超高效合相色谱法快速测定果蔬泥中甲氰菊酯对映体残留的方法技术

本发明专利技术涉及果蔬泥中农药残留的检测方法，尤其涉及一种超高效合相色谱法快速测定果蔬泥（苹果泥、草莓泥、番茄泥）中甲氰菊酯对映体残留的方法。该方法试样经乙腈提取，固相萃取柱净化后，采用CHIRALPAK AD

【技术实现步骤摘要】
超高效合相色谱法快速测定果蔬泥中甲氰菊酯对映体残留的方法


[0001]本专利技术涉及果蔬泥中农药残留的检测方法，尤其涉及一种超高效合相色谱法快速测定果 蔬泥中甲氰菊酯对映体残留的方法。

技术介绍

[0002]甲氰菊酯(Fenpropathrin)，化学名称为α
‑
氰基
‑3‑
苯氧基苄基
‑
2,2,3,3
‑
四甲基环丙 烷酸酯，是一种重要的拟除虫菊酯类杀虫杀螨剂，中等毒性，杀虫谱广，常被广泛用于柑橘、 苹果、荔枝等果蔬的病害防治，其大量的使用对食品和环境污染问题也引起人们的广泛重视。 研究表明，甲氰菊酯具有1个手性碳原子，存在一对对映体，其结构为(
‑
)
‑
甲氰菊酯和(+)
‑ꢀ
甲氰菊酯
[1
‑
3]如图1所示。
[0003]甲氰菊酯不同对映体之间杀虫活性和降解速度差异较大，其中(+)
‑
甲氰菊酯的杀虫活 性高于(
‑
)
‑
甲氰菊酯，且降解速度更快
[1]。在农业生产过程中，若使用单一高活性(+)
‑ꢀ
甲氰菊酯，将有助于降低甲氰菊酯的使用量，减少农药对生态环境的污染，目前甲氰菊酯仍 然是以外消旋体的形式生产和使用。为了控制甲氰菊酯的规范使用，各国制定了该类农药在 果蔬中的最大残留限量标准，表1列出了常见的婴幼儿辅食果蔬泥中所添加果蔬的甲氰菊酯残 留限量。但这些法规均只是规定了甲氰菊酯的外消旋体使用安全限量，并未精确规定(+)
‑ꢀ
甲氰菊酯和(
‑
)
‑
甲氰菊酯的残留限量。
[0004]表1甲氰菊酯农药在苹果、草莓、番茄的残留限量要求
[0005][0006]目前，毛细管电泳色谱法(CEC)
[4,5]、气相色谱法(GC)
[6,7]、气相色谱
‑
质谱法(GC
‑
MS) [8,9]、高效液相色谱法(HPLC)
[10
‑
12]、液相色谱
‑
串联质谱法(LC
‑
MS/MS)
[13
‑
15]等方法在手性 化合物分离领域均发挥着重要作用。其中CEC色谱峰形良好，但分析时间长；GC和GC
‑
MS 灵敏度高，分离效果好，但主要分析沸点较低，热稳定性好的化合物；HPLC分离度好，但有 机试剂消耗量大；LC
‑
MS/MS准确性高，但仪器昂贵、成本高。超高效合相色谱技术(UPC2) 作为一种新型高效的色谱分离技术受到了广泛的关注，该技术的主体流动相为超临界状态 CO2，可通过调整系统背压、色谱柱温度及有机溶剂的比例，使流动相的密度和极性发生改 变，从而达到精密控制目标物分离效果的目的
[16]，在手性分离的应用中具有明显优势
[17
‑
20]。 目前，UPC2技术应用于甲氰菊酯对映体的分离及残留测定未见有报道。

