一种肝素钙的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种肝素钙的制备方法，属于生物医药制备技术领域，所述肝素钙的制备方法具体包括如下步骤：S1、树脂转钙，S2、一次醇沉，S3、二次转钙，S4、二次醇沉，S5、真空干燥；本发明专利技术中，以肝素钠为原料，依次经树脂转钙、一次醇沉、二次转钙、二次醇沉、真空干燥，制得肝素钙成品；并且对树脂转钙、一次醇沉、二次转钙中的参数进行优化，确定了每步反应的最佳参数；另外，本发明专利技术所述肝素钙的制备方法较市场上其他工艺方法更加简单，所用辅料更少，成本更低，制得的肝素钙成品质量合格且能稳定生产，因此，在肝素钙的制备领域有广泛的应用前景。在肝素钙的制备领域有广泛的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种肝素钙的制备方法


[0001]本专利技术属于生物医药制备
，具体涉及一种肝素钙的制备方法。

技术介绍

[0002]肝素发现距今约100年历史，作为抗凝血药和抗血栓药物广泛应用于临床，它还具有降血脂、抗炎、抗肿瘤、抗病毒等作用，是重要的糖胺聚糖类生化药物之一。肝素可与多种重要的蛋白质和多肽，如凝血和抗凝血因子、生长因子、化学活性物质以及病毒的黏附蛋白等结合，发挥多种生物活性，但长期使用会有许多负面影响，如出血和诱导血小板减少等。肝素钙是肝素的钠盐经过离子交换法或直接交换法，用钙离子置换肝素钠的钠离子制备的，其优点在于临床局部副作用如疼痛，红肿等明显减少。而且肝素以钙盐的形式存在长期稳定性更好，产品质量如效价、pH、游离硫酸根，更加稳定，可以更长时间保存。
[0003]目前，已经有大量关于肝素钙制备的文献，例如中国专利文献CN105218704A中公开了一种肝素钙的制备方法，该方法中首先对肝素钠进行溶解，然后进行树脂吸附、洗涤、洗脱、醇沉、溶解、氧化、过滤、脱水、醇沉、溶解过滤、干燥获得肝素钙，但是整个过程步骤较多，肝素有损失，收率不高；中国专利文献CN104804110 A中公开了一种高纯度那屈肝素钙，该方案中通过脱钠、裂解、还原
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转钙、紫外光照射、萃取
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超滤、醇沉
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打浆、离心
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干燥制备高纯度的那屈肝素钙，但是同样存在肝素有损失，收率不高等问题。
[0004]有鉴于此，有必要提供一种肝素钙的制备方法来解决上述技术问题。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于克服现有技术的不足，提供一种肝素钙的制备方法。解决现有肝素钙的制备过程中存在步骤较多，肝素有损失，收率不高等问题。
[0006]为解决现有技术中的上述问题，本专利技术是通过如下技术方案来实现的：
[0007]一种肝素钙的制备方法，包括如下步骤：
[0008]S1、树脂转钙：将肝素钠溶于水中，调节溶液的pH值为弱酸性，然后上样至大孔树脂柱中进行吸附，用纯化水冲洗后，以饱和氯化钙溶液洗脱至无料液流出，收集洗脱液；
[0009]S2、一次醇沉：将步骤S1中得到的洗脱液加水稀释，然后调节溶液的pH值为弱酸性，经滤膜过滤后，加入乙醇进行一次沉淀；
[0010]S3、二次转钙：倒去步骤S2中一次沉淀后的上清液，将沉淀加水溶解，得到第一溶液，然后加入饱和氯化钙溶液，进行搅拌反应，得到第二溶液；
[0011]S4、二次醇沉：将步骤S3中得到的第二溶液经滤膜过滤后，调节溶液的pH值为弱酸性，并加入乙醇进行二次沉淀；
[0012]S5、真空干燥：倒去步骤S4中二次沉淀后的上清液，沉淀物加乙醇脱水后，进行真空干燥，即可得到高纯度肝素钙。
[0013]进一步地，步骤S1中，所述肝素钠溶液的质量浓度为8～12％，所述pH值为6.0～6.5。
[0014]本专利技术中，优选肝素钠溶液的质量浓度为10％，专利技术人经过试验发现当肝素钠浓度低于8％，会有少量肝素流出，浓度太高，大孔树脂柱无法吸附全部肝素，肝素钠溶液浓度太低时，虽然大孔树脂柱能吸附住肝素，但是纯水冲洗量会相应增加，导致后面醇沉用乙醇量增加，增加成本，因此，最优的肝素钠溶液的质量浓度为10％。
[0015]进一步地，步骤S1中，所述上样流速为1.5～2.0个柱体积/h，所述树脂用量为肝素钠亿单位的1.5～2.0倍，所述纯化水冲洗2～3个柱体积。
