一种用于改善肠炎的杨树转化产物的制备方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种用于改善肠炎的杨树转化产物的制备方法及应用，由β

【技术实现步骤摘要】
一种用于改善肠炎的杨树转化产物的制备方法及应用


[0001]本专利技术属于天然物质提取
，具体涉及到一种用于改善肠炎的杨树转化产物的制备方法及应用。

技术介绍

[0002]杨树广泛分布在我国东部地区，是我国重要的造林和木材加工树种之一。杨树树皮和枝叶中富含酚苷、黄酮、有机酸、单宁等植物次生代谢物质，在抗炎、抗菌、抗氧化等方面可以发挥一定的作用。杨树酚苷作为一系列已知的水杨醇的糖基化和酯化衍生物，具有优良的生物活性。小青杨树皮具有抗痢疾杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和绿脓杆菌的作用同，颤杨树皮也能对灰葡萄孢菌、意大利青霉、黑根霉菌有良好的抑菌作用，其成分邻苯二酚，阿魏酸，2,6
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二甲氧基对苯酯被证明具有抗菌活性。而从白杨提取的正丁醇萃取部分被报导清除DPPH
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自由基的抗氧化能力。同时，随着杨树速生材已广泛应用到胶合板、纸浆造纸、实木胶合板、刨花板等领域，杨树木材的需求量越来越大。但在杨树的工业加工过程中，会产生大量废弃的杨木木屑和树叶，直接抛弃会造成资源浪费。另一方面，我国养殖业普遍存在抗生素摄入过多的问题，如果将天然的农林废弃物用于制备饲料添加剂，部分替代抗生素的功效，不仅有利于实现农林业的绿色、资源化利用，也有利于促进饲料养殖行业的健康发展。
[0003]随着养殖规模的扩大，肠炎对动物的危害也随之上升。炎症性肠病(IBD)，如溃疡性结肠炎和克罗恩病，是一组可能终身复发的肠道疾病，不仅在人类中高发，在动物养殖中也容易遇到此类问题。结肠炎患者常出现体重减轻、内出血、腹泻、腹痛、结肠黏膜广泛及黏膜下病变。目前IBD的治疗方式主要包括诱导缓解和预防复发两方面，治疗药物包括氨基水杨酸、糖皮质激素、硫嘌呤和生物制剂等。但当前用于治疗IBD的药物往往存在成本高、副作用大、疗效不理想等问题，因此，从农林废弃物中寻找廉价有效的成分，对于新型、可替代抗生素的饲料添加剂的研发具有重要意义。
[0004]自然界中的黄酮、酚苷等物质常以葡萄糖苷的形式存在。有研究表明，糖苷连接的方式以及糖基数目的多少对糖苷类物质的活性有一定的影响，减少侧链糖基的数目可以提高抗氧化、抗炎、抗菌、抗肿瘤等活性。如果通过糖苷酶对杨树提取物进行催化，有助于提高其活性价值。同时，生物转化具有反应条件温和，特异性好、分离纯化容易等特点。目前关于杨树废弃物的研究，既缺乏以明确的活性功能为导向的开发利用，也缺乏有效的精深加工核心技术。

