一种高通量筛选新冠药物的荧光素酶互补体系及其构建方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种高通量筛选新冠药物的荧光素酶互补体系及其构建方法与应用，属于药物筛选技术领域。该体系包括表达研究外源基因的细胞株、含有3CL

【技术实现步骤摘要】
一种高通量筛选新冠药物的荧光素酶互补体系及其构建方法与应用


[0001]本专利技术属于药物筛选
，具体涉及一种高通量筛选新冠药物的荧光 素酶互补体系及其构建方法与应用。

技术介绍

[0002]3CL
PRO
是新冠冠状病毒的蛋白酶，是病毒复制的关键蛋白。最新研究报告 显示有机硒化合物Ebselen(FDA批准的新型抗炎药，能够有效抑制HIV
‑
1衣 壳蛋白的复制，可透过血脑屏障，具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤和抗病毒活性) 对新型冠状肺炎关键药物靶点Main protease(M
pro
；又称为3CL
PRO
)蛋白酶具有 很强的抑制作用，已有研究证明Ebselen可以在细胞水平上抑制3Cl
PRO
蛋白， 因此可以将该药物作为检测体系是否建立成功的一个阳性对照药物。
[0003]目前现有的药物筛选方法分为虚拟药物筛选和高通量筛选两种手段，虚拟 药物筛选虽然有着能够快速筛选的优势，但是该技术只能对化合物可能的活性 作出预测，缺乏生物活性测试，不能完全保证本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高通量筛选新冠药物的荧光素酶互补体系，其特征在于，包括表达研究外源基因的细胞株、含有3CL
PRO
的表达载体和连接有萤火虫荧光素酶片段的表达载体；其中，连接有萤火虫荧光素酶片段的表达载体中含有3CL
PRO
切割位点，萤火虫荧光素酶的C端片段连接在3CL
PRO
切割位点的上游，萤火虫荧光素酶的N端片段连接在3CL
PRO
切割位点的下游，3CL
PRO
切割位点的氨基酸序列如SEQ.ID.NO.16所示，萤火虫荧光素酶的C端片段序列如SEQ.ID.NO.12所示，萤火虫荧光素酶的N端片段序列如SEQ.ID.NO.13所示。2.如权利要求1所述的一种高通量筛选新冠药物的荧光素酶互补体系，其特征在于，所述连接有萤火虫荧光素酶片段的表达载体上还连接有DnaE，所述DnaE的基因序列如SEQ.ID.NO.11所示；萤火虫荧光素的N端与DnaE的N端连接，萤火虫荧光素的C端与DnaE的C端连接，所述DnaE的N端序列如SEQ.ID.NO.14所示，DnaE的C端序列如SEQ.ID.NO.15所示。3.如权利要求1所述的一种高通量筛选新冠药物的荧光素酶互补体系，其特征在于，所述表达载体为pCMV
‑
HA。4.如权利要求1所述的一种高通量筛选新冠药物的荧光素酶互补体系，其特征在于，所述表达研究外源基因的细胞株为HEK293T细胞。5.如权利要求1所述的一种高通量筛选新冠药物...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘义，孟渂偲，周科，黄维，曹成建，
申请(专利权)人：自贡市第一人民医院，
类型：发明
国别省市：