免疫指数作为检测靶标在制备预测癌症免疫治疗预后情况的试剂盒中的应用制造技术

本发明专利技术公开了免疫指数作为检测靶标在制备预测癌症免疫治疗预后情况的试剂盒中的应用，所述免疫指数＝T

【技术实现步骤摘要】
metastasis is a robust prognostic marker for advanced colorectal cancer》(Oncotarget，2016)公开的技术方案针对晚期结直肠癌，采用免疫组化染色的方法，得到肿瘤中心和浸润边缘区域的CD3，CD4，FOXP3，CD68，CD163的表达，提出三个免疫打分的方法：Immunoscore(IS)，IS
‑
metastatic，IS
‑
macrophage，均有预后显著相关，其中IS
‑
metastasis可以作为独立的预后标志物。
[0008]《Assessing PDL
‑
1and PD
‑
1in non
‑
small cell lung cancer：a novel immunoscore approach》(Clin Lung Cancer，2017)，公开的技术方案采用免疫组化染色，量化了非小细胞肺癌的原发灶和转移淋巴结组织内PD
‑
L1和PD
‑
1的表达，并根据该值计算出免疫打分。

技术实现思路

[0009]本专利技术的目的在于提供免疫指数作为检测靶标在制备预测癌症免疫治疗预后情况的试剂盒中的应用。
[0010]本专利技术的另一目的在于提供一种预测癌症免疫治疗预后情况的试剂盒，用于检测肿瘤样本中的免疫指数。
[0011]本专利技术的技术方案如下：
[0012]免疫指数作为检测靶标在制备预测癌症免疫治疗预后情况的试剂盒中的应用，所述免疫指数＝T
density
+aAPC
density
，其中，
[0013]T
density
＝(#CD3
+
T/#Cells)
×
100％，
[0014]APC
density
＝(#HLA
‑
DR
+
/#Cells)
×
100％，
[0015]#CD3
+
T为肿瘤样本的癌区ROI中的所有CD3阳性T细胞的数目，
[0016]#HLA
‑
DR
+
为肿瘤样本的癌区ROI中的所有HLA
‑
DR阳性抗原递呈细胞的数目，
[0017]#Cells为肿瘤样本的癌区ROI中的所有细胞的数目，
[0018]α为大于等于0且小于等于100的常数。
[0019]在本专利技术的一个优选实施方案中，所述癌症免疫治疗的方法为免疫检查点抑制剂疗法。
[0020]进一步优选的，所述癌症为恶性黑色素瘤。
[0021]在本专利技术的一个优选实施方案中，所述肿瘤样本为石蜡包埋切片样本、冰冻切片样本或浮动切片样本。
[0022]在本专利技术的一个优选实施方案中，还包括能够识别并计数所述肿瘤样本的癌区ROI中的CD3阳性T细胞和HLA
‑
DR阳性抗原递呈细胞设备。
[0023]本专利技术的另一技术方案如下：
[0024]一种预测癌症免疫治疗预后情况的试剂盒，包括用于检测免疫指数的试剂，其中，免疫指数＝T
density
+αAPC
density
，
[0025]T
density
＝(#CD3
+
T/#Cells)
×
100％，
[0026]APC
density
＝(#HLA
‑
DR
+
/#Cells)
×
100％，
[0027]#CD3
+
T为肿瘤样本的癌区ROI中的所有CD3阳性T细胞的数目，
[0028]#HLA
‑
DR
+
为肿瘤样本的癌区ROI中的所有HLA
‑
DR阳性抗原递呈细胞的数目，
[0029]#Cells为肿瘤样本的癌区ROI中的所有细胞的数目，
[0030]α为大于等于0且小于等于100的常数。
[0031]在本专利技术的一个优选实施方案中，所述癌症免疫治疗的方法为免疫检查点抑制剂疗法。
[0032]进一步优选的，所述癌症为恶性黑色素瘤。
[0033]在本专利技术的一个优选实施方案中，所述肿瘤样本为石蜡包埋切片样本、冰冻切片样本或浮动切片样本。
