扣囊复膜酵母菌株SF-1、用该菌株制备的胞外蛋白及制备方法技术

本公开提供了一种扣囊复膜酵母菌株SF

【技术实现步骤摘要】
扣囊复膜酵母菌株SF
‑
1、用该菌株制备的胞外蛋白及制备方法


[0001]本公开属于生物发酵
，具体涉及扣囊复膜酵母(Saccharomycopsis fibuligera)菌株SF
‑
1、用该菌株制备的胞外蛋白及制备方法。

技术介绍

[0002]扣囊复膜酵母(Saccharomycopsis fibuligera)，又称拟内孢霉，是子囊菌门(Ascomycota)酵母亚门(Saccharomycotina)下酵母纲(Saccharomycetes)酵母目(Saccharomycetales)酵母科(Saccharomycetaceae)复膜酵母属(Saccharomycopsis)的一个种，一类产子囊孢子的二形态酵母。扣囊复膜酵母是FDA公认的食品安全级酵母，与其他微生物协同作用对酒精的生成和白酒风味的形成都具有重要贡献。扣囊复膜酵母作为一类高产酶的应用型酵母，分泌的淀粉酶(α
‑
淀粉酶、葡糖淀粉酶、生淀粉糖化酶)、蛋白酶、β
‑
葡萄糖苷酶等水解酶类，可以将大分子物质分解为小分化合物，其应用在食品发酵和制药工业中具有重要的意义。
[0003]但是，关于扣囊复膜酵母分泌的胞外蛋白应用于化妆品方面的报道目前还是空白，专利技术人筛选得到一种新型扣囊复膜酵母(Saccharomycopsis fibuligera)菌株SF
‑
1，其分泌的胞外蛋白具有高效的清除自由基、保护皮肤紫外损伤和提高内源性抗氧化酶的活性从而抗氧化的作用，可以作为功效成分用于化妆品。

