精确定量检测生物医药制品中残留293宿主细胞蛋白的方法及ELISA检测试剂盒技术

本发明专利技术提供一种精确定量检测生物医药制品中残留293宿主细胞蛋白的方法，其步骤包括：选取目标293宿主细胞，进行培养表达，获取293宿主细胞蛋白；用293宿主细胞蛋白免疫动物，获得抗293宿主细胞蛋白多克隆抗体；利用准确的覆盖率检测方法对纯化后的抗293宿主细胞蛋白多克隆抗体进检测；选择其中覆盖率最高的多克隆抗体，采用ELISA法检测样本中残留的293宿主细胞蛋白。还公开了相应的ELISA检测试剂盒。本发明专利技术利用含有高覆盖率的293HCP抗体的ELISA试剂盒来定量检测生物医药制品中残留的293HCP蛋白，检测结果可信度高，效率高，能够同时对多个样本进行检测，检测灵敏度高。检测灵敏度高。检测灵敏度高。

【技术实现步骤摘要】
精确定量检测生物医药制品中残留293宿主细胞蛋白的方法及ELISA检测试剂盒


[0001]本专利技术专利涉及一种精确定量检测生物医药制品中残留293宿主细胞蛋白的方法及ELISA检测试剂盒。

技术介绍

[0002]293细胞是人肾上皮细胞系，有多种衍生株，比如HEK293，293T/17等，来源都是人胚胎肾细胞，也常被称作“工具细胞”，实验中常使用它来进行，慢病毒包装生产及滴度测定，细胞转染，条件培养基制作，蛋白表达验证等试验。其在生物制品产业化应用价值优点如下：1)293细胞比较容易转染，是一个很常用的表达研究外源基因的细胞株，多用于瞬时转染表达重组蛋白；2)生长快，生长密度高，转染效率和外源蛋白表达量较高，遗传背景清楚，生理代谢稳定；3)贴壁培养、微载体培养、无血清悬浮培养三种方式均可用于293细胞的大规模培养；4)具有很高的质粒转染效率和对保持外源基因的高稳定性；5)对外界微环境较为敏感，可用于药物发现及细胞毒性测试。
[0003]293中重组表达生产某些蛋白质，这些蛋白质产品中有许多是用于人类和动物的治疗剂，因此，必须高度提纯。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种精确定量检测生物医药制品中残留293宿主细胞蛋白的方法，其特征在于其步骤包括：(1)选取常用293宿主细胞，进行培养表达，获取293宿主细胞蛋白；(2)用293宿主细胞蛋白免疫动物，获得抗293宿主细胞蛋白多克隆抗体；(3)利用准确的覆盖率检测方法对纯化后的抗293宿主细胞蛋白多克隆抗体进检测；(4)选择其中覆盖率最高的多克隆抗体，采用ELISA法检测样本中残留的293宿主细胞蛋白。2.根据权利要求1所述的精确定量检测生物医药制品中残留293宿主细胞蛋白的方法，其特征为：步骤(1)中所述的常用293宿主细胞为ATCC
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CRL
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1573、ATCC
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ACS
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4500、ATCC
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3216。3.根据权利要求2所述的精确定量检测生物医药制品中残留293宿主细胞蛋白的方法，其特征为：步骤(2)中的动物选择家兔。4.根据权利要求3所述的精确定量检测生物医药制品中残留293宿主细胞...

【专利技术属性】
技术研发人员：易红飞，王星，
申请(专利权)人：翌圣生物科技上海股份有限公司，
类型：发明
国别省市：