技术实现思路

[0007]为了解决上述的技术问题，本专利技术的目的是提供一种超高效合相色谱法快速测定果蔬泥 中甲氰菊酯对映体残留的方法，该方法优化了果蔬泥中甲氰菊酯对映体的前处理方法和仪器 色谱分离条件等主要参数，对市售主要婴幼儿辅食果蔬泥样品进行分析测定。方法高效快速、 操作便捷、绿色环保，实现药物对映体的药效精准分析，为其他手性药物开发、残留精确判 定以及药品质量评定提供技术支撑。
[0008]为了实现上述的目的，本专利技术采用了以下的技术方案：
[0009]一种超高效合相色谱法快速测定果蔬泥中甲氰菊酯对映体残留的方法，两种甲氰菊酯对 映体结构为(
‑
)
‑
甲氰菊酯和(+)
‑
甲氰菊酯，该方法包括以下的步骤：
[0010]1)样品提取
[0011]称取试样5g，精确至0.01g，于50mL离心管中，加入20mL乙腈，均质提取，再加入3.0 g氯化钠，涡旋混匀，4 000r/min离心5min后，转移上清液至浓缩瓶中；下层残渣中加入20mL 乙腈，重复提取1次，合并2次上清液，用旋转蒸发仪浓缩至近干，用10mL乙腈∶水＝1∶1(v/v) 溶解，待净化；
[0012]2)净化
[0013]将待净化液于活化好的HLB柱中，上样后，用5mL水淋洗，弃去淋洗液，抽干后，用10mL 丙酮洗脱，收集洗脱液，于40℃水浴中氮吹干至近干，加入1mL正庚烷/异丙醇＝9∶1(v/v) 溶解定容，定容液经0.22μm滤膜过滤，待测；
[0014]3)测定色谱条件
[0015]色谱柱：CHIRALPAK AD
‑
3，150mm
×
3.0mm，3μm；流动相：A为CO2，B为甲醇；梯 度洗脱程序：
[0016]0～0.2min，3％体积比B，97％体积比A；
[0017]0.2～0.21min，3
‑
10％体积比B，97
‑
90％体积比A；
[0018]0.21～2min，10％体积比B，90％体积比A；
[0019]2～2.5min，10
‑
30％体积比B，90
‑
70％体积比A；
[0020]2.5～3min，3％体积比B，97％体积比A；
[0021]系统背压：17.2MPa；检测波长230nm；流速1.5mL/min；柱温31℃；进样量5μL。
[0022]作为优选，外消旋体标准储备液的制备方法如下：准确称取甲氰菊酯外消旋体标准品0.01 g，精确至0.1mg，用异丙醇准确定容至10mL容量瓶中，配成1.0g/L的外消旋体标准储备液。
[0023]作为优选，甲氰菊酯外消旋体的标准中间溶液：准确吸取一定量的外消旋体标准储备液， 用正庚烷/异丙醇＝9∶1,(v/v)稀释至20.0mg/L的标准中间溶液。
[0024]作为优选，对映体标准储备液的制备方法如下：分别准确称取(
‑
)
‑
甲氰菊酯、(+)
‑ꢀ
甲氰菊酯标准品0.01g，精确至0.1mg，用异丙醇溶解并定容至10mL容量瓶中，配成1.0g/L 的对映体标准储备液。
[0025]作为优选，两种菊酯对映体的混合标准工作溶液：分别准确移取一定量的(
‑
)
‑
甲氰菊 酯和(+)
‑
甲氰菊酯对映体标准储备液，用正庚烷/异丙醇＝9∶1(v/v)逐级稀释至1.0、2.0、 4.0、10.0、20.0mg/L的系列标准工作溶液。
[0026]作为优选，两种甲氰菊酯对映体的方法定量限均为0.2mg/kg，线性范围为1.0
‑
20mg/L， 线性相关系数大于0.9992，在0.2，0.4和2.0本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.超高效合相色谱法快速测定果蔬泥中甲氰菊酯对映体残留的方法，两种甲氰菊酯对映体结构为(
‑
)
‑
甲氰菊酯和(+)
‑
甲氰菊酯，其特征在于，该方法包括以下的步骤：1）样品提取称取试样5 g，精确至0.01 g，于50 mL离心管中，加入20 mL乙腈，均质提取，再加入3.0 g氯化钠，涡旋混匀，4 000 r/min离心5 min后，转移上清液至浓缩瓶中；下层残渣中加入20 mL乙腈，重复提取1次，合并2次上清液，用旋转蒸发仪浓缩至近干，用10mL乙腈：水=1:1（v/v）溶解，待净化；2）净化将待净化液于活化好的HLB柱中，上样后，用5 mL水淋洗，弃去淋洗液，抽干后，用10 mL丙酮洗脱，收集洗脱液，于40 ℃水浴中氮吹干至近干，加入1 mL正庚烷/异丙醇=9:1（v/v）溶解定容，定容液经0.22 μm滤膜过滤，待测；3）测定色谱条件色谱柱：CHIRALPAK AD
‑
3，150 mm
×
3.0 mm，3
ꢀµ
m；流动相：A为CO2，B为甲醇；梯度洗脱程序：0~0.2min，3%体积比B，97%体积比A；0.2~0.21 min，3
‑
10%体积比B，97
‑
90%体积比A；0.21～2 min，10%体积比B，90%体积比A；2～2.5 min，10
‑
30%体积比B，90
‑
70%体积比A；2.5～3 min，3%体积比B，97%体积比A；系统背压：17.2 MPa；检测波长230 nm；流速1.5 mL/min；柱温31 ℃；进样量5
ꢀµ
L。2.根据权利要求1所述的超高效合相色谱法快速测定果蔬泥中甲氰菊酯...

【专利技术属性】
技术研发人员：张文华，侯建波，谢文，张雅琴，祝泽龙，汪鹏，胡晓莉，赵非，毛壬熠，徐敦明，
申请(专利权)人：浙江省检验检疫科学技术研究院，
类型：发明
国别省市：