歧皱青霉菌菌株RA51及其应用制造技术

歧皱青霉菌菌株RA51及其应用，属于微生物技术领域。本发明专利技术的歧皱青霉(Penicillium steckii)菌株RA51，保藏于中国微生物菌株保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.23852。所述歧皱青霉发酵产物能够对生物材料中的伏马毒素进行高效降解。本发明专利技术还提供了以歧皱青霉为活性成分制备的液体菌剂或固体菌剂，用于生物降解去除生物质材料中的伏马毒素。本发明专利技术的歧皱青霉解毒活性高，特异性强，作用效果温和，不存在二次污染，可以提高农产品的质量，确保人畜的食用安全，适用于农产品、饲料工业、食品加工中伏马毒素的去除。食品加工中伏马毒素的去除。食品加工中伏马毒素的去除。

【技术实现步骤摘要】
歧皱青霉菌菌株RA51及其应用


[0001]本专利技术属于微生物
，具体涉及歧皱青霉菌菌株RA51及其应用。

技术介绍

[0002]据联合国粮农组织(FAO)评估，全世界每年约有25％的农作物受霉菌及霉菌毒素的污染，约有2％的粮食因霉变污染而不能食用。伏马毒素主要是层出镰刀菌、拟轮枝镰刀菌和花腐镰刀菌等产生的次级代谢产物，是粮食及其制品中常见的一类真菌毒素，其可污染多种农作物和经济作物。伏马毒素的存在不仅危害作物的产量和品质，而且对人畜健康造成严重威胁。该毒素可引发马脑白质软化症、猪肺水肿、婴儿神经管缺陷等症状。流行病学研究证实，人类食管癌的高发病率与食入被伏马毒素污染的谷物有直接关系。现已报道的伏马毒素，按其结构特征被划分为FA、FB、FC和FP四组。其中，以FB1的毒性最强、含量最高，国际癌症研究机构将FB1定义为2B类致癌物。
[0003]鉴于伏马毒素普遍存在且污染造成巨大危害，许多国家都限制了食品和饲料中伏马毒素的最高含量，并出台了相关法律标准监控其在食品和饲料内的污染情况。为了保障我国农产品、食品和饲料的质量安全，迫切需要研制高效安全的伏马毒素脱毒技术。目前，降低或去除伏马毒素的方法主要集中在物理、化学和生物方式。物理方法主要有辐照法、萃取法和加热法等，化学处理方法包括氨化法、碱化法、氧化法等。但物理和化学方法的主要缺点在于：反应条件过于激烈、脱毒效果不稳定、营养成分损失较大以及难以规模化生产。生物脱毒法是利用微生物或其分泌的代谢产物破坏毒素，具有较高的专一性、较强的亲和性、不破坏营养成分、环境友好等优点，表现出良好的开发和应用前景。
[0004]为对伏马毒素进行有效的消减脱毒，有必要分离筛选高效降解伏马毒素的微生物，研究其生物学特性并制成脱毒剂，用于粮食加工、饲料工业、食品工业等方面，以减少原料的污染和浪费。目前，已报道的具有降解伏马毒素能力的微生物主要有丛毛单胞菌、肠膜明串珠菌、棘状外瓶霉、鞘氨醇单胞菌和酵母菌等。但是有些微生物的脱毒机理属于物理吸附，并非实质性的生物降解，吸附在菌体细胞壁的毒素，可能会发生解吸附作用。针对这些问题，本专利技术提供了一株可降解伏马毒素的歧皱青霉，开发了歧皱青霉在伏马毒素污染控制方面的应用。

