硅基质膜处理液及其在基因组提取中的应用制造技术

本发明专利技术涉及核酸提取技术领域，尤其为硅基质膜处理液及其在基因组提取中的应用，包括硅基质材料活化液，所述硅基质材料活化液可以提高硅基质材料核酸结合力，同时保证其对于基因组DNA提取的均一性和稳定性，活化液提供的酸性高盐环境可以除去膜上的污染物并活化表面官能团，同时活化液可在吸附膜表面形成保护层，隔绝与外界环境的接触，提高吸附柱的均一性和稳定性，使用所述硅基质材料活化液处理后，硅基吸附材料与核酸的结合能力提高，材料的稳定性和均一性得到改善。本发明专利技术通过使用活化处理可以提高硅基质材料核酸结合力，使用后硅基质膜处理后可以提高它与基因组DNA的吸附性和稳定性。性和稳定性。性和稳定性。

【技术实现步骤摘要】
硅基质膜处理液及其在基因组提取中的应用


[0001]本专利技术涉及核酸提取
，具体为硅基质膜处理液及其在基因组提取中的应用。

技术介绍

[0002]核酸包括DNA，RNA两种分子，是遗传物质的基础，核酸在细胞中常与蛋白质结合形成蛋白质
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核酸复合物，对核酸提取和纯化是分子生物学中基础技术，提取核酸的质和量直接关系到实验的成败，但核酸的提取和纯化通常较为繁琐费时，许多学者一直在研究优化核酸提取的方法；
[0003]传统的核酸提取方法多使用酚/氯仿等有毒的有机溶剂抽提，这种方法样本适应性好，可以满足大部分分子生物学实验要求，但操作繁琐费时，且有机溶剂易损坏实验员健康，还易对环境造成污染；
[0004]1992年发现玻璃在高盐条件下可以特异性吸附核酸后，玻璃粉吸附法成为新的核酸提取方法，但这种方法操作步骤多，耗时长，提取的核酸纯度较低，后来基于此原理产生的离心柱法解决了提取纯度低的缺陷，并减少了操作步骤，提高核酸提取的效率，而成为现在主流的提取方法；
[0005]离心柱法是基于硅基质材料对核酸特异性吸附进行提取和纯化，使用裂解液释放细胞中DNA后，硅基质材料吸附柱特异性吸附核酸，再经洗涤和洗脱后即可得到高纯度核酸，但硅基质材料存在不稳定和不均一问题，核酸结合力随硅基质材料吸附柱保存时间而下降等缺点，以玻璃纤维膜为例，玻璃纤维膜大多使用湿法制备，在打浆，抄造，干燥等过程中纤维表面易附着污染物，影响产品的均一性，此外，因过滤膜表面积大，表面活性高，在保存过程中易吸附其他杂质，如吸附柱所用材料析出物，进而影响吸附核酸的能力，进行55℃加速1d后，玻璃纤维制备的吸附柱提取核酸的量约降低20％，硅胶膜制备的吸附柱提取量约降低30％，使用我们特制的活化工艺可以克服以上缺陷。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于针对现有技术的不足之处，提供硅基质膜处理液及其在基因组提取中的应用，以解决
技术介绍
中提出的问题。
[0007]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：硅基质膜处理液及其在基因组提取中的应用，包括硅基质材料活化液，所述硅基质材料活化液可以提高硅基质材料核酸结合力，同时保证其对于基因组DNA提取的均一性和稳定性，活化液提供的酸性高盐环境可以除去膜上的污染物并活化表面官能团，同时活化液可在吸附膜表面形成保护层，隔绝与外界环境的接触，提高吸附柱的均一性和稳定性。
[0008]作为本专利技术的一种优选技术方案，使用所述硅基质材料活化液处理后，硅基吸附材料与核酸的结合能力提高，材料的稳定性和均一性得到改善。
[0009]作为本专利技术的一种优选技术方案，所述硅基质材料活化液中含有3
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5M GITC，0.1
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1M KAC，1
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100mM HAc。
[0010]作为本专利技术的一种优选技术方案，所述硅基质材料活化液进行处理的硅基质膜材料可以是硅胶，玻璃纤维，石英纤维中的一种或几种。
[0011]作为本专利技术的一种优选技术方案，所述硅基材料活化液的pH值在2
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6之间。
[0012]作为本专利技术的一种优选技术方案，所述硅基材料活化液的使用方式可以是浸泡，喷淋，涂抹中的一种或几种。
[0013]硅基质膜处理液及其在基因组提取中的应用，具体如下：
[0014]S1、取制备吸附柱所用硅基质膜，用处理液浸泡1天后阴凉处干燥，处理液组成：3M～5MGITC，0.1M KAC～0.3M KAC，10m～20mM HAc；
[0015]S2、将经过上述处理后的硅基质膜一部分放入55℃恒温箱1d，进行加热处理；
