一种高效人类及哺乳动物细胞附着体表达载体、构建方法和应用技术

本发明专利技术属于基因工程及基因治疗技术领域，具体涉及一种高效人类及哺乳动物细胞附着体表达载体，同时还涉及该附着体表达载体的构建方法和应用。本发明专利技术在启动子上游反向插入第一核基质结合区序列，启动子下游正向插入内含子序列，内含子序列下游正向插入第二核基质结合序列，并进一步优选启动子序列为EF

【技术实现步骤摘要】
一种高效人类及哺乳动物细胞附着体表达载体、构建方法和应用


[0001]本专利技术属于基因工程及基因治疗
，具体涉及一种高效人类及哺乳动物细胞附着体表达载体，同时还涉及该附着体表达载体的构建方法和应用。

技术介绍

[0002]基因治疗为现代医学的许多领域带来了新的治疗可能性。基因治疗是指将正常基因或治疗性DNA序列以特定方式导入靶细胞中，以纠正缺陷基因，从而治愈疾病。自20世纪90年代初首次成功的基因治疗临床试验以来，已经完成了数千项基因治疗临床试验。基因治疗的成功在很大程度上取决于选择合适的基因传递载体，主要包括病毒载体和质粒载体。虽然病毒载体具有基因转移效率高的优势，但病毒蛋白的产生可能会对宿主细胞造成病理损伤。质粒载体不产生病毒蛋白，但它们的转染效率比较低。根据载体进入宿主细胞后的存在状态，可将载体分为整合载体和附着体载体。将外源基因整合到宿主细胞染色体上，很容易诱发插入突变，安全性较低。与整合载体不同，附着体载体不会整合到基因组中，而是附着在染色体上，它降低了插入突变的风险，具有更高的安全性。
[0003]申请公布号为CN1本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高效人类及哺乳动物细胞附着体表达载体，包括启动子序列，其特征在于，启动子序列上游反向插入第一核基质结合区序列，启动子序列下游正向插入内含子序列，内含子序列下游正向插入第二核基质结合区序列。2.如权利要求1所述的高效人类及哺乳动物细胞附着体表达载体，其特征在于，所述启动子序列为EF
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1α序列，如SEQ ID NO：1所示。3.如权利要求2所述的高效人类及哺乳动物细胞附着体表达载体，其特征在于，所述第一核基质结合区序列为MAR X
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29序列，如SEQ ID NO：2所示。4.如权利要求3所述的高效人类及哺乳动物细胞附着体表达载体，其特征在于，所述内含子序列为hCMV内含子序列，如SEQ ID NO：3所示。5.如权利要求4所述的高效人类及哺乳动物细胞附着体表达载体，其特征在于，所述内含子序列与第二核基质结合区序列之间还包括报告基因序列；所述第二核基质结合区序列为MAR特征性序列，如SEQ ID NO：4所示。6.如权利要求5所述的高效人类及哺乳动物细胞附着体表达载体，其特征在于，所述出发载体为pEGFP
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【专利技术属性】
技术研发人员：王小引，王天云，张伟莉，张玺，牛敬媛，李树军，张俊河，贾岩龙，李波，
申请(专利权)人：新乡医学院第一附属医院，
类型：发明
国别省市：