用于桃红四物汤薄层鉴别方法的展开剂及薄层鉴别方法技术

本发明专利技术公开了用于桃红四物汤薄层鉴别方法的展开剂及薄层鉴别方法，属于药品检测技术领域。本发明专利技术将乙酸乙酯、甲醇和水按照体积比20:(4～6):(2～4)混合作为展开剂，应用于桃红四物汤的薄层鉴别，使用一种展开剂，使用同一份样品制备供试品溶液，点样于同一块薄层板上，在同一个展开系统下展开，在一种检视条件下可同时鉴别桃红四物汤中白芍、桃仁、地黄和红花四个药味，在两种检视条件下可同时鉴别桃红四物汤中当归、川芎、白芍、桃仁、地黄和红花六个药味；该方法斑点清晰、分离度好、专属性强、背景无干扰、阴性对照无干扰、耐用性好；一次鉴别即可反映桃红四物汤的质量信息，鉴别更全面，更有利于控制桃红四物汤的质量，减少了试验次数，检验效率高。检验效率高。检验效率高。

【技术实现步骤摘要】
用于桃红四物汤薄层鉴别方法的展开剂及薄层鉴别方法


[0001]本专利技术涉及药品检测
，具体为用于桃红四物汤薄层鉴别方法的展开剂及薄层鉴别方法。

技术介绍

[0002]桃红四物汤出自清
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柴得华的《妇科冰鉴》，是国家中医药管理局首批公布的百首经典名方之一，属于按古代经典名方目录管理的中药复方制剂。桃红四物汤由地黄、当归、白芍、川芎、桃仁和红花六味药组成，四物汤中熟地为君，甘温滋腻，善能滋补营血；当归为臣，味辛性温，主入血分，力能补血，又补中有行，《本草纲目》卷16谓其“和血”；芍药为佐，味酸性寒，养血敛阴，柔肝营。川芎辛温走窜，擅能活血行气，祛瘀止痛，配入熟地、白芍、当归之滋补药中，可使补而不滞，亦为佐药。桃红四物汤是在四物汤的基础上加桃仁、红花，偏重于活血化瘀；适用于血瘀诸症。
[0003]薄层鉴别方法是中药复方制剂质量标准中定性鉴别的主要手段。《中药新药研究的技术要求》中“中药复方制剂质量标准的起草说明”【鉴别】项下要求：“可根据处方组成及研究资料确定建立相应的鉴别项目，原则上处方各药味均应进行试验研究，根据试验情况，选择列入标准中”。目前，包括《中国药典》在内的中药复方制剂质量标准【鉴别】项的设置大多按鉴别药味分列，1个处方药味1个鉴别项，即1块薄层板，展开1次，鉴别1个处方药味。如采用薄层色谱鉴别方法对中药复方制剂处方药味实现基本覆盖，所需的试验次数往往较多【参考文献：关于中药新药复方制剂“整体鉴别”新模式的思考】。桃红四物汤由六味药组成，目前，文献报道的桃红四物汤的薄层鉴别方法最多只同时鉴别其中两至三味药，其他药味的薄层鉴别方法的供试品溶液一般不相同，完成桃红四物汤各药味的薄层色谱鉴别，至少需要制备3种或以上的不同供试品溶液、用3种不同的展开系统进行展开，费时费力。中国专利文献CN 107478749在2017年12月15日公开了一种桃红四物汤的药物制剂的检测方法，采用3套薄层色谱方法用于鉴别处方中的四味药材，第一套方法同时鉴别桃仁和白芍；第二套方法同时鉴别当归和川芎；第三套方法鉴别红花；且三套方法的供试品溶液制备方法、展开剂均不相同；中国专利文献CN105535237A在2016年5月4日公开了一种桃红四物汤配方颗粒的制备方法及其质量控制方法，其质量控制方法包括红外指纹图谱、薄层定性鉴别及HPLC含量测定，建立了完善的质量标准，采用薄层色谱的一测多评技术，结合红外光谱和色谱法进行质量控制，可有效控制复方颗粒的质量，但其只能实现对组方中白芍、当归、川芎3味饮片的同时检测，且供试品溶液的制备中需要先使用有机溶剂进行提取纯化。

