【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】杀昆虫蛋白
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求于2019年12月20日提交的美国临时申请号 62/951,025的优先权,其全部内容通过引用并入本文。
[0003]本专利技术涉及分子生物学以及有害生物控制的领域。更特别地,本专利技术涉及包含两种不同组分的新颖杀昆虫蛋白,该两种不同组分均是最大生物活性所必需的。本专利技术进一步涉及表达产生这些杀昆虫蛋白的核酸,以及制造这些杀昆虫蛋白和相应的核酸的方法和使用这些杀昆虫蛋白和相应的核酸来控制昆虫的方法。
技术介绍
[0004]昆虫有害生物是引起作物损失的一个主要原因。仅在美国,由于各个属的昆虫的侵染每年就损失数十亿美元。除了大田作物的损失之外,昆虫有害生物对于菜农和果农、对于观赏性花卉的生产商而言也是一种负担,并且对于园丁和房屋所有者而言是一种令人讨厌的东西。
[0005]玉米根虫的多个物种被认为是最具破坏性的玉米有害生物。单在美国,三个物种,玉米根萤叶甲(Diabrotica virgifera virgifera,又称西方玉米根虫)、长角巴氏根萤叶甲(D.longicornis barberi,又称北方玉米根虫)、以及黄瓜十一星叶甲食根亚种(D.undecimpunctatahowardi,又称南方玉米根虫),在美国玉米带中,每年对玉米造成的损失超过十亿美元。美国南部的一种重要的玉米根虫有害生物是墨西哥玉米根虫(墨西哥玉米根萤叶甲(Diabrotica virgifera zeae))。在南美洲,南美叶甲(Diabrotica
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种核酸分子,其包含编码对昆虫有害生物有毒的蛋白的核苷酸序列,其中所述核苷酸序列(a)编码包含与SEQ ID NO:1
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6中的任一个或其毒素片段具有至少80%到至少99%序列同一性的氨基酸序列的蛋白质;或(b)与SEQ ID NO:7
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12中的任一个或其毒素编码片段具有至少80%到至少99%序列同一性;或者(c)是(a)或(b)的合成序列,该合成序列已经进行密码子优化用于在转基因生物中表达。2.如权利要求1所述的核酸分子,其中所述杀昆虫蛋白包含SEQ ID NO:1
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6中的任一个或其毒性片段的氨基酸序列。3.如权利要求1所述的核酸分子,其中所述核苷酸序列包含SEQ ID NO:7
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12中的任一个或其毒素编码片段。4.如权利要求1所述的核酸分子,其中所述合成核苷酸序列包含SEQ ID NO:13
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24中的任一个或其毒素编码片段。5.一种嵌合基因,其包含可操作地连接至如权利要求1
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4中任一项所述的核酸分子的异源启动子。6.如权利要求5所述的嵌合基因,其中所述异源启动子是植物可表达型启动子。7.如权利要求6所述的嵌合基因,其中所述植物可表达型启动子选自由以下组成的组的启动子:泛素、夜香树属黄病毒、玉米TrpA、OsMADS 6、玉蜀黍H3组蛋白、玉米蔗糖合成酶1、玉米醇脱氢酶1、玉米捕光复合物、玉米热休克蛋白、玉蜀黍mtl、豌豆小亚基RuBP羧化酶、稻肌动蛋白、稻亲环蛋白、Ti质粒甘露碱合酶、Ti质粒胭脂碱合酶、矮牵牛查尔酮异构酶、大豆富甘氨酸蛋白1、马铃薯糖蛋白、凝集素、CaMV 35S以及S
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E9小亚基RuBP羧化酶启动子。8.如权利要求5所述的嵌合基因,其中所述昆虫有害生物是鞘翅目昆虫有害生物。9.如权利要求8所述的嵌合基因,其中所述鞘翅目昆虫有害生物是根萤叶甲属昆虫有害生物。10.如权利要求9所述的嵌合基因,其中所述根萤叶甲属昆虫有害生物选自由以下组成的组:玉米根萤叶甲、巴氏根萤叶甲、黄瓜十一星叶甲食根亚种和玉蜀黍根萤叶甲。11.如权利要求5所述的嵌合基因,其中所述转基因生物是细菌或植物。12.如权利要求11所述的嵌合基因,其中所述转基因细菌选自由以下组成的属的组:芽孢杆菌属、梭菌属、致病杆菌属、发光杆菌属、巴斯德氏芽菌属、埃希氏菌属、假单胞菌属、欧文氏菌属、沙雷氏菌属、克雷伯菌属、沙门氏菌属、巴氏杆菌属、黄单胞菌属、链霉菌属、根瘤菌属、中华根瘤菌属、剑菌属、红假单胞菌属、嗜甲基菌属、农杆菌属、醋杆菌属、乳杆菌属、节杆菌属、固氮菌属、明串珠菌属和产碱杆菌属。13.如权利要求11所述的嵌合基因,其中所述植物是玉蜀黍植物。14.一种对昆虫有害生物有毒的蛋白质,其中所述蛋白质包含(a)与SEQ ID NO:1