[0016]本专利技术中，首先以1个柱体积/h流速上样，对树脂用量进行优化，确定树脂最佳用量为肝素钠亿单位的1.5～2.0倍，然后以0.5个柱体积/h逐步提高流速，当流速达到2.5个柱体积/h时，以乙醇检测出液口有沉淀析出，表明有肝素流出，若上样流速过慢，则工艺时间会被拉长，最终确定树脂用量为肝素钠亿单位的1.5～2.0倍配合上样流速1.5～2.0个柱体积/h时，大孔树脂柱能很好的吸附肝素。
[0017]进一步地，步骤S2中，所述加水稀释至溶液的电导率为70～90ms/cm，所述pH值为6.0～6.5。
[0018]本专利技术中，直接使用未加水稀释的洗脱液(电导率为120～150ms/cm)进行醇沉时，有少量氯化钙随肝素一并沉出，导致得率偏低；加水稀释后则无氯化钙沉出；若加水过多，会导致过多的氯化钙转移到上清被弃掉，成品钙含量则会偏低，因此，确定加水稀释至电导率为70～90ms/cm为最佳。
[0019]进一步地，步骤S2中，所述滤膜的规格为0.22μm，所述乙醇的浓度为95％，加入量为料液体积的2～3倍。
[0020]进一步地，步骤S3中，所述第一溶液的质量浓度为8～12％，所述加入饱和氯化钙溶液至溶液的电导率为25～30ms/cm。
[0021]本专利技术中，加入饱和氯化钙溶液至溶液的电导率为25～30ms/cm是为了更精准的控制转钙，确保成品质量合格，使得成品钠含量不得大于0.15％，钙含量在9.5～11.5％之间。
[0022]进一步地，步骤S3中，所述搅拌反应的转速为80～120rpm，时间为3～4h。
[0023]进一步地，步骤S4中，所述滤膜的规格为0.22μm，所述pH值为6.0～6.5。
[0024]进一步地，步骤S4中，所述乙醇的浓度为95％，加入量为料液体积的2～3倍。
[0025]进一步地，步骤S5中，所述乙醇的浓度为95％，所述真空干燥的温度为50～60℃，真空度小于
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0.06Mpa。
[0026]与现有技术相比，本专利技术具有如下优点：
[0027]本专利技术中，以肝素钠为原料，依次经树脂转钙、一次醇沉、二次转钙、二次醇沉、真空干燥，制得肝素钙成品；并且对树脂转钙、一次醇沉、二次转钙中的参数进行优化，确定了每步反应的最佳参数；另外，本专利技术所述肝素钙的制备方法较市场上其他工艺方法更加简单，所用辅料更少，成本更低，制得的肝素钙成品质量合格且能稳定生产，因此，在肝素钙的制备领域有广泛的应用前景。
具体实施方式
[0028]下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例，基于本专利技术中的实施例，本领域普通
技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0029]本专利技术所使用的常规试剂和设备，如无特殊说明，均可市售获得。
[0030]实施例1树脂转钙步骤中树脂用量的优化
[0031]一种肝素钙的制备方法，包括如下步骤：
[0032]S1、树脂转钙：称取肝素钠(肝素钠亿单位：200IU/mg)300g，用3L纯化水溶解，调节溶液的pH值为6.0，将溶液均分成3份，分别为料液一、料液二和料液三，然后作如下处理：
[0033]料液一以1.0个柱体积/h的流速上样至大孔树脂柱中进行吸附(树脂用量200g，其为肝素钠亿单位1.0倍)，用纯化水冲洗2个柱体积后，以饱和本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种肝素钙的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、树脂转钙：将肝素钠溶于水中，调节溶液的pH值为弱酸性，然后上样至大孔树脂柱中进行吸附，用纯化水冲洗后，以饱和氯化钙溶液洗脱至无料液流出，收集洗脱液；S2、一次醇沉：将步骤S1中得到的洗脱液加水稀释，然后调节溶液的pH值为弱酸性，经滤膜过滤后，加入乙醇进行一次沉淀；S3、二次转钙：倒去步骤S2中一次沉淀后的上清液，将沉淀加水溶解，得到第一溶液，然后加入饱和氯化钙溶液，进行搅拌反应，得到第二溶液；S4、二次醇沉：将步骤S3中得到的第二溶液经滤膜过滤后，调节溶液的pH值为弱酸性，并加入乙醇进行二次沉淀；S5、真空干燥：倒去步骤S4中二次沉淀后的上清液，沉淀物加乙醇脱水后，进行真空干燥，即可得到高纯度肝素钙。2.根据权利要求1所述的肝素钙的制备方法，其特征在于，步骤S1中，所述肝素钠溶液的质量浓度为8～12％，所述pH值为6.0～6.5。3.根据权利要求1所述的肝素钙的制备方法，其特征在于，步骤S1中，所述上样流速为1.5～2.0个柱体积/h，所述树脂用量为肝素钠亿单位的1.5～2.0倍，所述纯化水冲洗2～3个柱体积。4.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩自江，干浩，付志豪，周伟，陈新伟，卢红，邹敏，干李圳，
申请(专利权)人：湖北亿诺瑞生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：