技术实现思路

[0005]本部分的目的在于概述本专利技术的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和专利技术名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和专利技术名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本专利技术的范围。
[0006]鉴于上述和/或现有技术中存在的问题，提出了本专利技术。
[0007]为解决上述技术问题，本专利技术提供了如下技术方案：一种用于改善肠炎的杨树转化产物的制备方法，由β
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葡萄糖苷酶水解杨树提取物制备而得；
[0008]其中，所述杨树提取物的原料为杨树加工废弃的杨木屑和/或杨树叶。
[0009]作为本专利技术用于改善肠炎的杨树转化产物的制备方法的一种优选方案，其中：所述β
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葡萄糖苷酶是经微生物发酵或重组菌表达并纯化制得。
[0010]作为本专利技术用于改善肠炎的杨树转化产物的制备方法的一种优选方案，其中：所述β
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葡萄糖苷酶来源于嗜热菌DSM 3960在大肠杆菌BL21中异源表达制备的β
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葡萄糖苷酶。
[0011]作为本专利技术用于改善肠炎的杨树转化产物的制备方法的一种优选方案，其中：所述水解，底物浓度1～100mg/mL，β
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葡萄糖苷酶用量1～50U/mg，反应温度70～90℃，反应时间2～4h。
[0012]作为本专利技术用于改善肠炎的杨树转化产物的制备方法的一种优选方案，其中：所述杨树提取物，采取乙醇热回流提取，抽滤，减压蒸发得到浸膏状物质；水溶所述浸膏状物质，依次用石油醚和乙酸乙酯萃取，收集乙酸乙酯组分；减压浓缩得到所述杨树提取物。
[0013]作为本专利技术用于改善肠炎的杨树转化产物的制备方法的一种优选方案，其中：所述乙醇溶液浓度为70～90％，热回流提取温度为50～60℃，料液比为1:5，提取时间2～3h，提取3次。
[0014]作为本专利技术用于改善肠炎的杨树转化产物的制备方法的一种优选方案，其中：所述石油醚萃取时间2～6h，萃取3次；所述乙酸乙酯萃取时间为2～6h，萃取3次。
[0015]本专利技术的另一个目的是提供根据上述用于改善肠炎的杨树转化产物的制备方法制备得到的杨树转化产物。
[0016]本专利技术的另一个目的是提供上述杨树转化产物在制备具有改善肠炎功能的饲料添加剂产品中的应用。
[0017]与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
[0018]本专利技术提供了一种原料来源丰富廉价、提取加工步骤简单、反应条件温和、有利于杨树资源化利用的杨树提取物精深加工的生物制备方法。作为本专利技术制备的杨树转化产物，具有成分独特、抗炎活性佳、质量可控等特点。本专利技术的杨树转化产物在资源化利用和抗炎活性上显著优于未经生物酶转化的杨树提取物。经β
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葡萄糖苷酶转化后，杨树转化产物能够抑制小鼠体重下降，改善疾病活动指数，增加结肠长度，改善结肠病理，减少炎症因子的释放。
附图说明
[0019]为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。其中：
[0020]图1为本专利技术中杨树提取物对Con A活化的淋巴细胞增殖抑制作用结果对比图；
[0021]图2为本专利技术选取的5种酶对杨树提取物的乙酸乙酯萃取相进行催化前后的HPLC图谱；
[0022]图3为本专利技术DTH3酶对杨树提取物乙酸乙酯萃取相的不同催化温度的HPLC图谱；
[0023]图4为本专利技术DTH3酶对杨树提取物乙酸乙酯萃取相的不同催化时间的HPLC图谱；
[0024]图5为本专利技术DTH3酶对杨树提取物乙酸乙酯萃取相的不同催化酶用量的HPLC图谱；
[0025]图6为本专利技术酶催化前后的杨树提取物对Con A活化的淋巴细胞增殖抑制作用结果对比图；
[0026]图7为本专利技术杨树转化产物对小鼠结肠炎的改善作用结果对比图；
[0027]图8为本专利技术杨树转化产物抑制小鼠结肠组织的炎症细胞浸润结果对比图；
[0028]图9为本专利技术杨树转化产物抑制结肠炎小鼠脾脏细胞炎症因子mRNA表达结果。
具体实施方式
[0029]为使本专利技术的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合说明书实施例对本专利技术的具体实施方式做详细的说明。
[0030]在下面的描述中本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于改善肠炎的杨树转化产物的制备方法，其特征在于：由β
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葡萄糖苷酶水解杨树提取物制备而得；其中，所述杨树提取物的原料为杨树加工废弃的杨木屑和/或杨树叶。2.如权利要求1所述的用于改善肠炎的杨树转化产物的制备方法，其特征在于：所述β
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葡萄糖苷酶是经微生物发酵或重组菌表达并纯化制得。3.如权利要求1或2所述的用于改善肠炎的杨树转化产物的制备方法，其特征在于：所述β
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葡萄糖苷酶来源于嗜热菌DSM 3960在大肠杆菌BL21中异源表达制备的β
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葡萄糖苷酶。4.如权利要求3所述的用于改善肠炎的杨树转化产物的制备方法，其特征在于：所述水解，底物浓度1～100mg/mL，β
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葡萄糖苷酶用量1～50U/mg，反应温度70～90℃，反应时间2～4h...

【专利技术属性】
技术研发人员：房仙颖，王文杰，赵林果，
申请(专利权)人：南京林业大学，
类型：发明
国别省市：