述除杂的方法包括离心或者过滤；
[0025]优选地，所述离心的转速为8000
‑
12000r/min，离心的时间为8
‑
12min。
[0026]第二方面，本专利技术提供了一种含烟酰胺单核苷酸的松花粉提取液，采用所述的制备方法制备得到。
[0027]第三方面，本专利技术提供了一种含烟酰胺单核苷酸的松花粉提取物的制备方法，包括如下步骤：
[0028]a.将所述的松花粉提取液浓缩后进行萃取，保留水相；
[0029]b.将a步骤得到的水相进行醇沉，保留清液，干燥后制备得到含烟酰胺单核苷酸的松花粉提取物。
[0030]作为进一步技术方案，所述萃取的萃取溶剂包括乙酸乙酯、正戊烷或二氧六环中的至少一种；
[0031]优选地，所述萃取溶剂为乙酸乙酯和二氧六环；
[0032]优选地，所述萃取溶剂中乙酸乙酯和二氧六环的体积比为1:1
‑
1:3。
[0033]作为进一步技术方案，所述醇沉的醇沉溶剂包括乙醇；
[0034]优选地，醇沉过程中，乙醇的终体积百分比为60％
‑
80％。
[0035]作为进一步技术方案，所述浓缩为将松花粉提取液浓缩至原体积的1/5
‑
1/20，优选为1/10；
[0036]优选地，浓缩后的松花粉提取液和萃取溶剂的体积比为1:2
‑
2:1。
[0037]第四方面，本专利技术提供了一种含烟酰胺单核苷酸的松花粉提取物，采用所述的制备方法制备得到。
[0038]与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
[0039]本专利技术提供的含烟酰胺单核苷酸的松花粉提取液的制备方法，以破壁松花粉为原料，以特定配比的有机酸和EDTA的水溶液作为提取溶剂，其中EDTA可增加NMN的稳定性，有机酸为乙酸或者甲酸中的至少一种，能够调节提取溶剂的离子强度和酸碱度，增加NMN的溶解度，将二者按照特定比例混合作为提取溶剂充分发挥了EDTA和乙酸或甲酸之间的协同配合作用。该制备方法简单，大大促进了松花粉中烟酰胺单核苷酸的溶出，且不影响后续的纯化过程。
[0040]本专利技术提供的含烟酰胺单核苷酸的松花粉提取物的制备方法，以上述制备得到的松花粉提取液依次经过浓缩、萃取、醇沉和干燥步骤制备得到，其中萃取过程，可有效除去色素和酚酸等非极性或弱极性物质；醇沉过程，可有效除去多糖和蛋白质等大分子等醇不溶性物质；萃取和醇沉相互配合，在保证烟酰胺单核苷酸高提取率的前提下，有效提高了松花粉提取物中烟酰胺单核苷酸的纯度。
附图说明
[0041]为了更清楚地说明本专利技术具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0042]图1为烟酰胺单核苷酸SRM谱图。
具体实施方式
[0043]下面将结合实施方式和实施例对本专利技术的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施方式和实施例仅用于说明本专利技术，而不应视为限制本专利技术的范围。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
[0044]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种含烟酰胺单核苷酸的松花粉提取液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将破壁松花粉采用提取溶剂提取，制备得到含烟酰胺单核苷酸的松花粉提取液；所述提取溶剂为含有有机酸和EDTA的水溶液；所述提取溶剂中，有机酸的体积百分比为0.05％
‑
0.1％，EDTA的质量百分比为0.2％
‑
0.6％；所述有机酸为甲酸或乙酸中的至少一种。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述提取为在超声条件下进行；优选地，所述提取的时间为60
‑
90min；优选地，所述提取的温度为30
‑
40℃。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述破壁松花粉和提取溶剂的比例为1g:60mL
‑
1g:100mL。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，提取结束后还包括除杂；优选地，所述除杂的方法包括离心或者过滤；优选地，所述离心的转速为8000
‑
12000r/min，离心的时间为8
‑
12min。5.一种含烟酰胺单核苷酸的松花粉提取液，其特征在于，采用权利要求1
...

【专利技术属性】
技术研发人员：张红，王建成，李颖，邢岩，李永强，李文成，张丽梅，侯思远，
申请(专利权)人：新时代健康产业集团有限公司，
类型：发明
国别省市：