技术实现思路

[0005]针对现有技术存在的问题，本专利技术的目的在于设计提供歧皱青霉菌菌株RA51及其应用的技术方案。
[0006]为了实现上述技术效果，本专利技术公开提供以下技术方案：
[0007]本专利技术公开第一方面，本专利技术提供了一株降解伏马毒素的歧皱青霉菌株RA51，分类命名为Penicillium steckii。该菌株已于2021年11月16日保藏于中国微生物菌株保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，其保藏编号为：CGMCC No.23852。
[0008]本专利技术采集浙江舟山海滩的土壤，将土壤样品制备成菌悬浮液，以伏马毒素为唯一碳源进行筛选培养，得到一株高效降解伏马毒素的菌株RA51。经形态学鉴定和分子生物学鉴定，确定该菌株为歧皱青霉(Penicillium steckii)。
[0009]本专利技术公开第二方面，本专利技术提供了歧皱青霉菌(Penicillium steckii)菌株RA51在降解伏马毒素中的应用。
[0010]本专利技术公开第三方面，本专利技术提供了歧皱青霉菌(Penicillium steckii)菌株RA51的发酵产物在降解伏马毒素中的应用。
[0011]进一步，上述发酵产物通过以下步骤得到：
[0012]1)将歧皱青霉菌(Penicillium steckii)菌株RA51接种于PDB培养基中，28℃，150r/min，培养5d，获得分生孢子浓度为106个/mL的菌悬液；
[0013]2)将歧皱青霉的菌悬液按1％接种量接种于种子培养基中，28℃，150r/min，培养5d，获得种子液；
[0014]3)将种子液按5～8％接种量接种于发酵培养基中，25～30℃，120～160r/min，溶氧量为60～65％，通气量5～10％，培养5～7d，发酵结束后分生孢子数量至少达到108个/mL，获得发酵产物。
[0015]进一步，所述步骤2)中的种子培养基由如下组分组成：酵母提取物5g，蛋白胨10g，葡萄糖20g，用蒸馏水定容至1L；所述步骤3)中发酵培养基由如下组分组成：NaNO
3 2g，蔗糖30g，K2HPO4·
3H2O 1g，KCl0.5 g，MgSO40.5g，FeSO4·
7H2O 0.01g，用蒸馏水定容至1L，pH 6.0～8.0。
[0016]本专利技术公开第四方面，本专利技术提供了以歧皱青霉菌(Penicillium steckii)菌株RA51为活性成分的菌剂。
[0017]进一步，该菌剂含有歧皱青霉菌(Penicillium steckii)菌株RA51菌体和/或其发酵产物。
[0018]本专利技术公开第五方面，本专利技术提供了以歧皱青霉菌(Penicillium steckii)菌株RA51为活性成分的菌剂的制备方法，其包括如下步骤：
[0019]1)将歧皱青霉菌(Penicillium steckii)菌株RA51接种于PDB培养基中，28℃，150r/min，培养5d，获得分生孢子浓度为106个/mL的菌悬液；
[0020]2)将歧皱青霉的菌悬液按1％接种量接种于种子培养基中，28℃，150r/min，培养5d，获得种子液；
[0021]3)将种子液按5～8％接种量接种于发酵培养基中，25～30℃，120～160r/min，溶氧量为60～65％，通气量5～10％，培养5～7d，发酵结束后分生孢子数量至少达到108个/mL，获得发酵产物；
[0022]4)在发酵产物中按体积比15～20％加入活性剂，均匀混合，得到液体菌剂；
[0023]5)将液体菌剂与吸附剂按1：4的重量比吸附，形成固体菌剂。
[0024]进一步，所述步骤2)中的种子培养基由如下组分组成：酵母提取物5g，蛋白胨10g，葡萄糖20g，用蒸馏水定容至1L；所述步骤3)中发酵培养基由如下组分组成：NaNO
3 2g，蔗糖30g，K2HPO4·
3H2O 1g，KCl0.5 g，MgSO40.5g，FeSO4·
7H2O 0.01g，用蒸馏水定容至1L，pH 6.0～8.0；所述步骤4)中活性剂按质量份计，包括以下组成：水溶性淀粉8％、海藻酸钠1.5％、壳聚糖2％、吐温20 0.25％，溶剂为无菌水；所述步骤5)中吸附剂为硅藻土、粘土、草
炭、泥炭或活性炭的一种或几种。
[0025]本专利技术公开第六方面，本专利技术提供了以歧皱青霉菌(Penicillium steckii)菌株RA51为活性成分的菌剂在降解伏马毒素中的应用。
[0026]本专利技术还提供了以歧皱青霉菌(Penicillium steckii)菌株RA51为活性成分的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.歧皱青霉菌(Penicillium steckii)菌株RA51，其保藏编号为CGMCC No.23852。2.如权利要求1所述的歧皱青霉菌(Penicillium steckii)菌株RA51在降解伏马毒素中的应用。3.如权利要求1所述的歧皱青霉菌(Penicillium steckii)菌株RA51的发酵产物在降解伏马毒素中的应用。4.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述发酵产物通过以下步骤得到：1)将歧皱青霉菌(Penicillium steckii)菌株RA51接种于PDB培养基中，28℃，150r/min，培养5d，获得分生孢子浓度为106个/mL的菌悬液；2)将歧皱青霉的菌悬液按1％接种量接种于种子培养基中，28℃，150r/min，培养5d，获得种子液；3)将种子液按5～8％接种量接种于发酵培养基中，25～30℃，120～160r/min，溶氧量为60～65％，通气量5～10％，培养5～7d，发酵结束后分生孢子数量至少达到108个/mL，获得发酵产物。5.如权利要求4所述的应用，其特征在于所述步骤2)中的种子培养基由如下组分组成：酵母提取物5g，蛋白胨10g，葡萄糖20g，用蒸馏水定容至1L；所述步骤3)中发酵培养基由如下组分组成：NaNO
3 2g，蔗糖30g，K2HPO4·
3H2O 1g，KCl0.5 g，MgSO40.5g，FeSO4·
7H2O 0.01g，用蒸馏水定容至1L，pH 6.0～8.0。6.以权利要求1所述的歧皱青霉菌(Penicillium steckii)菌株RA51为活性成分的菌剂。7.如权利要求6所述的菌剂，其特征在于含...

【专利技术属性】
技术研发人员：王玲，胡培松，唐绍清，胡时开，圣忠华，焦桂爱，魏祥进，邵高能，谢黎虹，
申请(专利权)人：中国水稻研究所，
类型：发明
国别省市：