一种部分抗凝肝素衍生物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种部分抗凝肝素衍生物，其糖醛酸2,3位开环率为2～12％，分子量为14kDa～18kDa，抗

【技术实现步骤摘要】
一种部分抗凝肝素衍生物及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种部分抗凝肝素衍生物及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]肝素(Heparin)是一种糖胺聚糖，在临床上作为抗凝药物应用已超过80年。肝素主要来源于猪小肠以及牛肺，是一种多硫酸化的线性多糖，由糖醛酸以及氨基葡萄糖构成最小二糖重复单元。其抗凝血活性与3
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O硫酸化的五糖片段GlcNAc/NS6S(1
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4)GlcA(1
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4)GlcNS3S,6S(1
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4)IdoA2S(1
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4)GlcNS6S特异性结合抗凝血酶相关。已有研究证实，肝素除了抗凝血作用之外，还具有抗炎、抗肿瘤、抗病毒和神经保护等非抗凝活性(Li J P,Vlodavsky I.Heparin,heparan sulfate and heparanase in inflammatory reactions.Thrombosis&Haemostasis,2009,102(11):823
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828.)。
[0003]脓毒症是一种由感染引起，败血症加重而来的伴有全身性炎症反应和血栓的急性病(Levi M,Tom V.Coagulation and sepsis.Thrombosis Research,2017,149(Complete):38
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44.)。当考虑到肝素同时具有的抗凝和抗炎活性时，肝素就成了一种能够应用于脓毒症的潜在治疗药物。但是，肝素强大的抗凝作用会增加出血副作用的产生，限制用药剂量。因此，为了降低肝素强大抗凝活性带来的出血风险，已有专利或者文献通过化学手段对肝素结构进行改造，完全破坏其抗凝血结构位点，从而获得去抗凝的肝素衍生物。中国专利文件CN108424474A(申请号：201710815567.8)公布了一种抗
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a因子小于等于70IU/mg的去抗凝开环肝素衍生物。但是，脓毒症的特殊性在于发生全身性炎症反应的同时伴有血栓的发生，完全开环的去抗凝肝素则无法满足脓毒症病人的血栓治疗。
[0004]因此，有必要研发一种部分抗凝肝素衍生物及其制备方法和应用解决上述问题。

