柳芽总黄酮提取物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术属于医药技术领域，涉及柳芽总黄酮提取物及其制备方法和应用。具体涉及柳芽总黄酮提取物及其制备方法和在制备抗氧化、抑菌及抗炎镇痛药物中的应用。所述的柳芽总黄酮通过如下方法制备：将采摘柳芽烘干制成粉状，用乙醇溶液超声辅助提取，乙醇溶液的浓度为30

Total flavone extract of willow bud and its preparation method and Application

【技术实现步骤摘要】
柳芽总黄酮提取物及其制备方法和应用

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[0001]本专利技术属于医药
，涉及柳芽总黄酮提取物及其制备方法和应用。具体涉及柳芽总黄酮提取物及其制备方法和在制备抗氧化、抑菌及抗炎镇痛药物中的应用。

技术介绍
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[0002]柳属(Salix L.)植物是杨柳科(Saliaceae)木本植物，已超过4属，500余种，全世界广泛分布。《本草纲目》中记载：柳树作为药用主要以垂柳(Salix babylonica.L)的根、枝、皮、叶和花等入药。柳芽(Willow Sprouts)指的是垂柳的新芽，具有较高的营养价值和药用价值，该药材性寒，味微苦，无毒。作为一种可食用的野菜，柳芽中含有丰富的碘元素，常用于缺碘类疾病的辅助治疗。现代化学成分研究表明，垂柳根、皮及叶种含有丰富的黄酮类、甾体类、生物碱类、有机酸类等。然而，目前国内外对柳芽生物成分及生理作用的研究却很少。越来越多的现代化提取技术被应用于实践实验中，与传统提取方法相比，现代化提取工艺具有提取效率高，提取物纯度高，操作简单，无溶剂残留，产品质量高等优点。目前常用的提取方法有超临界流体萃取法、超微粉碎技术、超声提取法、旋流提取法、大孔树脂吸附法等。超声提取法因其简便，不需加热，提取时间短，适用于固体制剂中测定组分的提取，应用日益广泛。
[0003]响应面设计方法(Response Surface Methodoogy，RSM)，是利用合理的试验设计方法并通过实验得到一定数据，采用多元二次回归方程来拟合因素与响应值之间的函数关系，通过对回归方程的分析来寻求最优工艺参数，解决多变量问题的一种统计方法。响应面方法不仅可以提高药物成分提取率，而且会减少实验时间及成本。
[0004]一直以来细菌和过量的自由基是导致机体患病、衰老、患癌以及其它各类疾病的主要原因。因此，通过抑菌以及抗氧化作用的研究寻找有效物质成为目前医药卫生、保健品、化妆品领域研究的热点。植物一直以来都是膳食抗氧化剂的来源，因为人们发现大多数植物都具有出色的抗氧化潜能。
[0005]炎症(inflammation，INFL)是一个指损伤因子带来的对机体的危害过程，其中具有血管系统的活体组织对这个过程所发生的防御反应，它是一种感染和许多疾病发生和发展的最基本的病理过程。炎症发生时，一方面组织和细胞被损伤因子通过某些渠道破坏；另一方面以稀释、杀伤的方式通过炎症充血和渗出反应包围引起危害的损伤因子；所受损的组织很快就修复和愈合的。炎症反应可以分为两类即急性炎症和慢性炎症。有些急性症状以血管系统的反应为主所发生的炎症，比如发红、肿胀、疼痛等。当前，非甾体抗炎药和甾体抗炎药是临床上常用的抗炎药物，虽然这类药物临床效果良好但是在药物治疗时副作用较大。因此低毒高效的新型抗炎药在临床药物研究中有很大的意义，是一重要领域。
[0006]镇痛药一向也是药物研究的热门点，临床上常用的一类是镇痛效果很好，但有成瘾性的阿片受体类镇痛药。另一类是抗炎作用显著的抑制前列腺素(Prostaglandin，PG)生成的非甾体类抗炎药，不过肠道里毒副作用明显。因此开发高效低毒的天然药物，具有应用价值。经过很多实验研究发现，从银杏、青果、映山红、桑白皮、皱皮木瓜、棉团铁线莲、蜂胶
等植物中提取的黄酮类化合物都有镇痛抗炎作用。
[0007]因此，在医药研究领域，发现新的高效低毒的具有抗氧化、抑菌及抗炎镇痛效果的中药成分是医药研究人员一直努力的方向。
[0008]现有技术没有柳芽总黄酮的提取方法和在制备抗氧化、抑菌及抗炎镇痛药物方面的相关报道。

