用于预测辅助生殖技术中成功妊娠的标志物及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种用于预测辅助生殖技术中成功妊娠的标志物及其应用，所述标志物，包括阴道宫颈微生物，所述阴道宫颈微生物包括Lactobacillus crispatus（卷曲乳杆菌）和Lactobacillus iners（惰性乳杆菌）。本发明专利技术在研究宫颈微生态对辅助生殖技术妊娠结局的影响时，发现了宫颈菌群的组成对妊娠结局的影响，并发现了宫颈菌群中Lactobacillus crispatus（卷曲乳杆菌）和Lactobacillus iners（惰性乳杆菌）对妊娠结局进行准确预测。特别是，本发明专利技术形成对辅助生殖技术人群的妊娠成功率的预测，对是否展开新周期辅助生殖技术的应用进行指导，提高了妊娠成功率。提高了妊娠成功率。提高了妊娠成功率。

【技术实现步骤摘要】
用于预测辅助生殖技术中成功妊娠的标志物及其应用


[0001]本专利技术属于人类辅助生殖领域。具体地，本专利技术提供了一种更可靠和准确的标志物，用于预测辅助生殖技术中成功妊娠的可能性。

技术介绍

[0002]辅助生殖技术的建立与发展，为不孕症家庭带来了希望。体外受精
‑
胚胎移植（IVF
‑
ET）作为主要的辅助生殖技术手段，为不孕症患者提供了有效的治疗方法。然而，其单次移植的临床妊娠率仅为40%
‑
50%，并且有部分患者存在反复植入失败的情况。如何提高胚胎移植的成功率，一直是辅助生殖
的热点和难点问题。成功的妊娠不仅需要发育良好的胚胎，也需要健康的子宫微环境。目前，即使移植经过染色体筛选的遗传学正常的囊胚，其单次成功妊娠的概率也不足65%。研究人员公认子宫微环境因素已经成为制约辅助生殖技术成功的关键因素。
[0003]子宫通过宫颈和阴道与外界相通。随着微生物组研究的不断深入，越来越多的研究发现生殖道的微生物组组成会影响子宫微环境，可能影响辅助生殖技术成功率（Koedooder 等人，2019）。
[0004]中国专利申请CN112384633A 描述了一种基于阴道内阴道加德纳菌、乳酸杆菌、詹氏乳酸杆菌和变形菌门的相对丰度来预测辅助生殖技术不会导致怀孕的方法。
[0005]此外，中国专利申请CN103930786A描述了一种基于尿液样品中存在的乳酸菌和葡萄球菌的相对量来预测受试对象怀孕成功或失败的方法。
[0006]这些预测方法初步探索了泌尿生殖道系统微生物组的组成对于预测辅助生殖技术成功率的可能性。尽管如此，随着微生物组检测技术和医学认知的不断进步与完善，临床实践的不断累积，生殖道微生物对于辅助生殖技术成功率的预测的方法也在不断标准化和精准化，预测的敏感性和特异性也逐渐提高，为选择切实满足临床医疗需求的生物标志物提供了可能。

