牛结核检测试剂盒制造技术

本实用新型专利技术公开一种牛结核检测试剂盒，其中，牛结核检测试剂盒包括试剂存放区和反应板存放区；所述试剂存放区至少放置有第一试剂瓶、第二试剂瓶和第三试剂瓶，所述反应板存放区放置有抗原包被板；所述第一试剂瓶容纳有荧光抗体溶液，所述第二试剂瓶容纳有清洗液，所述第三试剂瓶容纳有样本稀释液，所述抗原包被板表面设有抗原反应层。本实用新型专利技术技术方案简化检测操作并提升检测结果的准确性。化检测操作并提升检测结果的准确性。化检测操作并提升检测结果的准确性。

【技术实现步骤摘要】
牛结核检测试剂盒


[0001]本技术涉及免疫层析检测
，特别涉及一种牛结核检测试剂盒。

技术介绍

[0002]牛结核分枝杆菌病(Brucellosis)由牛结核分枝杆菌(Brucella)引起的的一种人兽共患性传染病，我国将其列为二类动物疫病。以组织器官的结核结节性肉芽肿和干酪样、钙化的坏死病灶为特征。OIE将其列为B类疫病。结核分枝杆菌主要分三个型：即牛分枝杆菌(牛型)、结核分枝杆菌(人型)和禽分枝杆菌(禽型)。该病病原主要为牛型，人型、禽型也可引起本病。结核杆菌的形态，不同的型稍有差异,牛型结核菌比人型菌短粗，且着色不均匀。结核杆菌为严格的需氧菌，生长最适pH为：牛型结核菌5.9～6.9、人型菌7.4～8.0、禽型菌7.2。最适温度为37～38℃。结核杆菌的菌落、毒力及耐药性可发生变异。典型的菌落为粗糙型，毒力强，而变异菌株菌落则呈光滑型，毒力弱。结核杆菌对外界的抵抗力很强，在土壤中可生存7个月，在粪便内可生存5个月，在奶中可存活90天。
[0003]目前牛结核分枝杆菌的检测方法有多种，主要包括病原学和血清学两大方面。由于病原分离对实验室条件要求较高，且常呈现分离不出病原的现象等缺点，现已基本不用此方法；PCR方法和基因探针方法特异性强、敏感性高，但基因组DNA的提取也涉及到生物安全问题。现在方法有病原检查：显微镜检查(根据本菌的抗酸性特征，采用萋
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尼氏染色或荧光抗酸染色，检查抗酸性杆菌)、病原分离鉴定(用选择性培养基分离，再通过培养和生化试验进行鉴定)、DNA寡聚核苷酸探针或聚合酶链反应(测定培养分离物或可疑动物组织样品中的牛分枝杆菌DNA)。迟发性过敏试验：皮内注射牛结核菌素，三天后测量注射部位的肿胀程度(本法为测定牛结核病的标准方法，也为国际贸易指定的诊断方法)。血清学反应：淋巴细胞增生试验、γ
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干扰素试验和酶联免疫吸附试验。以上检测方法目前存在着特异性不好，灵敏度不够或者操作繁等因素。