技术实现思路
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[0009]为了克服现有技术的缺陷，本专利技术提供柳芽总黄酮，其总黄酮的含量在7％以上。
[0010]本专利技术通过如下技术方案实现：
[0011]所述的柳芽总黄酮通过如下方法制备：将采摘柳芽烘干制成粉状，用乙醇溶液超声辅助提取，乙醇溶液的浓度为30
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70％，液料比为40
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70:1，超声提取2
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3次，提取时间每次15
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35min，过滤，合并滤液，浓缩至尽干，备用。
[0012]进一步，所述的乙醇浓度为30
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50％，料液比为50
‑
70:1，超声提取2
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3次，提取时间每次15
‑
35min。
[0013]按照本专利技术方法制备得到的总黄酮含量最高可达7.55％。
[0014]所述的枊芽总黄酮的成分主要包括：黄酮醇(槲皮素、异槲皮素、山奈酚、异鼠李素、芦丁、黄芪苷)、二氢黄酮(柚皮素)、黄烷醇(儿茶素)，酚苷类化合物(水杨苷)和生物碱(葫芦巴碱)。
[0015]本专利技术提供了一种药物组合物，包含本专利技术的柳芽总黄酮和药学上可接受的载体或赋形剂。
[0016]本专利技术还提供了柳芽总黄酮和包含柳芽总黄酮的药物组合物在制备抗氧化药物中的应用。
[0017]本专利技术还提供了柳芽总黄酮和包含柳芽总黄酮的药物组合物在制备抑菌药物中的应用。
[0018]所述的抑菌药物为抑制细菌的药物。
[0019]进一步地，所述的抑菌药物为抑制革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌的药物。
[0020]具体地，本专利技术提供了柳芽总黄酮和包含柳芽总黄酮的药物组合物在制备抑制大肠杆菌、链球菌、金黄色葡萄球菌或沙门氏菌药物中的应用。
[0021]本专利技术还提供了柳芽总黄酮和包含柳芽总黄酮的药物组合物在制备抗炎药或镇痛药物中的应用。
[0022]且急性毒性试验结果表明：小鼠未见相关毒性反应及死亡现象，在临床剂量下安全可靠。
附图说明：
[0023]图1为乙醇溶液浓度、超声提取时间、液料比对柳芽总黄酮提取率的影响；
[0024]乙醇溶液浓度：X1(％) 超声提取时间：X2(min) 液料比：X3(mL/g)
[0025]图2为柳芽总黄酮提取的响应面优化曲线；
[0026]图3为柳芽总黄酮的LC
‑
MS色谱图谱；
[0027]图4为实施例10中解剖后小鼠各脏器剖检结果；
[0028]a心脏；b肝脏；c脾脏；d肺脏；e肾脏；f胸腺；
[0029]图5为实施例10中MTD试验雌、雄性小鼠体质量变化图；
[0030]图6为小鼠肝脏和肾脏病理染色结果(
×
100)；
[0031]a、b、c、d为小鼠肝脏组织染色结果；e、f、g、h为小鼠肾脏组织染色结果。
具体实施方式：
[0032]实施例1
[0033]柳芽总黄酮提取物的提取条件筛选：
[0034]考察乙醇溶液浓度、超声提取时间、料液比对柳芽总黄酮含量的影响。
[0035]柳芽总黄酮三个单因素的试验结果见图1。
[0036]本试验对柳芽中黄酮类化合物的提取工艺进行优化，分别为从乙醇浓度(30％、40％、50％、60％和70％)、超声波提取时间(15、20、25、30和35min)、溶剂和本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.柳芽总黄酮提取物，其特征在于，通过如下方法制备：柳芽用乙醇溶液超声辅助提取，乙醇溶液的浓度为30
‑
70％，液料比为40
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70:1，超声提取2
‑
3次，超声提取时间每次15
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35min，过滤，合并滤液，浓缩至尽干，即得。2.权利要求1所述的柳芽总黄酮提取物，其特征在于，乙醇溶液的浓度为30
‑
50％，料液比为50
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70:1。3.权利要求1或2所述的柳芽总黄酮提取物，其特征在于，乙醇溶液的浓度为50％，液料比为70:1，超声提取时间为35min。4.权利要求1
‑
3中任何一项所述的柳芽总黄酮提取物，其特征在于，所述的柳芽总黄酮包含黄酮醇、二氢黄酮、黄烷醇、酚苷类化...

【专利技术属性】
技术研发人员：张鹏，宋雨雯，王家庆，郭文洁，付玉洁，胡爽，
申请(专利权)人：沈阳工学院，
类型：发明
国别省市：