技术实现思路

[0004]针对现有技术中存在的问题，本专利技术提供了用于桃红四物汤薄层鉴别方法的展开剂及薄层鉴别方法，将乙酸乙酯
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甲醇
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水按照特定的体积比混合作为展开剂，该展开剂不分层，混合后即可使用，不需要低温长时间放置后再使用；本申请提供的桃红四物汤薄层鉴别方法，该方法斑点清晰、分离度好、专属性强、背景无干扰、耐用性好；一次鉴别试验即可
反映六个药味的质量信息，鉴别更全面，更有利于控制桃红四物汤的质量，且减少了薄层鉴别的试验次数，减少试剂用量，节省时间，提高了检验效率,解决了现有技术中需要制备多种供试品溶液、展开剂不同，检测麻烦的问题。
[0005]本专利技术提供一种用于桃红四物汤薄层鉴别方法的展开剂，所述展开剂由乙酸乙酯、甲醇和水组成，所述乙酸乙酯、甲醇和水的体积比为20:(4～6):(2～4)。
[0006]本专利技术还提供一种同时鉴别桃红四物汤全方六味药材的薄层鉴别方法，包括以下步骤：
[0007]S1、供试品溶液的制备：称取桃红四物汤组合物，加入溶剂稀释溶解，萃取，合并乙醚液，挥干，再加入甲醇溶解，得到醚层供试品溶液；水层溶液通过AB
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8大孔吸附树脂柱，用氨水溶液洗脱，弃去氨液，再用水洗脱，弃去水液，继续用乙醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，得到水层供试品溶液；
[0008]S2、对照药材溶液的制备：精密称取桃仁、白芍、生地黄、红花，分别加入溶剂，加热回流提取，趁热过滤，滤液通过AB
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8大孔吸附树脂柱，用氨水溶液洗脱，弃去氨液，再用水洗脱，弃去水液，继用乙醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，得桃仁、白芍、生地黄、红花对照药材溶液；另取当归、川芎对照药材，分别加入溶剂，加热回流提取，过滤，乙醚萃取，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇溶解，即得当归、川芎对照药材溶液；
[0009]S3、对照品溶液的制备：取苦杏仁苷对照品、芍药苷对照品、地黄苷D对照品、羟基红花黄色素A对照品适量，加入甲醇制成混合对照品溶液1，取阿魏酸对照品、藁本内酯对照品适量，加入甲醇制成混合对照品溶液2；
[0010]S4、薄层色谱法进行检测：吸取步骤S1制备的供试品溶液、步骤S2制备的对照药材溶液和步骤S3制备的对照品溶液1
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2，分别点于一块硅胶G板上，将乙酸乙酯、甲醇和水按照体积比20:(4～6):(2～4)混合作为展开剂，展开，晾干，置紫外灯下检视，乙醚层供试品色谱中，在与阿魏酸对照品、藁本内酯对照品和当归、川芎对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；水层供试品色谱中，在与羟基红花黄色素A对照品和红花对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
[0011]然后再喷于显色剂中，在105℃加热至斑点显色，水层供试品色谱中，在与苦杏仁苷对照品和桃仁对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；在与芍药苷对照品和白芍对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；在与地黄苷D对照品和地黄对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；在与羟基红花黄色素A对照品和红花对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
[0012]进一步的，所述步骤S1、S2中的氨水溶液体积浓度为4％。
[0013]进一步的，所述步骤S1中的乙醇洗脱的体积浓度为20％。
[0014]进一步的，所述步骤S1、S2中的溶剂为水。
[0015]进一步的，所述步骤S2中的乙醚萃取过程为：乙醚振摇提取2次，每次50ml。
[0016]进一步的，所述步骤S2中的过滤为用0.45um微孔滤膜过滤。
[0017]进一步的，所述步骤S3中的混合对照品溶液1、混合对照品溶液2的浓度为每1ml各含0.5mg对照品。
[0018]进一步的，所述步骤S4中的显色剂为用磷钼酸2g，加水20ml使溶解，再缓缓加入硫酸30ml，混匀，得到的磷钼酸硫酸溶液。
[0019]本专利技术还提供一种同时鉴别桃红四物汤中白芍、桃仁、地黄、红花四个药味的薄层鉴别方法，包括以下步骤：
[0020]S1、供试品溶液的制备：取供试品，置烧杯中，加水稀释或溶解，通过大孔吸附树脂柱，用水洗涤烧杯，洗液一并通过大孔吸附树脂柱，用氨溶液洗脱，弃去氨液，再用水洗脱，弃去水液，继续用20％乙醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，作为供试品溶本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于桃红四物汤薄层鉴别方法的展开剂，其特征在于，所述展开剂由乙酸乙酯、甲醇和水组成，所述乙酸乙酯、甲醇和水的体积比为20:(4～6):(2～4)。2.一种同时鉴别桃红四物汤全方六味药材的薄层鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、供试品溶液的制备：称取桃红四物汤组合物，加入溶剂稀释溶解，萃取，合并乙醚液，挥干，再加入甲醇溶解，得到醚层供试品溶液；水层溶液通过AB
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8大孔吸附树脂柱，用氨水溶液洗脱，弃去氨液，再用水洗脱，弃去水液，继续用乙醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，得到水层供试品溶液；S2、对照药材溶液的制备：精密称取桃仁、白芍、生地黄、红花，分别加入溶剂，加热回流提取，趁热过滤，滤液通过AB
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8大孔吸附树脂柱，用氨水溶液洗脱，弃去氨液，再用水洗脱，弃去水液，继用乙醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，得桃仁、白芍、生地黄、红花对照药材溶液；另取当归、川芎对照药材，分别加入溶剂，加热回流提取，过滤，乙醚萃取，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇溶解，即得当归、川芎对照药材溶液；S3、对照品溶液的制备：取苦杏仁苷对照品、芍药苷对照品、地黄苷D对照品、羟基红花黄色素A对照品适量，加入甲醇制成混合对照品溶液1，取阿魏酸对照品、藁本内酯对照品适量，加入甲醇制成混合对照品溶液2；S4、薄层色谱法进行检测：吸取步骤S1制备的供试品溶液、步骤S2制备的对照药材溶液和步骤S3制备的对照品溶液1
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2，分别点于一块硅胶G板上，采用如权利要求1所述的展开剂，展开，晾干，置紫外灯下检视，乙醚层供试品色谱中，在与阿魏酸对照品、藁本内酯对照品和当归、川芎对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；水层供试品色谱中，在与羟基红花黄色素A对照品和红花对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；然后再喷于显色剂中，在105℃加热至斑点显色，水层供试品色谱中，在与苦杏仁苷对照品和桃仁对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；在与芍药苷对照品和白芍对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；在与地黄苷D对照品和地黄对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；在与羟基红花黄色素A对照品和红花对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。3.根据权利要求2所述的同时鉴别桃红四物汤全方六味药材的薄层鉴别方法，其特征在于，所述步骤S1、S2中的氨水溶液体积浓度为4％。4.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：区淑蕴，张文芳，刘青，林碧珊，高永坚，肖炯昌，汤春花，胡梅，
申请(专利权)人：国药集团广东环球制药有限公司，
类型：发明
国别省市：