技术实现思路

[0005]本专利技术目的是提供一种部分抗凝肝素衍生物及其制备方法和应用。
[0006]本专利技术的一种技术方案是：
[0007]一种部分抗凝肝素衍生物，包括如下通式结构：
[0008][0009]其中，
[0010]R1为氢、乙酰基或磺酸基中的任意一种；
[0011]R2为氢或磺酸基中的任意一种；
[0012]R3为氢、乙酰基或磺酸基中的任意一种；
[0013]R4为氢或磺酸基中的任意一种；
[0014]R5为氢或磺酸基中的任意一种；
[0015]n为1
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40之间的任意一个自然数，m为0
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10之间的任意一个自然数，m+n大于或等于10，且小于或等于40。
[0016]进一步的，所述部分抗凝肝素衍生物的糖醛酸2,3位开环率为2～12％，分子量为14kDa～18kDa，所述部分抗凝肝素衍生物的抗
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a因子大于或等于80IU/mg，小于150IU/mg。
[0017]进一步的，所述部分抗凝肝素衍生物为PACH
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1、PACH
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3和PACH
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6。
[0018]本专利技术的另一技术方案是：
[0019]一种部分抗凝肝素衍生物的制备方法，包括步骤：
[0020]1)以肝素钠为原料，加入高碘酸钠进行部分氧化；
[0021]2)加入硼氢化钠还原；
[0022]3)膜过滤除盐。
[0023]进一步的，在步骤1)中，所述肝素纳与高碘酸钠的质量比为10：1～5，所述肝素钠溶于超纯水中，所述肝素钠与所述超纯水的料水比为10g：50～1000mL。
[0024]进一步的，在步骤1)中，所述部分氧化具体为：调节pH值为4.0～5.0，于温度为4℃的条件下避光进行24小时部分氧化。
[0025]进一步的，在步骤2)中，所述硼氢化钠与高碘酸钠的质量比为1～5：1～5。
[0026]进一步的，在步骤3)之前，首先调节pH值至7.0。
[0027]进一步的，在步骤3)中，所述膜过滤为透析、超滤、切向流过滤中的任意一种，当选择超滤时，膜孔径为0.5kDa～2kDa。
[0028]上述方式所制备的一种部分抗凝肝素衍生物在制备抗凝和/或抗炎活性药物中的应用。
[0029]本专利技术提供了一种部分抗凝肝素衍生物及其制备方法和应用，其带有部分抗凝活性的部分抗凝肝素(PACH)，抗
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a因子大于或等于80IU/mg，小于150IU/mg)显得尤为重要。具体优点如下：
[0030]1)具有优于精品肝素原药的抗炎功能；
[0031]2)保留了部分抗凝效价，降低了肝素在临床使用中伴有的出血风险，更加安全可控；
[0032]3)效价稳定、结构明确；
[0033]4)使用精品肝素作为原料，工艺简单，适合大规模生产。
附图说明
[0034]为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。其中，
[0035]图1为本专利技术所述的一种部分抗凝肝素衍生物中部分抗凝肝素(PACH)和肝素原药的分子量分布图；
[0036]图2为本专利技术所述的一种部分抗凝肝素衍生物中部分抗凝肝素(PACH)和肝素原药的硫酸根含量分布图；
[0037]图3为本专利技术所述的一种部分抗凝肝素衍生物中部分抗凝肝素(PACH)和肝素原药经肝素酶降解、2D
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LC
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MS分析的一维SAX紫外色谱图；
[0038]图4为本专利技术所述的一种部分抗凝肝素衍生物中部分抗凝肝素(PACH)和肝素原药的抗
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a因子活性分布图；
[0039]图5为本专利技术所述的一种部分抗凝肝素衍生物中部分抗凝肝素(PACH)和肝素原药对LPS诱导的RAW264.7细胞炎症模型的保护作用关系图(NO含量水平)；
[0040]图6为本专利技术所述的一种部分抗凝肝素衍生物中部分抗凝肝素(PACH)和肝素原药对LPS诱导的BMDM细胞炎症模型的保护作用关系图(iNOS表达水平)。
具体实施方式
[0041]本专利技术公开了一种具有抗炎活性的部分抗凝肝素衍生物(PACH)，部分抗凝肝素结构中部分糖醛酸含有的2,3位邻二醇结构被特征性地氧化开环，得到2,3位开环糖醛酸结构，糖醛酸2,3位开环率为2～12％，优选小于或等于6％，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种部分抗凝肝素衍生物，其特征在于，包括如下通式结构：其中，R1为氢、乙酰基或磺酸基中的任意一种；R2为氢或磺酸基中的任意一种；R3为氢、乙酰基或磺酸基中的任意一种；R4为氢或磺酸基中的任意一种；R5为氢或磺酸基中的任意一种；n为1
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40之间的任意一个自然数，m为0
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10之间的任意一个自然数，m+n大于或等于10，且小于或等于40。2.根据权利要求1所述的一种部分抗凝肝素衍生物，其特征在于：所述部分抗凝肝素衍生物的糖醛酸2,3位开环率为2～12％，分子量为14kDa～18kDa，所述部分抗凝肝素衍生物的抗
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a因子大于或等于80IU/mg，小于150IU/mg。3.根据权利要求1所述的一种部分抗凝肝素衍生物，其特征在于：所述部分抗凝肝素衍生物为PACH
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1、PACH
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3和PACH
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6。4.一种根据权利要求1～3中任意一项所述的部分抗凝肝素衍生物的制备方法，其特征在于，包括步骤：1)以肝素钠为原料，加入高...

【专利技术属性】
技术研发人员：张真庆，陈磊，欧阳艺兰，易琳，李笃信，
申请(专利权)人：苏州大学，
类型：发明
国别省市：