聚电解质膜、巨噬细胞外泌体及其在促进BMSCs分化中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种聚电解质膜、巨噬细胞外泌体及其在促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化中的应用。本发明专利技术巨噬细胞外泌体的制备方法包括以下步骤：取单核巨噬细胞，加入佛波酯培养2～3天，THP

【技术实现步骤摘要】
聚电解质膜、巨噬细胞外泌体及其在促进BMSCs分化中的应用


[0001]本专利技术涉及一种聚电解质膜、巨噬细胞外泌体及其在促进骨髓间充质干细胞(BMSCs)向成骨细胞分化中的应用。

技术介绍

[0002]生物材料的研究是人工器官和医疗器械开发的基础，随着生物技术的蓬勃发展和重大突破，生物材料已经成为了各国科学家竞相进行研究和开发的热点。生物材料的应用虽已取得极大成功，但长期临床应用仍存在不少问题，根本原因在于材料或植入体基本上是以异物存在，难以真正诱导组织再生。对生物材料表面结构和功能进行设计，使其能够针对性的激发人体相应组织和器官的再生修复功能，实现被损坏的组织或器官的永久康复，成为了当代生物材料的发展方向。
[0003]材料与人体接触或植入人体后对宿主的影响是一个非常复杂的过程，产生许多复杂的生物、物理、化学反应等。周围组织的愈合过程涉及到多种细胞类型在材料表面的相互作用，包括造血炎症细胞和间充质来源的干细胞等，间充质干细胞(MSCs)及其成骨分化的募集是在骨生物材料界面处骨形成的关键。宿主的炎症反应，尤其是巨噬细胞活性和分泌介质功本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种聚电解质膜，其特征在于：是由糖胺多糖(GAGs)层和胶原(Col)层交替吸附形成，其总层数为偶数，至少为8层以上。2.根据权利要求1所述的聚电解质膜，其特征在于：所述的糖胺多糖为透明质酸(HA)、硫酸软骨素(CS)或肝素(Hep)中的一种以上；所述的胶原为I型胶原(ColI)。3.权利要求1或2所述聚电解质膜的制备方法，其特征在于包括以下步骤：(1)将糖胺多糖溶解于NaCl溶液中，配制得到糖胺多糖溶液；将胶原加入冰醋酸溶液A中，搅拌溶解并离心，取上清液，用含有NaCl的冰醋酸溶液B调节浓度，得到胶原溶液；调节糖胺多糖溶液和胶原溶液的pH值为3.9～4.2；所述的冰醋酸溶液B中含有0.15M NaCl；(2)将基底在胶原溶液和糖胺多糖溶液中依次浸泡吸附，得到聚电解质膜，所述聚电解质膜的最外层是糖胺多糖层。4.权利要求1或2所述的聚电解质膜在制备巨噬细胞外泌体中的应用。5.一种巨噬细胞外泌体的制备方法，其特征在于包括以下步骤：取单核巨噬细胞，用完全培养基重悬，加入佛波酯培养2～3天，THP
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1细胞分化为M0巨噬细胞，将M0巨噬细胞接种于涂覆权利要求1或2所述的聚电解质膜的培养器皿中，培养2～3天后，离心，收集含有巨噬细胞外泌体的培养液上清液；从培养液上清液中提取巨噬细胞外泌体。6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所述提取外泌体包括以下步骤：上清液以300g离心10min，取上清液再以2000g离心10min，取上清液再以10000g离心30min，取上清液以100000g离心70min，弃上清，用适量的PBS将沉淀溶解；最后以100000g离心70min，弃上清，用适量的PBS将沉淀溶解，得到巨噬细胞外泌体。7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：用完全培养基重悬后，THP
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【专利技术属性】
技术研发人员：赵名艳，龚帆，楚佳奇，涂陈麟，
申请(专利权)人：广东医科大学附属医院，
类型：发明
国别省市：