[0034]进一步优选的，所述试剂为能够同时标记CD3蛋白及HLA
‑
DR蛋白的试剂。
[0035]上述免疫检查点抑制剂疗法包括PD
‑
1抑制剂，PD
‑
L1抑制剂以及它们和其他药物比如化疗或抗血管生成药物的联合治疗方案。
[0036]本专利技术的有益效果是：本专利技术可以准确预测接受免疫检查点抑制剂疗法的预后情况，为恶性肿瘤患者的治疗方案的选择提供重要的参考。
附图说明
[0037]图1为本专利技术实施例1的。
具体实施方式
[0038]以下通过具体实施方式结合附图对本专利技术的技术方案进行进一步的说明和描述。
[0039]实施例1
[0040]将本专利技术方法应用于对恶性黑色素瘤患者接受免疫检查点抑制剂疗法的预后预测，在对患者进行抗PD
‑
1抑制剂免疫疗法后进行跟踪随访，根据实体肿瘤的疗效评价标准(RECIST 1.1)对患者治疗的预后情况进行评估。在此次黑色素瘤患者的队列中，共有4例非应答患者，6例应答患者。
[0041](1)对患者的肿瘤样本(肿瘤切除手术样本，其包括肿瘤细胞和癌旁组织)进行组织处理、固定和连续切片(后续需要2片组织样本切片)。收集样本后，快速、彻底的固定或冷冻样本。最常见的方法是石蜡包埋(FFPE)，也可以选择冰冻切片和浮动切片。
[0042]石蜡包埋切片采用以下步骤。
[0043]A、将组织在10％甲醛(或者其他的固定剂)中固定12
‑
48h。固定时间取决于组织厚度、温度及待检抗原的性质。
[0044]B、石蜡包埋。
[0045]C、切3
‑
5μm厚的切片。
[0046]D、将切片置于SIH4/聚左旋赖氨酸包被的载玻片上，使用无黏附剂的水浴。
[0047]E、沿切片边缘吸干水。
[0048]F、将切片置于60℃烤箱中30
‑
60min。
[0049]G、脱蜡后，将切片染色。
[0050]需要注意的是：对于富含脂肪的组织(如脑、乳腺)延长风干时间(如室温下过夜)可能增强组织切片的黏附；干燥温度超过60℃可能对某些抗原的检测产生不利影响或者增加背景染色；无论储存条件如何，延长石蜡切片的储存时间都可能降低某些抗原的免疫反应性。根据作者经验，石蜡块的切片不适合长时间储存；如果存档的石蜡切片的染本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.免疫指数作为检测靶标在制备预测癌症免疫治疗预后情况的试剂盒中的应用，其特征在于：所述免疫指数＝T
density
+αAPC
density
，其中，T
density
＝(#CD3
+
T/#Cells)
×
100％，APC
density
＝(#HLA
‑
DR
+
/#Cells)
×
100％，#CD3
+
T为肿瘤样本的癌区ROI中的所有CD3阳性T细胞的数目，#HLA
‑
DR
+
为肿瘤样本的癌区ROI中的所有HLA
‑
DR阳性抗原递呈细胞的数目，#Cells为肿瘤样本的癌区ROI中的所有细胞的数目，α为大于等于0且小于等于100的常数。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于：所述癌症免疫治疗的方法为免疫检查点抑制剂疗法。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于：所述癌症为恶性黑色素瘤。4.如权利要求1所述的应用，其特征在于：所述肿瘤样本为石蜡包埋切片样本、冰冻切片样本或浮动切片样本。5.如权利要求1至4中任一权利要求所述的应用，其特征在于：还包括能够识别并计数所述肿瘤样本的癌区中的CD3阳性T细胞、HLA
‑
DR阳性抗原递呈...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖旭，杨文娴，俞容山，
申请(专利权)人：厦门极元科技有限公司，
类型：发明
国别省市：