技术实现思路

[0007]本专利技术的专利技术人经过标准化和规范化的样本采集、微生物检测和数据分析，发现了利用特定的宫颈菌群作为预测辅助生殖技术妊娠结局的标志物，可以有效预测体外受精
‑
胚胎移植的生化妊娠率和临床妊娠率。
[0008]为深入了解阴道微生物在预防女性泌尿生殖系统疾病和维持健康方面的作用，2011年Jacques Ravel等人为对396名北美女性的阴道微生物进行采样并测序，发现育龄期妇女的阴道微生物群能够分为五组，其中四组分别以惰性乳杆菌、卷曲乳杆菌、格氏乳杆菌或詹氏乳杆菌为主，而第五组的乳酸菌比例较低，严格厌氧菌的比例较高，如Atopobium, Gardnerella 等。【Ravel J,et al. Vaginal microbiome of reproductive
‑
age women. Proc Natl Acad Sci USA.2011】。
[0009]卷曲乳杆菌是人类阴道微生物群的常见成分。卷曲乳杆菌可以通过自身产生抗菌
剂，同时竞争性排斥病原菌，进而促进宿主的泌尿生殖道健康。
[0010]惰性乳杆菌是一种最近在阴道内检测到的物种，目前尚不清楚该物种在阴道健康中的作用。不局限于任何理论，本专利技术人首次发现Lactobacilluscrispatus（卷曲乳杆菌）和Lactobacillusiners（惰性乳杆菌）在成功妊娠的人群的阴道内的存在具有一定特性。本专利技术由此提出一种用于预测辅助生殖技术中成功妊娠的标志物及其应用。
[0011]具体而言，为了实现本专利技术的目的，本专利技术采用如下的技术方案。
[0012]本专利技术一方面涉及一种用于预测辅助生殖技术中成功妊娠的标志物，所述标志物包括阴道宫颈微生物，所述阴道宫颈微生物包括Lactobacilluscrispatus（卷曲乳杆菌）和Lactobacillusiners（惰性乳杆菌）。
[0013]在本专利技术的一个优选实施方式中，所述阴道宫颈微生物还包括下述菌中的一种或者多种的组合：a)普雷沃氏菌Prevotellatimonensis；b)纤毛菌Sneathiaamnii；c)粪普雷沃氏菌Prevotellacopri；d)羊水普雷沃氏菌Prevotellaamnii；e)粪普雷沃氏菌Prevotellastercorea；f)布劳特氏菌Blautiamassiliensis；g)长双歧杆菌Bifidobacteriumlongum。
[0014]本专利技术人发现，具有上述菌的情况下，受试者更难以怀孕成功。
[0015]本专利技术另一方面还涉及一种用于预测辅助生殖技术中成功妊娠的检测试剂盒，所述试剂盒包括检测上述阴道宫颈微生物在宫颈分泌物中相对丰度的试剂。
[0016]在本专利技术的一个优选实施方式中，根据Lactobacilluscrispatus（卷曲乳杆菌）和Lactobacillusiners（惰性乳杆菌）的相对丰度来判断受试者样本的菌群类型：Clu_1型是指Lactobacillusiners（惰性乳杆菌）相对丰度大于或等于59%；Clu_3型是指Lactobacilluscrispatus（卷曲乳杆菌）相对丰度大于或等于40%；Clu_2型是相对丰度不满足Clu_1型和Clu_3型的菌群类型。
[0017]在本专利技术的一个优选实施方式中，Clu_3型以卷曲乳杆菌为主，Clu_1型以惰性乳杆菌为主，Clu_2型是不以卷曲乳杆菌和惰性乳杆菌为主。
[0018]在本专利技术的一个优选实施方式中，在Clu_2分型中还细分包括Clu_2_1型，其中Clu_2_1型的判断至少满足以下条件之一：a)普雷沃氏菌Prevotellatimonensis相对丰度大于3%；b)纤毛菌Sneathiaamnii相对丰度大于1.5%；c)粪普雷沃氏菌Prevotellacopri相对丰度大于1%；d)羊水普雷沃氏菌Prevotellaamnii相对丰度大于1.5%；e)粪普雷沃氏菌Prevotellastercorea相对丰度大于0.5%；f)布劳特氏菌Blautiamassiliensis相对丰度大于1%；g)长双歧杆菌Bifidobacteriumlongum相对丰度大于0.5%。
[0019]本专利技术另一方面还涉及上述用于预测辅助生殖技术中成功妊娠的标志物或检测
试剂盒在制备预测辅助生殖技术中成功妊娠的诊断试剂中的应用。
[0020]在本专利技术的一个优选实施方式中，所述辅助生殖技术是体外受精
‑
胚胎移植技术（IVF
‑
ET）及其衍生技术，包括卵泡浆内单精子注射
‑
胚胎移植技术(ICSI
‑
ET)和胚胎植入前遗传学诊断
‑
胚胎移植技术（PGT
‑
ET）和冷冻胚胎移植技术（FET）。
[0021]本专利技术另一方面还涉及一种预测辅助生殖技术中成功妊娠的方法，所述方法包括以下步骤：（1）采集宫颈分泌物样本；（2）确定宫颈菌群菌种结构；（3）对本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于预测辅助生殖技术中成功妊娠的标志物，所述标志物包括阴道宫颈微生物，其特征在于，所述阴道宫颈微生物包括卷曲乳杆菌Lactobacillus crispatus和惰性乳杆菌Lactobacillus iners。2.根据权利要求1所述的标志物，其特征在于，所述阴道宫颈微生物还包括下述菌中的一种或者多种的组合：a)普雷沃氏菌Prevotella timonensis；b)纤毛菌Sneathia amnii；c)粪普雷沃氏菌Prevotella copri；d)羊水普雷沃氏菌Prevotella amnii；e)粪普雷沃氏菌Prevotella stercorea；f)布劳特氏菌Blautia massiliensis；g)长双歧杆菌Bifidobacterium longum。3.根据权利要求1所述的标志物，其特征在于，根据卷曲乳杆菌Lactobacillus crispatus和惰性乳杆菌Lactobacillus iners的相对丰度来判断受试者的菌群类型，其中：当惰性乳杆菌Lactobacillus iners相对丰度大于或等于59%时，判断受试者属于Clu_1型；当卷曲乳杆菌Lactobacillus crispatus相对丰度大于或等于40%时，判断受试者属于Clu_3型；相对丰度不满足Clu_1型和Clu_3型的菌群类型被判断为Clu_2型。4.根据权利要求3所述的标志物，其特征在于，菌群类型Clu_3型以卷曲乳杆菌为主， 菌群类型Clu_1型以惰性乳杆菌为主，菌群类型Clu_2型不以卷曲乳杆菌和惰性乳杆菌为主。5.根据权利要求4所述的标志物，其特征在于，Cl...

【专利技术属性】
技术研发人员：邵秀娟，马伟志，王震，冯涛，
申请(专利权)人：北京群峰纳源健康科技有限公司，
类型：发明
国别省市：