技术实现思路

[0004]在下文中给出了关于本公开的简要概述，以便提供关于本公开的某些方面的基本理解。应当理解，这个概述并不是关于本公开的穷举性概述。它并不意图确定本公开的关键或重要部分，也不意图限定本公开的范围。其目的仅仅是以简化的形式给出某些概念，以此作为稍后论述的更详细描述的前序。
[0005]为解决上述技术问题，本公开提供的技术方案是：
[0006]第一方面，本公开提供一种扣囊复膜酵母(Saccharomycopsis fibuligera)菌株SF
‑
1，其保藏编号为CGMCC No.22671。
[0007]本公开的扣囊复膜酵母(Saccharomycopsis fibuligera)菌株SF
‑
1由申请人从黄酒曲中分离纯化得来，具体做法如下：将黄酒曲接种于YPD液体培养基(酵母浸出粉10g/L，蛋白胨20g/L，琼脂粉15g/L，葡萄糖20g/L)中培养制成菌液，取100μl菌液用灭菌水稀释10倍，继续用无菌水稀释至10
‑6～10
‑7倍，吸取50μL稀释后的菌液于孟加拉红固体平板上(孟加拉红0.033g/L，氯霉素0.1g/L，MgSO
4 0.5g/L，KH2PO41g/L，蛋白胨5g/L，葡萄糖10g/L，琼脂粉15g/L)，用涂布棒涂匀，28℃培养48h。挑选单个的具有典型酵母菌菌落特征且形态差异较为明显的菌落，划线纯化2～3代，将上述分离纯化得到的酵母菌接入YPD斜面培养基，4℃保藏。
[0008]第二方面，本公开提供一种扣囊复膜酵母胞外蛋白的制备方法，包括：
[0009]将上述扣囊复膜酵母(Saccharomycopsis fibuligera)菌株SF
‑
1经活化、纯化、扩大培养处理所得种子液接种至液体发酵培养基进行发酵培养处理得到发酵液；
[0010]对所述发酵液进行分离处理得到上清液，对所述上清液进行沉淀处理即得所述胞外蛋白。
[0011]进一步地，上述胞外蛋白的制备方法中，所述种子液的OD值为0.5
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1.0，所述种子液和所述液体发酵培养基的体积之比为2％
‑
5％(比如2.2％、2.5％、3％、3.5％、4％、4.5％等)。
[0012]进一步地，上述胞外蛋白的制备方法中，所述培养基为YPD培养基，其配方为：20g/L的葡萄糖、20g/L的胰蛋白胨和10g/L的酵母浸粉，如果是固体培养基则另添加20g/L的琼脂粉；所述培养基在接种前需经灭菌处理，比如在115℃下高温灭菌20min。
[0013]进一步地，上述胞外蛋白的制备方法中，所述发酵培养处理的温度为25
‑
35℃(比如26℃、28℃、30℃、32℃/34℃等)，时间为24
‑
48h(比如28h、30h、35h、40h、42h、45h等)。
[0014]更进一步地，所述发酵培养处理在摇床中进行，摇床中转速为150r/min
‑
180r/min(比如155r/min、160r/min、165r/min、170r/min、175r/min)。
[0015]进一步地，上述胞外蛋白的制备方法中，所述分离处理采用离心方法；更优选地，离心转速为4500r/min
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5500r/min(比如4600r/min、4800r/min、5000r/min、5200r/min、5400r/min等)，离心时间为10min
‑
20min(比如12min、15min、18min等)。
[0016]进一步地，上述胞外蛋白的制备方法中，所述沉淀处理采用本领域内常规方法处理，比如醇沉法，硫酸铵法等。
[0017]进一步地，上述胞外蛋白的制备方法中，所述沉淀处理包括：将所述上清液置于冰水浴中，在磁力搅拌器的搅拌下加入硫酸铵至溶液饱和，搅拌10～30min后于离心机以约10000r/min离心10min收集沉淀。
[0018]进一步地，上述胞外蛋白的制备方法中，所述沉淀处理包括：往所述上清液中加入2
‑
3倍体积的无水乙醇，于4℃下醇沉24h，4900r/min离心收集沉淀。
[0019]第三方面，本公开提供一种由上述制备方法制得的胞外蛋白。
[0020]第四方面，本公开还提供一种含有上述胞外蛋白的化妆品。所述化妆品可以是面膜、精华液、面霜、乳液等。
[0021]按上述方案，所述化妆品成分中所述胞外蛋白的质量百分含量为3.0％～0.1％(比如2.5％、2.0％、1.5％、1.25％、1.0％、0.7％、0.5％等)。
[0022]相比于现有技术，本公开的有益效果包括但不限于：
[0023]1、本公开提供一种扣囊复膜酵母(Saccharomycopsis fibuligera)菌株SF
‑
1，其保藏编号为CGMCC No.22671，该菌株能生产胞外蛋白，该胞外蛋白具有高效的清除自由基、保护皮肤紫外损伤和提高内源性抗氧化酶的活性从而抗氧化的作用，可以作为功效成分加入到化妆品配方中，制备面膜、精华液、防晒霜、乳液等化妆品；
[0024]2、本公开提供的扣囊复膜酵母胞外蛋白作为化妆品功效成分具有功效性强、成本低、操作简单、绿色安全等特征，具有较强的实用本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种扣囊复膜酵母(Saccharomycopsis fibuligera)菌株SF
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1，其保藏编号为CGMCC No.22671。2.一种扣囊复膜酵母胞外蛋白的制备方法，其特征在于，包括：将权利要求1所述的扣囊复膜酵母(Saccharomycopsis fibuligera)菌株SF
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1经活化、纯化、扩大培养处理所得种子液接种至液体发酵培养基进行发酵培养处理得到发酵液；对所述发酵液进行分离处理得到上清液，对所述上清液进行沉淀处理即得所述胞外蛋白。3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述种子液的OD值为0.5
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1.0，所述种子液和所述液体发酵培养基的体积之比为2％
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5％。4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述培养基为YPD培养基，其配方为：20g/L的葡萄糖、20g/L的胰蛋白胨和10g/L的酵母浸粉，如果是固体培养基则另添加20g/L的琼脂粉；所述培养基在接种前需经灭菌处理。5.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，上述胞外蛋白的制备方法中，所述发酵培养处理的温度为25
‑
35℃，时间为24

【专利技术属性】
技术研发人员：李萌，王昌涛，张永涛，王冬冬，赵丹，张佳婵，
申请(专利权)人：北京工商大学，
类型：发明
国别省市：