【技术实现步骤摘要】
一种自交联的抗氧化型PCA
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CMCS/OSA席夫碱水凝胶及其制备方法
[0001]本专利技术属于互穿聚合物网络复合材料生物医学工程
,涉及一种自交联的抗氧化 型PCA
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CMCS/OSA席夫碱水凝胶及其制备方法。
技术介绍
[0002]原儿茶酸(Protocatechuic acid,PCA)等酚类化合物在诸多研究中已被证实具有重要的抗氧 化特性,并且在神经保护和修复氧化损伤过程中似乎是非常有价值的潜在药物,如PCA对氧 化应激、嘌呤能和胆碱能酶活性以及氧化脑损伤中失调的代谢途径的治疗作用。相比于其他 器官,肾脏、肝脏和大脑更容易发生氧化损伤的高耗氧率(20%的自身氧气消耗),这种损伤的 特征主要体现为不饱和脂肪酸含量高,含铁量高,低水平的抗氧化剂和解毒酶,如超氧化物 歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)、谷胱甘肽还原酶(Glutathionereductase,GR)等, ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种自交联的抗氧化型PCA
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CMCS/OSA席夫碱水凝胶的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:第一步,制备两性电解质CMCSS1、将壳聚糖CS和氢氧化钠NaOH加入水和异丙醇的混合溶液中,室温下缓慢搅拌使CS充分溶胀碱化,碱化1~3h,得到分散体系A;其中,每20ml水和异丙醇的混合溶液中,加入2~6g的壳聚糖,加入2~10g的氢氧化钠;S2、将一氯乙酸溶于异丙醇溶液中,得到溶液B,并将溶液B缓慢滴加到步骤S1制备的分散体系A中,所述滴加时间为20~30min,在25℃~50℃温度下搅拌2~8h;其中,每4ml异丙醇溶液中对应加入2~5g的一氯乙酸;每4ml异丙醇溶液对应加入步骤S1中10~20ml的分散体系A;S3、室温下,向步骤S2反应完成后的CS分散介质中加入无水乙醇溶液,磁力搅拌0.5
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2h以中止反应;所述的步骤S1每20ml的分散体系A,对应加入50
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100ml无水乙醇溶液;S4、将步骤S3得到的反应产物过滤,用水和乙醇混合溶液多次冲洗,脱盐脱水至滤液pH值接近中性;S5、将步骤S4得到的产物进行真空干燥获得原儿茶酸接枝羧甲基壳聚糖聚合物CMCS白色粉末,该两性电解质CMCS能够同时满足碳二亚胺和席夫碱的反应条件,提供羧基和氨基与PCA和含有醛基的OSA反应合成IPN水凝胶;第二步,基于两性电解质CMCS得到水溶性PCA
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CMCS抗氧化接枝物S1、将2~4mmolCMCS溶于PBS缓冲溶液配制2%(w/v)溶液;S2、将原儿茶酸PCA溶于N,N二甲基甲酰胺DMF和2
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吗啉乙烷磺酸MES缓冲溶液的混合体系中,然后依次加入交联剂碳二亚胺EDC、N
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羟基琥珀酰亚胺NHS,得到混合溶液,避光冰水浴1~3h以活化羧基,得到活化溶液;S3、将步骤S2的活化溶液缓慢加入到S1步骤的CMCS溶液,每18ml活化液中对应加入10~30mlCMCS溶液,调节反应体系的pH值为6~7,将反应体系置于室温下避光磁力搅拌18h;S4、将步骤S3得到的反应溶液加入到透析袋中透析2~3天,并离心去除小分子物质;S5、将步骤S4中纯化溶液加入到孔板
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20~
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30℃的冰箱中冷冻4~7h,将冷冻后的纯化产物冷冻干燥,得到海绵状PCA
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CMCS接枝物,避光保存;真空冷冻干燥中冷阱的温度为
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40~
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60℃,时间为36~48h;第三步,制备提供大量醛基活性位点氧化海藻酸钠(OSA)的高分子材料S1、将海藻酸钠(SA)分散于乙醇中,得到分散体系A;高碘酸钠溶解于超纯水中,得到溶液B;所述的每25ml乙醇,对应加入3~12g海藻酸钠(SA);所述的每25ml超纯水,对应加入2~6g高碘酸钠;S2、将步骤S1中的溶液B加入到分散体系A中,避光连续搅拌4~10h,得到混合溶液A;所述溶液B与分散体系A的体积比为1~3:1;S3、向反应体系加入乙二醇,继续磁力搅拌30~60min以淬灭氧化反应,得到混合溶液B;所述的每25ml步骤S2混合溶液A,对应加入0.5~1ml乙二醇;S4、继续加入NaCl和无水乙醇析出沉淀,抽滤,真空干燥得到白色固体,重新溶于水用透析袋透析2~4天,离心去除不溶物,得到纯化液体;所述透析袋的分子截留量为8000
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14000Da,离心速度为2500rpm,时间为5min;所述的每25ml步骤S3混合溶液B,对应加入1~
3gNaCl和100~200ml无水乙醇;S5、将步骤S4得到的纯化液体置于
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20~
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30℃冰箱冷冻4~6h后,再进行真空冷冻干燥得到纯化的OSA;第四步,制备自交联的抗氧化型PCA
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CMCS/OSA席夫碱水凝胶S1、将第二步制备的水溶性PCA
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CMCS接枝物溶于PBS缓冲溶液...
【专利技术属性】
技术研发人员:关水,闫玉娇,孙长凯,周鑫,许建强,徐卫平,王仰斌,
申请(专利权)人:大连理工大学,
类型:发明
国别省市:
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