[0016]S3、切割处理的硅基质膜装入吸附柱，向吸附柱中加入500μl双蒸水，静置30s，12000r/min离心30s，并弃去滤液；
[0017]S4、按照济凡公司D202通用型基因组柱式提取试剂盒的操作步骤提取200μl人EDTA抗凝全血中的基因组DNA。使用分光光度计nanodrop检测所提取DNA的纯度，使用qubit荧光计检测所提取DNA浓度。
[0018]本专利技术具备以下有益效果：
[0019]该硅基质膜处理液及其在基因组提取中的应用，通过使用活化处理可以提高硅基质材料核酸结合力，使用后硅基质膜处理后可以提高它与基因组DNA的吸附性和稳定性。
附图说明
[0020]图1为本专利技术实施例一实验结果柱状示意图；
[0021]图2为本专利技术实施例二实验结果柱状示意图。
具体实施方式
[0022]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0023]请参阅图1，本实施方案中：硅基质膜处理液及其在基因组提取中的应用，包括硅基质材料活化液，硅基质材料活化液可以提高硅基质材料核酸结合力，同时保证其对于基因组DNA提取的均一性和稳定性，活化液提供的酸性高盐环境可以除去膜上的污染物并活化表面官能团，同时活化液可在吸附膜表面形成保护层，隔绝与外界环境的接触，提高吸附柱的均一性和稳定性。
[0024]本实施例中，使用硅基质材料活化液处理后，硅基吸附材料与核酸的结合能力提高，材料的稳定性和均一性得到改善；硅基质材料活化液中含有3
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5M GITC，0.1
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1M KAC，1
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100mM HAc；硅基质材料活化液进行处理的硅基质膜材料可以是硅胶，玻璃纤维，石英纤维中的一种或几种；硅基材料活化液的pH值在2
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6之间；硅基材料活化液的使用方式可以是浸泡，喷淋，涂抹中的一种或几种。
[0025]实施列一：
[0026]硅基质膜处理液及其在基因组提取中的应用，具体如下：
[0027]S1、取制备吸附柱所用硅基质膜，用处理液浸泡1天后阴凉处干燥，处理液组成：3MGITC，0.1M KACKAC，10mM HAc；
[0028]S2、将经过上述处理后的硅基质膜一部分放入55℃恒温箱1d，进行加热处理；
[0029]S3、切割处理的硅基质膜装入吸附柱，向吸附柱中加入500μl双蒸水，静置30s，12000r/min离心30s，并弃去滤液；
[0030]S4、按照济凡公司D202通用型基因组柱式提取试剂盒的操作步骤提取200μl人EDTA抗凝全血中的基因组DNA。使用分光光度计nanodrop检测所提取DNA的纯度，使用qubit荧光计检测所提取DNA浓度。
[0031]实施例二：
[0032]硅基质膜处理液及其在基因组提取中的应用，具体如下：
[0033]S1、取制备吸附柱所用硅基质膜，用处理液浸泡1天后阴凉处干燥，处理液组成：5MGITC，0.3M KAC，20mM HA本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.硅基质膜处理液及其在基因组提取中的应用，包括硅基质材料活化液，其特征在于：所述硅基质材料活化液可以提高硅基质材料核酸结合力，同时保证其对于基因组DNA提取的均一性和稳定性，活化液提供的酸性高盐环境可以除去膜上的污染物并活化表面官能团，同时活化液可在吸附膜表面形成保护层，隔绝与外界环境的接触，提高吸附柱的均一性和稳定性。2.根据权利要求1所述的硅基质膜处理液及其在基因组提取中的应用，其特征在于：使用所述硅基质材料活化液处理后，硅基吸附材料与核酸的结合能力提高，材料的稳定性和均一性得到改善。3.根据权利要求1所述的硅基质膜处理液及其在基因组提取中的应用，其特征在于：所述硅基质材料活化液中含有3
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5M GITC，0.1
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1M KAC，1
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100mM HAc。4.根据权利要求1所述的硅基质膜处理液及其在基因组提取中的应用，其特征在于：所述硅基质材料活化液进行处理的硅基质膜材料可以是硅胶，玻璃纤维，石英纤维中的一种或几种。5.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：俞萍，孙耀东，韩典森，王才宝，龚小鹏，
申请(专利权)人：济凡生物科技常州有限公司，
类型：发明
国别省市：