技术实现思路

[0004]本技术的主要目的是提供一种牛结核检测试剂盒，旨在提供一种利用荧光时间分辨方法检测牛结核分枝杆菌抗体的检测试剂盒，用于牛牛结核分枝杆菌病的宰前检疫、进出口交易市场的现场诊断、动物流动过程中的检疫、以及方便于基层养殖户对牛牛结核分枝杆菌病的检测。在简化检测操作的同时并提升检测结果的准确性。
[0005]为实现上述目的，本技术提出的牛结核检测试剂盒，至少包括试剂存放区和反应板存放区；所述试剂存放区至少放置有第一试剂瓶、第二试剂瓶和第三试剂瓶，所述反应板存放区放置有抗原包被板；所述第一试剂瓶容纳有荧光抗体溶液，所述第二试剂瓶容纳有清洗液，所述第三试剂瓶容纳有样本稀释液，所述抗原包被板表面设有抗原反应层。
[0006]可选地，所述荧光抗体的激发波长为365纳米，所述荧光抗体的发射波长为610纳米；所述荧光抗体配置为Eu微球。
[0007]可选地，所述抗原反应层配置为EC蛋白抗原层。
[0008]可选地，所述牛结核检测试剂盒还包括减震垫，所述减震垫至少设有第一安装槽、第二安装槽、第三安装槽和第四安装槽；所述第一试剂瓶设于所述第一安装槽，所述第二试剂瓶设于所述第二安装槽，所述第三试剂瓶设于所述第三安装槽，所述抗原包被板设于所述第四安装槽。
[0009]可选地，所述抗原包被板包括平底孔板和容置板，所述平底孔板设于所述容置板上，所述平底孔板开设有多个反应孔，所述反应孔的表面设有所述抗原反应层。
[0010]可选地，所述平底孔板与所述容置板可拆卸连接。
[0011]可选地，所述平底孔板包括多组反应杯组，所述反应杯组包括多个依次串联固接的反应杯。
[0012]可选地，所述反应杯组的至少一侧开设有握持部。
[0013]可选地，所述平底孔板的顶部覆设有防尘膜。
[0014]可选地，所述牛结核检测试剂盒还包括真空包装袋，所述真空包装袋真空包装所述抗原包被板。
[0015]本技术技术方案在室温的条件下使用将样本稀释液对样本进行稀释，并把稀释好的样本加入抗原包被板中进行反应，静置反应过后用清洗液清洗抗原包被板并加入荧光抗体溶液染色，静置染色后再使用清洗液进行清洗并拍干残留的液体。将拍干后的抗原包被板置于分析仪中进行检测，根据荧光的强弱可直接判断并分析检测结果。
附图说明
[0016]为了更清楚地说明本技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图示出的结构获得其他的附图。
[0017]图1为本技术牛结核检测试剂盒一实施例的结构示意图；
[0018]图2为本技术牛结核检测试剂盒一实施例的内部结构示意图；
[0019]图3为本技术牛结核检测试剂盒的平底孔板一实施例的结构示意图；
[0020]图4为本技术牛结核检测试剂盒的反应杯一实施例的半剖图；
[0021]图5为本技术牛结核检测试剂盒的容置板一实施例的结构示意图。
[0022]附图标号说明：
[0023]标号名称标号名称1牛结核检测试剂盒11第一试剂瓶12第二试剂瓶13第三试剂瓶21抗原包被板22抗原反应层211平底孔板212容置板213反应孔214反应杯215握持部216卡接槽217卡接部3减震垫31第一安装槽32第二安装槽33第三安装槽34第四安装槽
resolved fluoroisnmunoassay，TRFIA)进行检测的，它是一种特殊的荧光分析。利用了荧光的波长与其激发波长的巨大差异克服了普通紫外－可见分光分析法中杂色光的影响，同时，荧光分析与普通分光不同，光电接受器与激发光不在同一直线上，激发光不能直接到达光电接受器，从而大幅度的提高了光学分析的灵敏度。当进行超微量分析的时候，该分析法解决了激发光的杂散光的影响，并提高了检测的灵敏度。
[0034]普通的荧光标志物荧光寿命非常短，激发光消失，荧光也消失。但部分稀土金属(Eu、Tb、Sm、Dy)的荧光寿命较长，可达1－2ms，能够满足测量要求。于本实施例中，所述荧光抗体采用Eu微球，所述Eu微球的激发波长为365纳米，所述Eu微球的发射波长为610纳米。
[0035]荧光抗体溶液的制备包括：
[0036](1)微球用0.05mol/L的MES缓冲液清洗多次；
[0037](2)每50ug的Eu3+微球加入16ug的EDC中进行活化，并离心；
[0038](3)再用0.05mol/L的MES缓冲液复溶，并加入妊娠相关广谱二抗SPA 10～100ug，磁力搅拌器搅拌混匀反应1～3小时；并离心；
[0039](4)用0.02mol/L的Hris
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Hcl缓冲液复溶，并加入终浓度为1％的BSA (Bovine serum albumin，牛血本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种牛结核检测试剂盒，其特征在于，至少包括试剂存放区和反应板存放区；所述试剂存放区至少放置有第一试剂瓶、第二试剂瓶和第三试剂瓶，所述反应板存放区放置有抗原包被板；所述第一试剂瓶容纳有荧光抗体溶液，所述第二试剂瓶容纳有清洗液，所述第三试剂瓶容纳有样本稀释液，所述抗原包被板表面设有抗原反应层。2.如权利要求1所述的牛结核检测试剂盒，其特征在于，所述荧光抗体的激发波长为365纳米，所述荧光抗体的发射波长为610纳米；所述荧光抗体配置为Eu微球。3.如权利要求1所述的牛结核检测试剂盒，其特征在于，所述抗原反应层配置为EC蛋白抗原层。4.如权利要求1所述的牛结核检测试剂盒，其特征在于，所述牛结核检测试剂盒还包括减震垫，所述减震垫至少设有第一安装槽、第二安装槽、第三安装槽和第四安装槽；所述第一试剂瓶设于所述第一安装槽，所述第二试剂瓶设于所述第二安装槽，所述第三试剂瓶设于...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨宏，熊新灿，温世文，余勃，
申请(专利权)人：深圳市中科同辉科技有限公司，
类型：新型
国别省市：