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6中的任一个或其毒素片段的氨基酸序列具有至少80%到至少99%序列同一性的氨基酸序列;或(b)包含SEQ ID NO:1
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6中的任一个或其毒素片段的氨基酸序列;或(c)由与SEQ ID NO:7
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24中的任一个或其毒素编码片段的核苷酸序列具有至少80%到至少99%序列同一性的核苷酸序列编码的氨基酸序列;或(d)由包含SEQ ID NO:7
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24中的任一个或其毒素编码片段的核苷酸序列编码的氨基酸序列。15.如权利要求14所述的蛋白质,其中所述昆虫有害生物是鞘翅目昆虫有害生物。16.如权利要求15所述的蛋白质,其中所述鞘翅目昆虫有害生物是根萤叶甲属昆虫有
害生物。17.如权利要求16所述的蛋白质,其中所述根萤叶甲属昆虫有害生物选自由以下组成的组:玉米根萤叶甲、巴氏根萤叶甲、黄瓜十一星叶甲食根亚种和玉蜀黍根萤叶甲。18.一种重组载体,其包含如权利要求5所述的嵌合基因。19.一种宿主细胞,其包含如权利要求18所述的重组载体,其中所述宿主细胞是细菌细胞或植物细胞。20.如权利要求19所述的转基因细菌细胞,其中所述细菌细胞在芽孢杆菌属、梭菌属、致病杆菌属、发光杆菌属、巴斯德氏芽菌属、埃希氏菌属、假单胞菌属、欧文氏菌属、沙雷氏菌属、克雷伯菌属、沙门氏菌属、巴氏杆菌属、黄单胞菌属、链霉菌属、根瘤菌属、中华根瘤菌属、剑菌属、红假单胞菌属、嗜甲基菌属、农杆菌属、醋杆菌属、乳杆菌属、节杆菌属、固氮菌属、明串珠菌属或产碱杆菌属中。21.如权利要求20所述的转基因芽孢杆菌属细胞,其中所述芽孢杆菌属细胞是苏云金芽孢杆菌细胞。22.如权利要求19所述的转基因植物细胞,其中所述植物细胞是双子叶植物细胞或单子叶植物细胞。23.如权利要求22所述的转基因植物细胞,其中(a)所述双子叶植物细胞选自由以下组成的组:大豆细胞、向日葵细胞、番茄细胞、芸苔属作物细胞、棉花细胞、甜菜细胞以及烟草细胞;或(b)所述单子叶植物细胞选自由以下组成的组:大麦细胞、玉蜀黍细胞、燕麦细胞、稻细胞、高粱细胞、甘蔗细胞以及小麦细胞。24.一种转基因植物或植物部分,所述转基因植物或植物部分包含如权利要求23所述的转基因植物细胞。25.如权利要求24所述的转基因植物或植物部分,所述转基因植物或植物部分是转基因玉蜀黍植物或植物部分。26.一种杀昆虫组合物,其包含作为杀昆虫毒素共同起作用的第一组分和第二组分,其中所述第一组分是包含选自由SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:5组成的组的序列的肽,并且所述第二组分是包含选自由SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:6组成的组的序列的肽,并且其中所述杀昆虫毒素对至少一种根萤叶甲属有害生物昆虫有活性。27.如权利要求26所述的杀昆虫组合物,其中(a)所述第一组分包含SEQ ID NO:1并且所述第二组分包含SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:6;或(b)所述第一组分包含SEQ ID NO:3并且所述第二组分包含SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:6;或(c)所述第一组分包含SEQ ID NO:5并且所述第二组分包含SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:6;或(d)所述第一组分包含SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:5并且所述第二组分包含SEQ ID NO:2;或(e)所述第一组分包含SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:5并且所述第二组分包含SEQ ID NO:4;或(f)所述第一组分包含SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:5并且所述第二组分包含SEQ ID NO:6。28.如权利要求27所述的杀昆虫组合物,其中所述第一组分包含SEQ ID NO:1并且所述第二组分包含SEQ ID NO:2。29.如权利要求27所述的杀昆虫组合物,其中所述第一组分包含SEQ ID NO:3并且所述第二组分包含SEQ ID NO:4。
30.如权利要求27所述的杀昆虫组合物,其中所述第一组分包含SEQ ID NO:5并且所述第二组分包含SEQ ID NO:6。31.如权利要求26所述的杀昆虫组合物,其中所述根萤叶甲属有害生物选自由以下组成的组的根萤叶甲属物种:玉米根萤叶甲、巴氏根萤叶甲、黄瓜十一星叶甲食根亚种和玉蜀...
【专利技术属性】
技术研发人员:C,
申请(专利权)人:先正达农作物保护股份公司,
类型:发明
国别省市:
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